SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4395-2015 出口食品中磷化氢残留量的检测方法 气相色谱法 Determination of residual phosphine in export foods- Gas chromatoghraphic method 2016-07-01实施 2015-12-04发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4395—2015 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国宁夏出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：李萍、杨旭光、郝俊虎、陈林、孙敏、李竹岩、闫永利。 - SN/T4395—2015 出口食品中磷化氢残留量的检测方法 气相色谱法 1范围 本标准规定了出口食品中磷化氢残留量的检测方法。 本标准适用于干果、鲜果、粮食等植物源性食品中磷化氢残留量的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 样品中磷化氢残留采用顶空提取，采用毛细管气相色谱法检测食品中磷化氢残留量，以保留时间定 性，多点外标法定量。 4试剂与材料 除非另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。 4.1氯化汞（HgCl2）。 4.2氢氧化钠（(NaOH）)。 4.3乙醇(CHsOH)。 4.4磷化铝片剂：山东龙口化工厂，有效成分56%以上。 4.51.5%的氯化汞溶液：称取1.5g氯化汞，加水溶解后并稀释至100mL。 4.60.05mol/L氢氧化钠溶液：准确称取0.2g氢氧化钠加水溶解后，放冷，并稀释至100mL。 4.795%乙醇溶液：乙醇和水的比例为95：5。 4.8草酸溶液：将草酸放在干燥器内过夜，准确称取78.75mg（准确到0.00001g）3份，各加25mL蒸 馏水，加酚指示剂1滴2滴，用0.05mol/L氢氧化钠溶液滴定到溶液出现浅红色30s不退即为终 点，计算出氢氧化钠溶液的准确浓度。 4.9甲基红溶液：称取0.05g甲基红溶解于50mL95%的酒精溶液。 4.10酚酞溶液：称取0.1g酚酞溶解于50mL95%的酒精溶液。 4.11磷化氢标准气体制备：在一个1000mL的试剂瓶中放1片磷化铝片剂，加10mL水，用橡胶塞密 封（以便用气体进样针取气），室温下放置2天，磷化氢气体会完全释放出来。 4.12磷化氢气体含量的测定：在一个50mL带橡胶垫圈的螺旋盖密封的试剂瓶中预先加10mL95% 乙醇20mL，再加1.5%的氯化汞溶液20mL，从1000mL瓶中用注射器取5mL磷化氢气体注射到此 瓶中，充分摇动瓶子使其反应，并把瓶口倒置约30S即可反应完全。然后以甲基红作指示剂，用 0.05mol/L的氢氧化钠标准溶液滴定所生成的盐酸，用式（1)计算出大瓶中磷化氢的浓度。 1 SN/T4395--2015 VXcX34 ...( 1 ) 式中： 磷化氢的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； V 氢氧化钠的体积，单位为毫升（mL）； 氢氧化钠溶液的浓度，单位为摩尔每升（mol/L）； 34 PH3气体的相对分子质量； 3 一1个mol的磷化氢气体相当于3个mol的盐酸； 5 -从1000mL瓶里取出5mL气体； 1000 从mg换算成uμg。 4.13标准曲线的制备：将1000mL瓶中已测出准确浓度的气体进行稀释。用20mL顶空瓶充满氮 气，再用100μL气体进样针注射到20mL顶空瓶中，即为稀释后的PH3气体，如果浓度过高，可以照此 办法继续稀释，取稀释后PH3气体不同的浓度在60℃恒温20min后，进行气相色谱分析。用峰高～ PH3浓度制作标准曲线。 5仪器和设备 5.1 气相色谱仪：配有火焰光度检测器（FPD）。 5.2 分析天平：感量为0.01g和0.00001g。 5.3 组织捣碎机。 5.4 恒温水浴振荡器。 5.5 100μL气体进样针。 5.6 20mL顶空进样瓶。 5.7 50mL带橡胶垫圈的螺旋盖密封的试剂瓶。 5.8 1000mL带橡胶垫圈的螺旋盖密封的试剂瓶。 试样的制备 6 6.1 制样要求 在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 6.2 试样的制备 样品经粉碎机粉碎，混匀，分成两份，分别装入洁净容器内，一份作为试样供检测用，另一份作为留 样保存并做好标识，于一18℃冰箱内保存。 6.3顶空提取 称取试样约5g（精确到0.01g）于20mL顶空瓶中，干果和粮食在60℃水浴中加热30min，鲜果 在60℃水浴中加热60min，吸取样品上层的气体进样测定。 7气相色谱测定 7.1气相色谱参考条件 气相色谱参考条件如下： 2 SN/T4395—2015 色谱柱：1701型毛细管气相色谱柱，30m×0.32mm，0.25μm，或相当者； b) 进样口：200℃，分流比10：1； 柱温和柱流量：100℃保持10min，柱流量恒流2.0mL/min； c） d) 检测器：250℃，尾吹气60mL/min，氢气75mL/min，空气100mL/min。 7.2标准工作曲线 配制1.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、50.0ng/mL标准气体，以各浓度的峰面积 平均值对含量做线性拟合，得到磷化氢气体线性关系。 7.3 3定量测定 在仪器最佳状态下，进样量50μL。试样中待测物的响应值应在仪器检测的线性范围内，若其响应 值超过线性范围，可调整定容体积使之满足定量测定线性范围的要求。在上述仪器条件下磷化氢气体 参考保留时间分别约为1.7min。标准品气相色谱图参见附录A。 7.4空白实验 除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。 8 结果计算 8.1试样中磷化氢残留的含量利用数据处理系统按外标法计算或按式（2)计算： V ·(2) 式中： X-—试样中被测组分含量，单位为微克每千克（μg/kg)； -从基质标准工作曲线得到的被测组分溶液浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）； V—一试样溶液定容体积，单位为毫升（mL）； 试样的质量，单位为克（g）。 ul 8.2 2计算结果应扣除空白值。 9 方法定量限和回收率 9.1 测定低限 本方法磷化氢气体的测定低限均为10μg/kg。 9.2回收率范围 磷化氢气体在枸杞、玉米、面粉、葡萄干、苹果、大米基质中六个不同添加水平的添加回收率范围参 见附录B。 3 SN/T4395—2015 附录A （资料性附录） PH，气体标准物质的气相色谱图 PH：气体标准物质的气相色谱图见图A.1。 .765 150 pA 130 120 110 100 06 80 70 2i 0. 5 2 2. 5 min 图A.1PHs气体标准物质（50μg/kg）的气相色谱图 SN/T4395—2015 附录B （资料性附录） 回收率范围 气相色谱法中磷化氢气体不同基质、三个添加水平的回收率范围见表B.1。 表B.1气相色谱法中磷化氢气体不同基质、三个添加水平的回收率范围 平均值 基质 添加水平 测定结果 回收率范围 CV 名称 μg/kg μg/kg % % ug/kg 10 8.262 9.183 8.894 9.732 9.003 9.466 060'6 82.62~97.32 5.59 枸杞 20 17.236 16.649 18.092 19.041 20.055 18.862 18.323 83.25~100.28 6.83 50 49.076 42.129 47.088 40.032 45.611 47.263 45.200 80.06~98.15 7.61 10 78.93~95.92 9.165 9.138 8.897 9.592 8.154 .893 8.807 7.37 玉米 20 18.256 19.926 16.354 19.061 20.057 19.723 18.896 81.77~100.29 9.86 50 48.293 40.446 43.437 49.656 47.164 49.114 46.352 80.89~99.31 6.40 10 8.916 8.651 8.025 8.769 7.768 8.054 8.364 77.68~89.16 5.55 面粉 20 16.242 17.793 19.094 18.125 17.927 15.789 78.95~95.47 6.85 1.495 50 40.045 48.124 42.056 46.151 49.798 47.987 45.694 80.09~99.60 6.40 10 8.175 8.003 8.779 9.303 9.257 8.158 8.613 80.03~93.03 6.75 葡萄 20 17.017 20.320 17.322 18.850 18.981 19.983 18.746 85.09~101.60 6.30 干 50 50.211 42.643 40.462 45.099 48.467 49.454 46.056 80.92~100.42 5.40 10 8.224 7.632 8.815 7.987 9.253 8.126 8.340 76.32~92.53 7.07 苹果 20 19.859 16.087 19.752 18.727 19.093 18.878 18.7