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SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4058—2014 出口动物源性食品中玉米赤霉醇类 残留量的检测方法免疫亲和柱 净化-HPLC和LC-MS/MS法 Determination of residues of zeranols in foodstuffs of animal origin for export- HPLC and LC-MS/MS method with immunoaffinity column clean-up 行业标准信息服务平台 2014-11-19发布 2015-05-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4058—2014 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位:中华人民共和国重庆出人境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院 本标准主要起草人:李贤良、曹淑瑞、唐柏彬、存显、彭涛、王国民、张雷。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4058—2014 出口动物源性食品中玉米赤霉醇类 残留量的检测方法免疫亲和柱 净化-HPLC和LC-MS/MS法 1范围 本标准规定了动物源食品中α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米 赤霉酮和玉米赤霉烯酮残留量的高效液相色谱检测方法以及高效液相色谱-质谱/质谱检测确证方法。 本标准适用于猪肉、鸡肉、鱼肉、牛肝、牛奶、鸡蛋及肉罐头等动物源食品中α-玉米赤霉醇、β-玉米赤 霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮和玉米赤霉烯酮残留量的定性确证和定量测定。 液相色谱法不适用于猪肉样品。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法 3方法提要 样品经β-葡萄糖苷酸/硫酸酯复合酶水解后,采用乙醚提取(牛奶样品用乙提取)、氢氧化钠反萃 取,经免疫亲和柱富集和净化后,采用HPLC及LC-MS/MS检测和确证,外标法定量。 4试剂和材料 雅信息服务平台 除特殊注明外,所有试剂均为分析纯,水为符合GB/T6682规定的一级水。 甲醇:高效液相色谱级。 4.2 乙睛:高效液相色谱级 4.3 三氯甲烷:高效液相色谱级。 4.4 乙醚。 冰乙酸。 4.6 三水合乙酸钠。 4.7 氢氧化钠。 4.8 磷酸:纯度大于85%。 4.9 氯化钠。 4.10 十二水合磷酸氢二钠。 4.11 磷酸二氢钾。 4.12 氯化钾。 4.13 0.05mol/L乙酸钠缓冲液:称取6.80g乙酸钠(4.6),用900mL水溶解,用冰乙酸(4.5)调节pH 1 SN/T4058—2014 值为4.80,并定容至1L。 4.140.5mol/L氢氧化钠溶液:称取2.00g氢氧化钠(4.7)用100mL水溶解。 4.153.0mol/L磷酸溶液:量取4mL磷酸(4.8)和16mL水,混匀。 4.16磷酸盐缓冲液(pH7.40):分别称取8.00g氯化钠(4.9)、2.90g十二水合磷酸氢二钠(4.10)、 7.40,并定容至1L。 4.17甲醇-乙腈-水(50:15:35,体积比):量取50mL甲醇,15mL乙和35mL水,混勺。 4.18β-葡萄糖苷酸/硫酸酯复合酶:含134600U/mLβ-葡萄糖苷酸酶,5200U/mL硫酸酯酶(H-2, from Helix pomatia)。 4.19标准品:α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮和玉米赤霉 烯酮的纯度≥98.0%,6种玉米赤霉醇类化合物信息表见附录A。 备液,于一18℃保存,有效期3个月。 释,配制成浓度各1.0μg/mL混合标准储备液。 4.22根据需要用检测所需流动相把混合中间标准溶液(4.21)稀释成适合浓度的混合标准工作溶液, 现用现配。 4.23免疫亲和柱:玉米赤霉醇类六合一免疫亲和柱,保存于4℃冰箱中。取出免疫亲和柱,待柱内储 存液流出后即可上样。 4.240.22um微孔滤膜:有机系。 5仪器和设备 5.1 高效液相色谱仪,配二极管阵列检测器 5.2高效液相色谱-质谱/质谱仪,配电喷雾离子源(ESI)。 5.3电子天平:感量为0.01g和0.1mg 业标准信息服务平 5.5旋涡混匀器。 5.6恒温箱。 5.7氮吹仪。 5.8离心机:不低于5000r/min。 5.9 具塞塑料离心管:50mL。 6试样的制备与保存 6.1肌肉、内脏和肉罐头 从原始样品取出有代表性样品约500g,用组织捣碎机充分捣碎混勾,装人洁净容器作为试样,密封 并做好标识,于一18℃冰箱内保存。 6.2牛奶 从原始样品取出有代表性样品约500g,搅拌均匀后装人洁净容器内,密封并做好标识,于4℃冰箱 内保存。 2
SN-T 4058-2014 出口动物源性食品中玉米赤霉醇类残留量的检测方法 免疫亲和柱净化 - HPLC和LC-MS-MS法
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