ICS 65.020.30 B 41 SC 中华人民共和国水产行业标准 SC/T7234—2020 白斑综合征病毒(WSSV)环介导等温 扩增检测方法 Detection method by loop-mediated isothermal amplification for white spot syndrome virus 行业标准信息服务平台 2020-08-26发布 2021-01-01实施 中华人民共和国农业农村部 发布 SC/T7234—2020 本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。 典通 本标准由农业农村部渔业渔政管理局提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC156)归口。 本标准起草单位:中国水产科学研究院黄海水产研究所。 本标准主要起草人:黄健、张庆利、邱亮、徐婷婷、桑松文、万晓媛、梁艳、杨冰、李晨。 行业标准信息服务平台 SC/T 7234—2020 白斑综合征病毒(WSSV)环介导等温扩增检测方法 1范围 本标准给出了白斑综合征病毒(WSSV)环介导等温扩增检测所需试剂和材料、器材和设备、操作步骤 和结果判定的要求 本标准适用于白斑综合征病毒的初筛检测 2 规范性引用文件 PUBI 凡是不注日期的引用文 GB/T 28630.2 CR检测法 3 缩略语 下列缩略语 活川 Bst酶:Bst 热启动 NA聚合 dNTP:脱 LAMP:环 增oops WSSV:白 4试剂和材料 相 电度的水。 4.1 除非另有说明 4.2引物: 20 WSSV-F3:5 保 WSSV-B3:5 C保 WSSV-FIP:5 TCC ATC TGT G-3' AC 20μmol/L,-20℃保 WSSV-BIP:5'-AAA( GGA CA TAGAA CGC AAG AAA CTG CCT T-3',20μmol/L,一20℃保 4.310×IsothermalAmplificationBuffer:商品化产品,精释为1×7 有液时内含20mmol/LTris-HCl, 50mmol/LKCl,10mmol/L(NH) mol/LMgS Tween20,或其他等效等温扩增缓 冲液。 4.4dNTP(各20mmol/L):含dATP、dTTP、dCTP、dGTP各20mmol/L,按附录A中A.1的规定执 行,一20℃保存,避免反复冻融。 4.5甜菜碱(Betaine):浓度5mol/L,按A.2的规定执行,一20℃保存,避免反复冻融。 4.6硫酸镁(MgSO.):浓度100mmol/L,一20℃保存。 4.7 BstDNA聚合酶:浓度8U/μL,一20℃保存。 4.8核酸染料:20×EvaGreen,商品化试剂,4℃保存,或使用其他等效试剂。 4.9 4. 10 阴性对照为已知未感染WSSV且PCR结果显示阴性的对虾组织,一20℃保存。 4. 11 空白对照为灭菌的去离子水。

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