ICS 65.020.30 CCS B 50 4502 柳州市 地方标准 DB4502/T 0050—2022 环棱螺品系选育技术规范 Technical specification for selective breeding of Bellamya sp strains 2022 - 04 - 22发布 2022 - 05 - 20实施 柳州市市场监督管理局 发布 DB45/T XXXXX— XXXX I 前言 本文件按照GB/T 1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由柳州市农业农村局提出、归口并宣贯。 本文件起草单位：华中农业大学、柳州市渔业技术推广站、中国水产科学研究院长江水产研究所。 本文件主要起草人：曹小娟、王卫民、文衍红 、蒋明、杨苏、黄钰微、罗福广、黄杰、朱玉蓉。 DB4502/T 0050 —2022 1 环棱螺品系选育技术规范 1 范围 本文件界定了环棱螺品系选育所涉及的术语和定义，规定了环棱螺（ Bellamya sp）品系选育的 技 术要求。 本文件适用于环棱螺品系的选育。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 19528 —2004 奥尼罗非鱼亲本保存技术规范 GB/T 22213 水产养殖术语 3 术语和定义 GB/T 22213 界定的以及下列 术语和定义适应于本 文件。 3.1 品系 strain 来源于一个亲本对（或共同祖先）形成的群体，它具有突出的特点和形状，相对稳定的遗传性和一 定数量的个体。 3.2 基础群 basic population 选育过程中待开展人工选择的群。 3.3 核心群 nucleus breeding population 按照选育选种标准，选出的优秀群体，它的生产性能、品种特征等高于一般生产群。 4 选育方案 4.1 目标 根据环棱螺养殖产业需求和条件，制定明确的近期、中期和远期的 品系选育目标。 4.2 指标 根据环棱螺的生物学性状特征和 育种目标，确定切实可行的各阶段选育 指标。 4.3 方法 建立完整的环棱螺 繁育体系，确定选育基础群、核心群。采用家系选育和群体选育相结合的方法， 结合分子和 基因标记辅助选育、 数量遗传选育 等综合育种技术，培育出 优异的环棱螺品系。 DB4502/T 0050 —2022 2 4.4 评估 建立以环棱螺品系特征 （生长速度、含肉率、味道等）为基础的选育评估体系，评估选育群体主要 经济性状、 选育潜力 和选育效果。 5 亲螺选择 5.1 外形与状态 选择壳面光滑、壳质厚、螺棱明显、 健康无病、活动力强的1龄螺(年龄鉴别方法见附录 A)为亲螺。 5.2 雌雄鉴别 右触角弯曲的为雄性，不弯曲的为雌性。 5.3 可量性状 5.3.1 雌螺体重 ＞7 g，雄螺体重＞5 g。 5.3.2 壳高＞37 mm，壳宽＞25 mm。 5.3.3 壳口宽＞13 mm，壳口高 ＞12 mm。 5.3.4 体螺层高＞ 25 mm。 6 选育群建立 6.1 群体选育 6.1.1 F0代基础群 利用微卫星标记对环棱螺遗传背景分析（遗传背景分析方法见附录B），多态信息含量 PIC＞0.6， 为选育基础群。群体数量 ＞2 000个，雌雄比 2﹕1～4﹕1，组成F0代基础群。 6.1.2 F0代核心群 从F0代基础群中筛选符合要求的个体组成 F0代核心群，群 体数量＞200个，雌雄比 2﹕1～4﹕1。 6.1.3 Fn代基础群 由Fn-1代核心群获得。 6.1.4 Fn代核心群 由Fn代基础群通过人工选择获得。 6.2 家系选育 6.2.1 F0代基础家系 根据育种目标选择核心种群的个 体，按照雌雄比2 ﹕1～4﹕1进行配对，建立F0代家系，数量 ＞80 个。 6.2.2 F0代核心家系 由F0代基础家系人工选择获得，数量 ＞10个。 DB4502/T 0050 —2022 3 6.2.3 Fn代基础家系 由Fn-1核心家系繁育获得。 6.2.4 Fn代核心家系 由Fn代基础家系通过人工选择获得。 7 人工选留 7.1 原则 7.1.1 选留标准 按育种目标确定选留标准。 7.1.2 选育指标 选育指标˃ 群体平均值1个标准差。 7.1.3 性状指标 选留个体或家系的数量和质量性状指标应 显著大于总体（ P＜0.05）。 7.2 群体选留 7.2.1 第一次筛选 在苗种培育结束时进行，选择生长优势的个体，选留率＜ 70％。 7.2.2 第二次筛选 在苗种阶段进行，雌螺发育到个重＞ 5 g，雄螺发育到个重 ＞3 g，选留个体生长快的 雌、雄螺分塘 饲养，数量小于第一次选留数量 70％。 7.2.3 第三次筛选 在后备亲螺培育阶段进行，雌螺发育 到个重＞6 g，雄螺发育 到个重＞4 g，以选育指标选留符合育 种目标的个体，雌、雄螺分开饲养。数量不多于第二次选留的 1/2。 7.2.4 第四次筛选 在亲螺培育阶段进行，雌螺发育 到个重＞7 g，雄螺发育 到个重＞5 g，对所有个体进行筛选，选留 最优个体组成选育核心群。 7.3 家系选留 7.3.1 第一次选留 在家系苗种培育结束时进行，选留符合育种目标的家系，选留率 ＜70％，选留家系应取同样数量， 且大于1 000个的苗种，在相同养殖 条件培育。 DB4502/T 0050 —2022 4 7.3.2 第二次选留 在螺种培育 阶段进行，雌螺发育到个重 ＞7 g，雄螺发育到个重 ＞5 g，选留符合选育目标、活力强 的家系；雌、雄螺分开培育，各选留数量＞300 个。同时每个家系雄、雌螺随机抽取50 个进行壳高、体 重等的测量，体重精确到 0.1 g、壳高精确到 0.1 mm，并记录。每个月对所有家系进行测量 1次，并进行 评估，直到下次选留。 7.3.3 第三次选留 在后备种螺培育 阶段进行，雌螺发育到个重 ＞7 g，雄螺发育到个重 ＞5 g。根据养殖评估结果，选 择最优家系组成选育核心家系群。 7.4 遗传背景分析 7.4.1 内容 采用微卫星标记技术对选育群体 （区分雌、雄螺） 的遗传背景分析 （遗传背景分析方法见附录B） ， 评估遗传多样性、遗传距离、近交系数及遗传分化等信息。 7.4.2 微卫星标记数 标记数量 ＞10个，每个 群体的螺数量 ＞30个。 7.4.3 遗传效果评估 选育群体应逐代计算遗传进展，评估每个世代的选育效果。选育群体的各世代均应进行主要经济性 状的一致性和均匀度的检测。评估试验设计合理，有对照和重复；数据齐全，记录完整；试验结果应做 统计分析。 8 育种留档 应按照GB/T 19528— 2004中第7章的要求执行。 DB4502/T 0050 —2022 5 A A 附录 A （资料性） 螺蛳年龄鉴别方法 A.1 初步鉴定 根据螺层缝合线的深浅。 体螺层膨胀程度。 有无纵肿脉﹑贝壳颜色。 壳顶磨损程度初步鉴别其年龄。 A.2 根据厣形态学鉴定 磨去厣上附生的足部肌肉组织，压片、固定，在低倍镜下观察，根据厣的大小、颜色和生长纹来鉴 别年龄。不同年龄的螺，其的形态有较大差别。随着年龄的增长，厣的颜色逐渐变深、变厚。厣上的生 长纹从螺旋状变为同心圆状，边缘透明部分逐渐变宽。