ICS 13.080.05 B 11 备案号： 湖 DB42 北 省 地 方 标 准 DB42/T 1086—2015 森林土壤有机质的测定 分光光度法 Determination of organic matter in forest soil-spectrophotometric method （报批稿） 2015 - 08 -04 发布 湖北省质量技术监督局 2015- 11 -01 实施 发 布 DB42/T 1086—2015 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 原理 .............................................................................. 1 4 试剂 .............................................................................. 1 5 仪器和设备 ........................................................................ 1 6 样品 .............................................................................. 2 7 分析步骤 .......................................................................... 2 8 结果计算 .......................................................................... 2 9 精密度 ............................................................................ 3 10 注意事项 .......................................................................... 3 I DB42/T 1086—2015 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009《标准化工作导则 第 1 部分：标准的结构和编写》给出的规则起草。 本标准由湖北省林业科学研究院提出。 本标准由湖北省林业厅归口管理。 本标准起草单位：湖北省林业科学研究院、武汉双龙木业发展有限责任公司、鹤峰县国营八峰山林 场。 本标准主要起草人：辜忠春、杜业云、李光荣、李军章、程天伟、姚胜海、杨志斌、王宵、蔡芳、 杨柳、李晖。 II DB42/T 1086—2015 森林土壤有机质的测定 分光光度法 1 范围 本标准规定了以分光光度法测定森林土壤有机质的原理、试剂、仪器和设备、样品、分析步骤、结 果计算、精密度和注意事项。 本标准适用于湖北省森林土壤中有机质的测定。 本标准不适用于含有氯化物土壤的有机质测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的 修改单）适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 LY/T 1210 森林土壤样品的采集与制备 3 原理 在加热条件下，森林土壤样品中的有机质被过量重铬酸钾-硫酸溶液氧化，重铬酸钾中的铬(Ⅵ)被 还原为铬(Ⅲ)，铬(Ⅲ)含量与样品中有机质的含量成正比，用分光光度计于585 nm 波长处测定吸光度， 在一定范围内，吸光度与样品中有机质的含量成正比，与标准系列比较定量求得有机质含量。 4 试剂 除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯化学试剂，实验用水应符合GB/T 6682规定的 三级水。 4.1 重铬酸钾溶液：ρ （K2Cr2O7）= 90.00 g/L 称取 90.00 g 重铬酸钾溶于适量水中，移至 1000 mL 容量瓶，加水定容，混匀，贮存于试剂瓶中。 4.2 硫酸：ρ （H2SO4）=1.84 g/mL。 4.3 葡萄糖标准溶液：ρ （C6H12O6）=13.0000 g/L 准确称取 13.0000g 经过 98℃～100℃干燥 2h 的葡萄糖，溶解于 500 mL 水中，加入 2mL 硫酸（4.2）， 冷却后移至 1000 mL 容量瓶，加水定容，混匀，转入试剂瓶中于 2℃～6℃条件下贮存。此溶液每毫升 相当于 5.20 mg 有机碳。 5 仪器和设备 5.1 电子天平：感量为 0.01 g 和 0.0001 g。 5.2 分光光度计：具 585 nm 波长，并配有 10 mm 比色皿。 1 DB42/T 1086—2015 5.3 5.4 5.5 5.6 5.7 电热恒温干燥箱：工件尺寸不小于 400 mm×400 mm×400 mm，控温精度±1℃。 具塞玻璃消解管：具有 100 mL 刻度线，管径为 30 mm～33 mm。 不锈钢丝试管架：能方便稳妥插放消解管。 可调定量加液器：1 mL～10 mL 可调。 一般实验室常用仪器和设备。 6 样品 6.1 森林土壤样品 按照LY/T 1210的相关规定制备。 6.2 风干森林土壤样品质量换算成烘干土样质量的水分换算系数（k2） 按照 LY/T 1210 中 5.2.2 的规定测定。 7 分析步骤 7.1 样品测定 7.1.1 根据有机质含量范围，准确称取 0.1000 g～0.5000 g（m）通过 0.149mm 孔径筛的风干森林土 壤样品（6.1），小心送入 100 mL 具塞玻璃消解管底部，然后将该消解管插入不锈钢丝试管架。 7.1.2 向上述消解管中加入 7.0 mL 重铬酸钾溶液（4.1），轻摇消解管使样品充分离散。用可调定量 加液器沿消解管内壁缓缓加入 6 mL 硫酸（4.2），待反应产生的气泡减少后，小心旋转摇匀，随即放入 控温为（135±1）℃的电热恒温干燥箱中，加热（60±1）min 后取出消解管，冷却，加水至约 80 mL～ 90 mL 继续冷却至室温，加水定容，加塞摇匀。 7.1.3 将上述消解液用中速定量滤纸过滤，滤液用分光光度计于波长 585 nm 处，用 10 mm 比色皿，以 水为参比，测量吸光度（A）。 7.2 标准曲线绘制 分别准确吸取 0.00 mL、0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL 葡萄糖标准溶 液（4.3）于消解管中，其对应有机碳质量分别为 0.00 mg、2.60 mg、5.20 mg、10.4 mg、15.6 mg、 20.8 mg、26.0 mg，即按照步骤 7.1.2 进行消解、冷却、定容，测量消解液吸光度。以有机碳质量为横 坐标，以对应的零浓度校正吸光度为纵坐标，绘制校准曲线，校准曲线的相关系数不小于 0.999。 7.3 空白试验 每批样品分析时，应做 2～3 个空白试验，即在消解管中不加入土样，其它过程同样品测定。记录 空白试验的吸光度（A0），要求空白平行试验吸光度绝对相差不超过 0.003。 8 结果计算 WOC = ( A  A0  a) 1000 f  m  k 2 1000 WOM = WOC×1.724 …………………………………(1) …………………………………………………(2) 式中： WOC —— 森林土壤样品中有机碳的含量，g/kg； WOM —— 森林土壤样品中有机质的含量，g/kg； A —— 森林土壤样品吸光度； A0 —— 空白试验吸光度； 2 DB42/T 1086—2015 a —— 校准曲线的截距； -1 f —— 校准曲线的斜率；mg m ——森林土壤样品称取量，g； k2 —— 风干森林土壤样品质量换算成烘干土样质量的水分换算系数； 1.724 —— 将有机碳换算有机质的系数。 平行测定结果用算术平均值表示，保留三位有效数字。 9 精密度 表1 平行测定结果允许偏差 测定值 (g/kg) 绝对偏差 (g/kg) ＜10 10～40 40～70 ＞70 ≤0.5 ≤1.0 ≤3.0 ≤5.0 10 注意事项 10.1 测定森林土壤有机质应采用风干样品。因为一些长期渍水的土壤，由于较多的还原性物质存在， 可还原重铬酸钾铬产生铬(Ⅲ)，使结果偏高。 10.2 加入硫酸时应控制流速，应沿消解管内壁缓缓加入，防止剧烈反应产生大量气泡，这些气泡会将 土壤样品中部分较轻的有机物带到消解管的中上部，会导致少量有机物滞留于消解管的上部脱离消解 液，从而未参与反应，致使结果偏低。 10.3 当土壤样品消解后溶液呈绿色且有悬浮的碳粒时，表明有机质氧化不完全，需减少称量重新试验。 10.4 对有铬(Ⅲ)污染的土壤应先测定铬(Ⅲ)含量，结果应减去污染的铬(Ⅲ)对应的有机质含量。 10.5 重铬酸钾铬酸根离子具有潜在的毒性，硫酸具有较强的化学腐蚀性，实验人员均应避免直接接触。 检测后的废液应妥善处理。 _________________________________ 3