ICS13.310 GA A92 中华人民共和国公共安全行业标准 GA/T1530—2018 法庭科学 230种药（毒）物液相色谱-串 联质谱筛查方法 Forensic science-LC-MS/MS screening methods for 230 drugs 2018-11-05发布 2018-11-05实施 中华人民共和国公安部 发布 GA/T 1530—2018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（SAC/TC179/SC1）提出并 归口。 本标准起草单位：上海市公安局物证鉴定中心、公安部物证鉴定中心。 本标准主要起草人：张玉荣、叶海英、梁晨、汪蓉、于忠山、王芳琳 GA/T 1530—2018 法庭科学 230种药（毒）物液相色谱-串 联质谱筛查方法 1范围 本标准规定了法庭科学血液、尿液中230种药（毒）物的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS)检验 方法。 检材，液体检材，包装物检材)和其他生物检材（肝、肾、胃及胃内容等）可以参照本方法。 规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法 GA/T122 毒物分析名词术语 3 术语和定义 GA/T122界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 自标物 objective 需要检验的成分。 原理 4 以普罗地芬（SKF525A）和烯丙异丙巴比妥为内标，对检材样品进行提取、净化及浓缩，用液相色谱 串联质谱法（LC-MS/MS)多反应监测（MRM)模式进行检测，以保留时间（tR）、两对母离子/子离子对 作为判断依据进行定性分析。 试剂和材料 5.1试剂 实验用水应符合GB/T6682一2008规定的一级水， 除非另有说明，在分析中使用的试剂均为色谱纯，试剂包括： a) 乙腈。 b) 甲醇。 c) 甲酸。 d) 甲酸铵。 1 GA/T1530—2018 e) 乙酸乙酯：分析纯。 三氯甲烷。 f) 硼砂：分析纯。 h) 流动相A相：2mmol/mL甲酸铵和0.05%甲酸的水溶液。取0.126g甲酸铵和500μL甲酸， 加水至1000mL。 i) 流动相B相：2mmol/mL甲酸铵和0.05%甲酸的乙腈溶液。取0.126g甲酸铵和500μL甲酸 溶于40mL水中，加乙腈960mL。 j) 初始流动相：取流动相A相950mL，流动相B相50mL，混匀。 硼砂缓冲液：取硼砂76.27g溶于1000mL水中，配成0.2mol/L硼砂缓冲液（pH值约为9.2）。 1) 标准溶液： 1.0mg/mL标准物质溶液：分别配制230种药（毒）物（见附录A）各1.0mg/mL的标准物 质甲醇（或乙腈、三氯甲烷等)溶液，混匀，密封，置于冰箱中冷藏保存。有效期12个月、 2) 0.1mg/mL单一标准工作溶液：分别移取1.0mg/mL标准物质溶液各1.0mL，用合适的 溶剂（甲醇、乙腈、三氯甲烷等）定容至10mL，混匀，密封，置于冰箱中冷藏保存。有效期 6个月。 3) 混合标准工作溶液：根据实验需要配制相应浓度的混合标准工作溶液。 4) 1.0mg/mL内标溶液：用甲醇分别配制1.0mg/mL普罗地芬（SKF525A）和1.0mg/mL烯 丙异丙巴比妥内标溶液，混匀，密封，置于冰箱中冷藏保存。有效期12个月。 5） 混合内标工作溶液：含5ng/mL普罗地芬和2000ng/mL烯丙异丙巴比妥的混合初始流 动相溶液。移取5μL的1.0mg/mL普罗地芬标准物质溶液和2.0mL的1.0mg/mL烯 丙异丙巴比妥标准物质溶液，用初始流动相稀释至1000mL，混匀，密封，置于冰箱中冷 藏保存。有效期1个月 5.2材料 材料包括具盖离心管、尖底试管、玻璃进样瓶等。 5仪器和设备 6 仪器和设备包括： a) 液相色谱-串联质谱仪（LC-MS/MS)：配有电喷雾离子源（ESI)和三重四极杆质量分析器； 涡旋振荡器； c) 超声波清洗器； 电子天平； d) e) 离心机； f) 浓缩器。 定性分析 7.1 样品提取 7.1.1血液或尿液检材样品提取 取1mL血液或尿液检材样品置于具盖离心管内，加入混合内标工作溶液0.2mL、乙酸乙酯5mL， 用涡旋振荡器振荡提取，用离心机4000r/min离心5min，取上层清液至尖底试管中；具盖离心管中再 2 GA/T1530—2018 加入硼砂缓冲液2mL、乙酸乙酯5mL，用涡旋振荡器振荡提取，用离心机4000r/min离心5min，取 上层清液至尖底试管中；合并两次提取的上层清液，浓缩至干，残留物用初始流动相100μL溶解，作为 检材样品提取液，供仪器检测。 7.1.2 空白样品 取血液或尿液空白样品1份，按7.1.1操作，得到空白样品提取液 7.2 仪器检测 7.2.1 仪器条件 以下为参考条件： a) 色谱柱：XTerraMSCis"液相色谱柱（2.1mmX150mm，3.5μm）或其他等效柱； b) 柱温：45℃； ( 流动相：流动相A相和流动相B相； d) 流速：0.2mL/min； e) 洗脱：梯度洗脱，梯度洗脱条件见表1； f) 扫描方式：正负离子同时扫描； g) 检测方式：多反应监测（MRM)； h) 电喷雾电压：3200V； i) 雾化气流速：氮气（纯度大于99.999%），600L/h； j) 锥孔反吹气流速：氮气（纯度大于99.999%），50L/h； k) 离子源温度：105℃； 1) 碰撞气：氩气（纯度大于99.999%）； m) 各药（毒）物和内标的分组情况参见附录B中表B.1，MRM参数和检出限参见附录C中表C.1。 表 1 梯度洗脱条件 时间/min 流动相A相 流动相B相 0.00 95.0% 5.0% 0.50 %0'S6 5.0% 1.00 90.0% 10.0% 5.00 80.0% 20.0% 10.00 50.0% 50.0% 18.00 30.0% 70.0% 20.00 0.0% 100.0% 23.00 95.0% 5.0% 33.00 95.0% 5.0% 1) XTerraMSCis是Waters公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该 产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 3