ICS_13. 310 A 92 GA 中华人民共和国公共安全行业标准 GA/T 205--1999 中毒案件检材中毒鼠强的气相色谱 定性及定量分析方法 Methods of qualitative and quantitative analysis for tetramine in case samples by GC 1999-03-05发布 1999-07-01实施 中华人民共和国公安部‧发布 GA/T 205—1999 前 言 毒鼠强为我国近几年使用较广泛的鼠药。该药毒性较大，用来投毒、自杀的刑事案件和中毒事故较 多。 公安部第二研究所于1992年和1993年分别立部级项目《毒鼠强中毒检验的研究》、《毒物分析中固 相萃取技术研究》，对生物检材中毒鼠强鼠药的分析检验进行了专门研究。研究成果经数年大量实际案 例的应用，效果很好，已在全国公安系统部分省市办案中推广运用。在此基础上制定了本标准。 本标准的主要内容有原理、提取净化方法、气相色谱定性及定量方法和操作程序及结果评价等，适 用于中毒检材血、肝、胃及胃内容物、肾等以及现场可疑物证中毒鼠强的检验。最小检测量为1020 ng/mL，回收率为80%左右。 本标准由中华人民共和国公安部提出。 本标准由全国刑事技术标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：公安部第二研究所。 本标准主要起草人：于忠山、孙静、赵敬真、封世珍、周恒智。 中华人民共和国公共安全行业标准 中毒案件检材中毒鼠强的气相色谱 GA/T205—1999 定性及定量分析方法 Methods of qualitative and quantitative analysis for tetramine in case samples by GC 1范围 本标准规定了中毒检材中毒鼠强的定性及定量分析方法。 本标准适用的检材有：中毒者的呕吐物、剩余食物、胃吸出液及中毒死亡者的胃内容物、胃、血、肝、 肺、肾及注射部位肌肉等组织和体液，以及现场收集的怀疑有鼠药的物证。 2引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均 为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。 GA/T122-1995毒物分析名词术语 3定义 本标准采用GA/T122中的定义。 4原理 本方法采用添加内标物或空白检材添加毒鼠强作对照的气相色谱的定性及定量分析方法。按平行 操作的要求，经过提取、净化及浓缩至一定体积后，用火焰光度（硫型）或氮磷检测器气相色谱仪进行检 测，以RT值（绝对保留时间）或RRT（相对保留时间）作定性分析；与平行操作的添加标准品响应值比 较，根据峰高或面积之比，用内标法或外标法计算检材中毒鼠强的含量。 5试剂（所用试剂均为分析纯) 5.1苯。 5.2乙酸乙酯。 5. 3 二氯甲烷。 5.4 无水硫酸钠。 5.5 丙酮。 5.6甲醇。 5.7二氧六环。 5.8无水乙醇。 5.9中性层析氧化铝（80～100目）：市售试剂在130℃下活化3h，冷却后按6%比例加蒸馏水拌匀，装 中华人民共和国公安部1999-03-05批准 1999-07-01实施 1 GA/T 205-1999 人原瓶，平衡24h后备用。 5.10硅镁吸附剂（80100目）：市售硅镁吸附剂在130℃下活化20h，冷却后按4%比例加蒸馏水拌 匀，装人原瓶，平衡24h后备用。 5.11层析活性炭（20～40目） 5.12GDX-403固相小柱：市购（40～60目）或自己填装。临用前用5mL甲醇淋洗，然后用5mL蒸馏 水淋洗柱子进行活化。 5.13毒鼠强标准溶液 5.13.1标准储备液：准确称取毒鼠强纯品一定量，用少许二氧六环溶解后，加苯稀释，配制成浓度为含 10.0mg/mL的鼠强标准储备液，置一10℃冰箱中保存，使用期为2a。 5.13.2标准使用液：将毒鼠强标准储备液用无水乙醇稀释10倍，得1.0mg/mL的溶液，一4℃C冰箱保 存，使用期为0.5a。临用前再取此液稀释至0.10、0.050、0.0050mg/mL的使用液，4℃冰箱保存，使用 期20d。 5.14内标物标准溶液 5.14.1内标物标准储备液：准确称取咖啡因纯品用无水乙醇配制成10.0mg/mL的储备液，-10℃冰 箱保存，使用期为1a。 5.14.2内标物标准使用液：将咖啡因标准储备液用无水乙醇稀释成1.0、0.10、0.010mg/mL的使用 液，4℃冰箱保存，使用期20d。 5.15混合标准使用液：取毒鼠强和咖啡因1.0mg/mL的溶液装于同一容量瓶中，用乙醇稀释为0.10、 0.050mg/mL的混合标准使用液，冰箱保存，使用期20d。 6仪器及器材 6.1 气相色谱仪：具有氮磷检测器或火焰光度检测器，并配有色谱数据处理机。 6.2电动振荡器。 6.3离心机。 6.4K·D浓缩器或其他浓缩装置。 6.5玻璃层析柱。 6.6电动吸引器及真空泵。 6.7微量注射器：10μL、100μL。 6.8实验室常用玻璃器材等。 7操作方法 7.1定性分析 7.1.1提取净化方法 7.1.1.1中性氧化铝一硅镁柱净化法（适合GC/FPD-S、GC/NPD或GC/FID分析） a）提取 取呕吐物、胃内容物、胃、肝等组织，绞碎后取5g装于烧杯中，加无水硫酸钠研成干沙状，转人 100mL分液漏斗中，用30mL苯提取2次，每次振摇15min，分出提取液待净化用。 同时取相应的空白检材2份，其中1份添加毒鼠强标准使用液20pμg作阳性对照，另1份做阴性对 照。按上述操作程序与检材平行操作。 或者：取呕吐物、胃内容物、胃、肝等组织绞碎各取1g，血液1.0mL装于10mL具塞试管中，用 6mL苯提取3次，每次振5min，离心，分出上清液待净化用。 取相应的空白检材1g，共2份，其中1份添加2.0μg毒鼠强作阳性对照，另取1份作阴性对照。按 上述操作程序与检材平行操作。 2 GA/T 205—1999 b）净化及浓缩 装柱：取长约30cm，内径1～1.5cm玻璃层析柱。在底层松松塞上少许脱脂棉，依次加入无水碗酸 钠2～3g，中性层析氧化铝或硅镁吸附剂2~5g，2～3g无水硫酸钠。如遐有色素较重，可加0.5g活性 炭在层析氧化或硅镁吸附剂柱层中间。 净化及浓缩：用与提取液相同的溶剂-15mL预淋装好的柱子，弃去预淋液。上述的提取液倒人柱 中，控制流速使一滴接一滴流出。待第1次提取液流完后，倒人第2次、第3次提取液，最后用6mL苯洗 脱。收集的提取净化液移入K·D浓缩器或其他浓缩装置中，在60～70℃下浓缩至0.2～1.0mL，备 检。 7.1.1.2固相柱净化法（适用于GC/NPD分析） 取呕吐物、胃内容物、绞碎的胃、肝等组织各1.0g，血液1.0mL，加人咖啡因内标物2.0μg，加蒸馏 水6～8mL，浸泡提取1～2h，然后离心，滤纸过滤。滤液通过活化好的GDX-403固相柱，使流速为1~ 2mL/min，待样品液流完后用5mL燕馏水洗涤小柱，然后抽真空15min，或用吸耳球由上至下挤出柱 中的水液。然后用4mL丙酮洗脱柱子，使流速为1～2mL/min，丙酮洗脱液用1g无水硫酸钠脱水。将 提取液浓缩至0.5~1.0mL，供GC/NPD分析。 取相应空白检材2份，在其中1份中加人毒鼠强和内标物咖啡因混合标准各2.0μg，另1份作阴性 对照。按前述操作程序与检材进行平行操作，进行阳性对照和阴性对照分析。 7.1.2GC分析条件（参考值） 7.1.2.1GC/NPD条件 条件1：3%OV-17chromosorbWHP2m×2.6mm(id）填充玻璃柱；柱温240℃、检测器温280℃、 条件2:OV-1、BP-1、BP-10、HP-1、HP-5等弹性石英毛细管柱，25mX0.25mm(id）X0.32μm。 柱温：180℃保持1min，以10℃/min速率升温至280℃，保持5min。 汽化室及检测器温：280℃。 高纯氮气：柱前压15Psi；分流比30：1，其他同条件1。 7.1.2.2GC/FPD-S条件 BP-125m×0.25(id)mm×0.32μm弹性石英毛细色谱柱，其他同条件2。 7.1.3检测 7.1.3.1进样 将上各试样提取净化液1.0μL注人设定好的色谱仪中，每个样品进样2～3次，并同时注人单一或 混合毒鼠强标准使用液。 7.1.3.2记录及计算 式计算添加阳性对照品的回收率。 空白添加毒鼠强峰面积平均值、 回收率（%）= 等量已知标准品蜂面积平均值 X100 7.2定量分析 7.2.1提取与净化同7.1.1。 7.2.2GC分析条件同7.1.2。 7.2.3检测同7.1.3。 7.2.4计算含量 记录检材及空白添加标准品峰面积值，计算出各样品的峰面积平均值（如用内标法，应同时记录内 标物峰面积值并标出峰面积平均值）。按下列各公式计算检材中毒鼠强含量相对相差。 3 GA/T 205—1999 外标法计算公式： 药物含量X(μg/g(mL))= 检材中毒鼠强蜂面积（峰高）平均值XAX检材体积×V添 添加毒鼠强峰面积（峰高）平均值×添加样品体积×V检×检材量(g（mL)) 式中：A——添加药物的总量，g! V添—添加样品进样体积，uL V检—检材样品进样体积，μL。 内标法计算公式： 毒鼠强进样量（ug）×内标峰面积（ （用空白添加的结果计算） 校正因子f= 丙标进样量（ug）×毒鼠强峰面积 校正因子×检材中毒鼠强峰面积×内标添加量（ug） 药物含量 X(μug/g(mL)) = 内标蜂面积×检材量(g(mL)) X 式中：X1,X2—-两份相同检材测得的含量值；