SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4380—2015 缓慢搅动法 辛醇-水分配系数 Partition coefficient of 1-octanol/waterSlow-stirringmethod 2015-12-04发布 2016-07-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T 4380—2015 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 技术内容采用OECD123《Partitioncoefficient(1-Octanol/Water）：Slow-stirringMethod》。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国上海出人境检验检疫局、沈阳化工研究院测试评价中心。 本标准主要起草人：王海婷、姚丽芳、李蔚、侯松嵋、李璇、朱洪坤、蔡晓峰、缪文彬 SN/T4380--2015 辛醇-水分配系数 缓慢搅动法 1范围 本标准规定了化学品的辛醇/水分配系数的缓慢搅动测定方法。 本标准适用于辛醇/水分配系数P。值的对数预估值为5～8.2之间的化学品的测定。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T21852一2008化学品分配系数（正辛醇-水）高效液相色谱法试验 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 分配系数 partition coefficient 受试物在互不相溶的两相介质中达到平衡时的浓度之比。 3.2 辛醇/水分配系数 1-octanol/waterpartitioncoefficient Pow 受试物在正辛醇-水两相介质中达到平衡时的浓度之比，以P。w表示。Pow=C。/Cw，无量纲。通常 用以10为底的对数（lgP。）表示。 4原理 通过一定时间连续的缓慢搅动，使受试物在有机溶剂（正辛醇相）和水相中的分配达到平衡，使用适 用于受试物的特定分析方法测定平衡时两相中化学品的浓度，可确定化学品的分配系数。 5 试剂和材料 除另有说明外，所有试剂均为分析纯或更高纯度。 5.1正辛醇 纯度≥99% 5.2水 使用GB/T6682规定的一级水。蒸馏水应经过0.22μm过滤器过滤。如果使用玻璃纤维过滤器 1 SN/T:4380—2015 过滤，玻璃纤维过滤器应在400℃下至少烘干3h放置至室温后使用。 5.3受试物 对于无标签的受试物，或者对于放射性同位素示踪的受试物，其已知的化学组分和已含放射性同位 素的化学物质，其推荐适宜的纯度至少为99%。测定分配系数之前，应获知受试物的下述信息： a） 结构式； b) 确定受试物在水相和正辛醇相中浓度的适当的分析方法； c) 离子物质的离解常数； 水溶性； d) e) 非生物水解； f) 稳定的生物降解能力； g) 蒸汽压； 1gP。w预估值（如可得，可以通过使用商业购买的软件和其他适宜的方法预测而得）。 6仪器和装置 6.1 恒温振荡器。 6.2磁力搅动器。 6.3Teflon涂层磁性搅动棒。 6.43 玻璃夹套搅动测试容器：容器应由情性物质制成，推荐使用的玻璃夹套搅动器示意图参见附录A。 基于本方法分配系数的评估和检出限的要求，不同lgP。下所需水相的最小体积，LOD值，IgP。w 值和水中溶解度等参数相互影响（见式（1)和式（2)），参见附录B，其中表B.2是根据1gP。值和正辛 醇/水中溶解度的比率之间的关系建立： lgPow=0.88lgSR+0.41 .....(1 ) SR=Soct/Sw (2) 式中： lg Pow 正辛醇/水分配系数以10为底的对数值； SR 受试物在正辛醇相和水相中的溶解度比率； Soct 受试物在正辛醇相中的溶解度，单位为毫克每升（mg/L)； Sw 受试物在水相中的溶解度，单位为毫克每升（mg/L)。 7.分析步骤 7.1 受试物溶液的准备 7.1.1在两个试剂瓶中分别装人正辛醇和水，在装有正辛醇的试剂瓶中放人少量水，在装有水中的试 剂瓶中放人少量的正辛醇，将两个试剂瓶在恒温震荡器中震摇24h，静置12h分层后备用。 7.1.2将受试物溶解于经水饱和的正辛醇。受试物的浓度不应超过其溶解度的70%，在任意一相中的 最大浓度为0.1mol/L。如果1gP预估值超过5，实验使用的正辛醇溶液需避免有悬浮固体。 7.2受试物的提取与分析 7.2.1使用合理的分析方法检测受试物。需采用萃取法测定水相和辛醇相中受试物浓度时，应测定萃 取前后的回收率。 7.2.2使用适宜的溶剂将受试物从水相中萃取出来并浓缩。 2 SN/T4380-2015 估算。 7.2.4使用公认的方法确定受试物在正辛醇和水中的检出限(LOD)（信噪比为3：1)。 7.2.5获取分析方法的优化条件后，需从水相中移取一定体积的水样用于精确测定受试物浓度。水样 的体积参见附录B确定，与容器容量、受试物的检出限（LOD)及溶解度相关。 7.2.6用校准曲线定量测定受试物浓度。 7.2.7若受试物1gP。w的预估值超过6，在水样萃取前，应加入个示踪物质来确定水样萃取和预浓缩 过程中受试物的损失。示踪物质的性质应与受试物的性质一致或接近。推荐使用稳定的同位素标记的 同族物质，例如，全氛化的或13C标记的物质。 7.3正辛醇/水体积比 1L的容器中使用20mL～50mL正辛醇和950mL～980mL水。容器中正辛醇层的厚度>0.5cm。 7.4平衡时间 在单个反应容器中重复取样确定平衡时间。体系最少平衡24h后开始取样，取样的最小时间间隔 为5h，每次取样后，测定受试物在正辛醇和水中的浓度。以正辛醇/水的浓度比对时间做回归曲线，当 回归曲线上连续四个坐标点的斜率p在0～0.05范围内，则体系达到平衡。例如，十氯双苯的1gPw值 为8.23，平衡时间为144h。 7.5试验条件 7.5.1反应容器为恒温装置。试验温度：(25士1)℃。 7.5.2试验体系应避免光照。可在暗房进行，或者在反应容器上覆盖铝箔。 7.5.3实验应尽可能在无灰尘环境中进行。 7.5.4 对正辛醇-水体系进行搅动直到达到平衡。 7.5.5需至少进行3次试验，以获取准确的分配系数。 7.6 受试物lgPow的测定 7.6.1在搅动器中加入经正辛醇饱和的水，使用移液管沿玻璃夹套搅动器的器壁将配置好的受试物的 饱和醇溶液仔细缓慢加人搅动器中。需避免在两相间出现紊流混合现象 7.6.2打开搅动装置，缓慢增加搅动速率，控制搅动速率使正辛醇和水两相界面上产生0.5cm～2.5cm 厚的漩涡。 7.6.3体系平衡后，关闭揽动装置，待搅动装置停止后取样。正辛醇相使用100uL全玻璃-金属注射针 取样，记录取样体积。水相使用已知体积的分液漏斗收集，取样的最少体积参见附录B。 7.6.4根据受试物的性质，采用公认的方法测定两相中受试物的浓度。合适的测定方法有：分光光度 法、气相色谱法和高效液相色谱法等。 8 结果计算 正辛醇/水分配系数lgP。w按照式（3)计算： lg Pw=lg(C。/Cw) 式中： C。 受试物在正辛醇相中的平衡浓度，单位为毫克每升（mg/L)； Cw一一受试物在水相中的平衡浓度，单位为毫克每升（mg/L)。 3 SN/T4380—2015 3次测试结果的△lgP应在土0.3范围内。 试验报告 试验报告应包括如下内容： a） 受试物确认信息 受试物本体，包括相关物理-化学性质（例：疏水性、解离常数，水溶性等）； -1gPow估算结果（如可得）； 一与受试物的物理状态和杂质相关的其他解释信息。 b) 试验条件 试验温度； 试验开始时，两相溶剂的体积； 废弃两相溶剂的体积； 测试容器中剩余正辛醇和水的体积； 测试容器和搅拌条件的描述（搅拌棒和试验容器的外观，以mm表示的形成漩涡的高度， 搅拌速率)； 使用分析方法和分析步骤的描述； 取样次数； 水相pH值； 遇到可能发生解离的受试物所使用的缓冲溶液的叙述（缓冲溶液的组成成分、浓度和 pH); 重复试验的次数。 结果 c) 使用分析方法的重复性和灵敏度； 3次P。w测定值，标准偏差； 以10为底的对数来表示的lgP。w的总平均值。 SN/T 4380—2015 附录A （资料性附录） 推荐使用的玻璃-夹套测试容器的试图 70 mm 图A.1 玻璃-夹套测试容器样图 5