ICS 71. 100. 70 Y42 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 29673—2013 化妆品中六氯酚的测定 高效液相色谱法 Determination of hexachlorophene in cosmetics- High performance liquid chromatography 2013-09-06发布 2014-02-15实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T29673—2013 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由中国轻工业联合会提出。 本标准由全国香精香料化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257）归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、上海市日用化学工业研究所。 本标准主要起草人：王超、马强、李新实、苏宁、张庆、郑红艳、陈静、喜飞、沈敏、康薇。 I GB/T29673—2013 引言 本标准的被测物质是我国《化妆品卫生规范》规定的禁用物质，不得作为化妆品生产原料即组分添 加到化妆品中。如果技术上无法避免禁用物质作为杂质带入化妆品时，则化妆品成品应符合《化妆品卫 生规范》对化妆品的一般要求，即在正常及合理的可预见的使用条件下，不得对人体健康产生危害 目前我国尚未规定这些物质的限量值，本标准的制定，仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法。 Ⅱ GB/T29673—2013 化妆品中六氯酚的测定 高效液相色谱法 1范围 本标准规定了化妆品中六氯酚的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于膏霜、水剂、散粉、香波类化妆品中六氯酚的测定。 本标准对于六氯酚的检出限为10mg/kg，定量限为20mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。 3原理 试样经溶剂提取，离心过滤后，用高效液相色谱进行测定，外标法定量 4试剂和材料 除非另有规定，所用试剂均为分析纯。水为GB/T6682规定的一级水。 4.1甲醇：色谱级。 4.2乙腈：色谱级。 4.3磷酸。 4.4六氯酚标准物质：分子式C13H.Cl.O2，CAS号70-30-4，纯度不小于97%，结构式参见附录A 的图A.1。 4.5六氯酚标准储备溶液：准确称取标准物质适量六氯酚标准物质（精确至0.0001g），以甲醇（4.1） 配制成浓度为1000μg/mL的标准储备液，于4℃避光保存。 5仪器和设备 5.17 高效液相色谱(（HPLC)仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。 5.2液相色谱-质谱/质谱（LC-MS/MS)仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 5.3分析天平：感量为0.0001g和0.001g。 5.4超声波水浴。 5.5离心机：转速不低于5000r/min。 5. 6 6具塞比色管：15mL。 5.7具塞聚四氟乙烯塑料离心管：15mL。 5.8行 微孔滤膜：0.45um，有机相。 1 GB/T29673—2013 6分析步骤 6.1样品处理 称取1g（精确至0.001g)试样于15mL具塞比色管中，准确加入10mL甲醇，超声提取15min。 取部分溶液转移至15mL具塞塑料离心管中，以不低于5000r/min离心10min，上清液经0.45μm微 孔滤膜过滤，滤液作为待测样液。 注：如离心难以获得上清液可加适量氯化钠破乳 6.2测定条件 高效液相色谱测定的参考条件如下： a） 色谱柱：SymmetryCis，5.μm，250mm×4.6mm（内径），或相当者； b) 流动相：乙睛和0.5%磷酸水溶液（80十20，体积比），等度洗脱； c) 流速：1.0mL/min; d) 柱温：20℃； e) 检测波长：205nm； 进样量：10μL。 (J 6.3标准曲线的绘制 用甲醇（4.1)将六氯酚标准储备溶液（4.5）逐级稀释得到的浓度为0.5μg/mL、0.8μg/mL、 1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、30μg/mL的混合标准工作溶液，按6.2的测定条件浓度由低到高进样 测定，以峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归方程。 六氯酚标准品色谱图参见图A.2，标准品紫外吸收光谱图参见图A.3。 6.4测定 按6.2的测定条件对待测样液进行测定，如果检出六氯酚的色谱峰的保留时间与标准品相一致，并 且在扣除背景后的样品色谱图中，该物质的紫外吸收光谱图与标准品一致，则可初步认定样品中存在六 氯酚，用外标法定量。待测样液中六氯酚的响应值应在标准曲线的线性范围内，超过线性范围则应稀释 后再进样分析。如采用紫外检测器，阳性样品需用液相色谱-质谱进行确认试验（参见附录B）。 6.5 5空白试验 除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。 7结果计算 结果按式（1)计算，计算结果保留两位小数，计算结果应扣除空白值： w-CXV ...(1) m 式中： 一—试样中六氯酚的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； c一一从标准工作曲线上查出的样液中六氯酚的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； V——样液最终定容体积，单位为毫升（mL)； 试样的质量，单位为克（g）。 2