(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210670752.3 (22)申请日 2022.06.15 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114752658 A (43)申请公布日 2022.07.15 (73)专利权人 江苏汇先医药技 术有限公司 地址 215301 江苏省苏州市昆山市玉山 镇 中华园西路1798号12号房4层、 5层 (72)发明人 颜菁　程林　孟润荣　 (74)专利代理 机构 苏州创元专利商标事务所有 限公司 3210 3 专利代理师 李萍 (51)Int.Cl. C12Q 1/6844(2018.01) C12Q 1/6806(2018.01)C12M 1/34(2006.01) C12M 1/32(2006.01) C12M 1/00(2006.01) B01L 3/02(2006.01) B01L 3/00(2006.01) (56)对比文件 CN 107904161 A,2018.04.13 CN 107034266 A,2017.08.1 1 CN 110846214 A,2020.02.28 CN 110448741 A,2019.1 1.15 CN 214439182 U,2021.10.2 2 CN 105618169 A,2016.0 6.01 CN 114367322 A,2022.04.19 DE 10013513 A1,20 00.10.19 审查员 宋如生 (54)发明名称 一种基于微流控芯片的核酸检测方法及系 统 (57)摘要 本发明公开了一种基于微流控芯片的核酸 检测方法及系统。 该核酸检测方法包括： （1） 将样 本放入样 本采集管内， 样本采集管内预先存放有 核酸裂解液， 使样本和核酸裂解液混匀反应， 得 到裂解产物混合液； （2） 将定量移液装置插入样 本采集管内并定量吸取裂解产物混合液， 定量移 液装置的移液腔中预先存放有固体形式的核酸 扩增试剂， 在移液的过程中使裂解产物混合液和 核酸扩增试剂混匀； （3） 定量移液装置将其移液 腔中的液体定量加入微流控芯片内， 在加样的过 程中， 液体进入芯片的反应仓中和环介导等温扩 增引物混合； （4） 将微流控芯片装入LAMP检测仪 中。 本发明保证检测准确性的同时减小设备成 本。 权利要求书2页 说明书7页 附图10页 CN 114752658 B 2022.10.14 CN 114752658 B 1.一种基于微 流控芯片的核酸检测方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： （1） 将样本放入样本采集管内， 所述样本采集管内预先存放有核酸裂解液， 使所述样本 和所述核酸裂解液混匀反应， 得到裂解产物混合液； （2） 将定量移液装置插入所述样本采集管内并定量吸取所述裂解产物混合液， 所述定 量移液装置的移液腔中预先存放有固体形式的核酸扩增试剂， 在移液的过程中使 所述裂解 产物混合液和所述核酸扩增试剂混匀； （3） 所述定量移液装置将其移液腔中的液体定量加入微流控芯片内， 所述微流控芯片 具有一或多个预先存放有环介导等温扩增引物的反应仓， 在加样的过程中， 液体进入所述 反应仓中和所述环介导 等温扩增引物混合； （4） 将所述 微流控芯片装 入LAMP检测仪中， 进行环介导 等温扩增 和荧光分析检测； 其中， 所述定量移液装置包括筒体、 可相对所述筒体上下移动的活塞杆、 连接于所述活 塞杆上的活塞、 及与所述活塞杆连接或一体设置的定位件， 所述筒体包括内筒及套于所述 内筒外的外筒， 所述移液腔形成于所述内筒中， 所述活塞可上下移动地设置于所述移液腔 中， 且所述活塞和所述内筒的内壁之间密封， 所述定位件可上下移动地插设于所述内筒和 所述外筒之间， 所述定位件上具有第一限位部， 所述外筒上具有与所述第一限位部相 配合 的第二限位部， 所述定位件具有第三限位部； 步骤 （2） 中， 所述定量移液装置在插入所述样本采集管之前处于初始状态， 此时所述第 三限位部抵在所述外筒的上端面上； 插入后， 向上拉所述活塞杆， 将所述裂解产 物混合液吸 至所述移液腔中， 和所述核酸扩增试剂混合； 直至所述第一限位部抵在所述外筒上 的第二 限位部后， 吸液停止； 步骤 （3） 中， 向下推所述活塞杆， 将所述移液腔中混匀后的液体推入所述微流控芯片 内， 直至所述第三限位部 抵在所述外筒和/或内筒的上端面， 加样停止 。 2.根据权利要求1所述的核酸检测方法， 其特征在于， 步骤 （2） 中的所述核酸扩增试剂 以冻干球形式存放在所述移液腔中。 3.根据权利要求2所述的核酸检测方法， 其特征在于， 所述冻干球包括扩增用酶、 三磷 酸脱氧核苷酸和缓冲液。 4.根据权利要求1所述的核酸检测方法， 其特 征在于， 所述核酸裂解液包括 生理盐水。 5.根据权利要求1所述的核酸检测方法， 其特征在于， 所述内筒的下端形成有和所述移 液腔连通的移液 口， 在所述初始状态时所述活塞和所述移液 口之间具有一段距离， 所述核 酸扩增试剂位于所述活塞和所述移液口之间。 6.根据权利要求1所述的核酸检测方法， 其特征在于， 所述内筒的外径小于所述样本采 集管的外径， 所述内筒的下端开设有通孔作为移液口， 步骤 （2） 中， 所述内筒插入所述样本 采集管中， 使 所述移液口浸入 所述样本采集管内的裂解产 物混合液中； 或， 步骤 （3） 中， 所述 定量移液装置的移液口插入所述微流控芯片的加样口中， 通过所述活塞的推力驱使所述液 体自所述加样口进入所述反应仓内， 加样完成后， 将所述微流控芯片的密封折耳折弯后盖 在所述加样口上。 7.根据权利要求6所述的核酸检测方法， 其特征在于， 所述微流控芯片的加样口和所述 反应仓之间通过微 通道直接连通， 所述 微通道具有一或多个弯折部 。 8.一种基于微 流控芯片的核酸检测系统， 其特 征在于， 包括：权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114752658 B 2样本采集管， 其中预 先存放有 核酸裂解液； 定量移液装置， 其具有预 先存放有固体形式的核酸扩增试剂的移液腔； 微流控芯片， 其具有一或多个预 先存放有环介导 等温扩增引物的反应仓； 其中， 所述定量移液装置包括筒体、 可相对所述筒体上下移动的活塞杆、 连接于所述活 塞杆上的活塞、 及与所述活塞杆连接或一体设置的定位件， 所述筒体包括内筒及套于所述 内筒外的外筒， 所述移液腔形成于所述内筒中， 所述内筒的外径小于所述样本采集管 的外 径， 所述内筒的下端开设有通孔作为移液口， 所述活塞 可上下移动地设置于所述移液腔中， 且所述活塞和所述内筒的内壁之间密封， 所述定位件可上下移动地插设于所述内筒和所述 外筒之间， 所述定位件上具有第一限位部， 所述外筒上具有与所述第一限位部相配合的第 二限位部； 所述定量移液装置具有初始状态和 最大容积状态， 在所述初始状态时所述第一 限位部位于所述第二限位部的下方， 所述活塞和所述移液 口之间具有一段距离， 所述核酸 扩增试剂位于所述活塞和所述移液口之 间； 在所述最大容积 状态时所述第一限位部和所述 第二限位部 抵紧接触。 9.根据权利要求8所述的核酸检测系统， 其特征在于， 所述定位件具有第三 限位部， 在 所述初始状态时所述第三限位部抵在所述外筒的上端面上； 在所述最大容积 状态时所述第 三限位部位于所述外筒的上端面的上 方。 10.根据权利要求8所述的核酸检测系统， 其特征在于， 所述微流控芯片包括芯片本体 和芯片壳， 所述芯片本体上设有加样口和多个排气口， 所述芯片本体内设有一或多个反应 仓， 所述反应仓分别通过一个第一微通道连通所述加样口， 各所述第一微通道分别具有一 或多个弯折部， 每个所述反应仓还分别通过一个第二微通道 连通与一相对应的所述排气口 连通， 所述芯片壳包括壳主体和密封折耳， 所述芯片本体装于所述壳主体内， 所述微流控芯 片具有检测状态和初始状态， 在所述检测状态时所述密封折耳和所述壳主体相互连接并盖 在所述加样口和/或所述排气口上； 在所述初始状态时所述密封折耳脱离所述加样口和所 述排气口。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114752658 B 3