SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4092—2015 微生物学检测的体采样方法 Carcass sampling method for microbiological analysis (ISO 17604:2003, Microbiology of food and animal feeding stuffs- Carcass sampling for microbiological analysis, MOD) 2015-02-09发布 2015-09-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4092—2015 前 言 本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。 本标准修改采用ISO17604：2003。 为便于使用，本标准做了下列编辑性修改： “本国际标准”一词改为“本标准”； 一用小数点“”代替作为小数点的逗号“，”； 一删除国际标准的前言和引言； 一为了更符合中文习惯，本标准的名称稍做修改； 为便于使用，删除了与实际应用无关的国际标准中的规范性引用文件和附录B，将原国际标准 的附录C变为本标准的附录A，增加了本标准的附录C。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国河南出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：苗丽、钱成、李、张子宏、张巨洲、李志培、彭新然。 I SN/T4092—2015 微生物学检测的体采样方法 范围 本标准规定了用于检测和计数刚宰杀过的红肉动物体表面微生物的取样方法，本标准规定的微 生物取样方法适用于： 牛、马、猪、绵羊、山羊和人工饲养的野生动物在屠宰线上的过程控制； 基于产品安全的风险评估体系； 一对致病微生物流行的监管计划。 本标准包括根据不同的用途使用破坏性或非破坏性技术来进行样品采集。 本标准不考虑采样计划的使用。 当本标准所涉及的内容与国家法规相冲突时，按照国家法规进行。 2采样程序 可以采用破坏性和非破坏性两种采样方法（参见附录A）。限制使用破坏性采样方法主要是为了避 免对体价值产生不利影响。非破坏性采样方法使大面积检验成为可能。不论是采用破坏性采样方法 还是非破坏性采样方法，目的都是用较小面积样品通过实验室检验来说明该货物的最大污染程度。 3采样频率 采样的次数和频率可以通过以下几个方面确定 屠宰场宰杀每种动物的惯例； 基于风险分析所做的过程控制保障计划 生产规模； 动物来源地的流行病学情况 在过程控制的实施操作中，采样的次数和频率应该结合屠宰车间的卫生状况来确定。 在致病微生物的监控过程中，对采样次数、采样部位和采样频率的制定，以样品能最大机率分离出 病原微生物为依据。 4关键控制点 4.1躺体的挑选 每一个体被挑选采样的机会应是均等的。 4.2过程控制 屠宰车间关键控制点的选择要根据以往的屠宰经验，基于风险分析原则，结合屠宰过程中存在的问 题选择关键控制点。下面为几个关键控制点的例子： 燎毛抛光后（猪）； 冲洗后（猪）； SN/T4092-2015 剥皮后（牛、绵羊、山羊、被圈养的野生动物和其他的动物）； 取出内脏后； 一在冷库存放12h后（参见附录A.4）。 4.3 3对致病性病原微生物的监测 对致病性病原微生物的监测，下述关键控制点适用于所有种类的动物： 冷冻前立即采样； 一在冷库存放12h后（参见附录A.4）。 5采样部位 5.1 过程控制 根据屠宰场宰杀不同动物的实际情况确定采样部位（参见图B.1、图B.2和图B.3）。采样部位不是 强制性的，但在一段时期内要保持采样部位的一致性。最好将采样点分布到尽可能多的躺体而不要仅 在个别躺体上采样。 5.2 对致病性病原微生物的监测 监管过程中扩大采样面积更有利于流行病的监测，但对污染严重的地方采集较小面积的样品也可 以收到同样的效果。 9 5采样技术 6.1通则 对于特定的采样部位，每次应使用相同的采样技术以保证结果的可比性。 6.2 破坏性采样方法 6.2.1木塞穿孔器法 6.2.1.1试剂 酒精：70%（体积分数）。 6.2.1.2 设备和材料 a) 灭菌解剖刀； b) 灭菌镊子； 灭菌木塞穿孔器，切割面积为5cm； 便携式气体喷灯或便携式本生灯； e) 脱脂棉或棉纸； f) 灭菌塑料袋，可直接用于拍击式均质器上，要有合适的尺寸和容积以盛放采集的样品和所用的 稀释液。 6.2.1.3 样品收集 在体的合适位置，用灭菌木塞穿孔器[见6.2.1.2c)在其表面打孔，然后用灭菌解剖刀和镊子沿 N SN/T4092—2015 圆面将表皮或组织（约2mm厚)切下，放人事先标记过的灭菌塑料袋[见6.2.1.2f)］中。 6.2.1.4器材的清洗和消毒 木塞穿孔器、解剖刀和镊子在每次使用后都要按照下述方法进行清洗和消毒： a）用70%的酒精浸泡过的脱脂棉或棉纸擦洗干净； b）浸泡到70%的酒精瓶中； c) 从酒精瓶中捞出后将残留在上面的酒精点燃。如果使用明火有危险，可让酒精自然挥发掉； d）冷却。 因完成清洗和消毒工作需要耗费大量的时间，因此每次采样时最好准备两套以上的木塞穿孔器、解 剖刀和镊子。要确保这些器材使用前未受到二次污染，也可以选择使用灭菌的一次性的取样器材。 6.2.2 规格板法 6.2.2.1 设备和材料 a) 灭菌解剖刀； b）灭菌镊子； c） 灭菌的正方形规格板，中空面积可为10cm²、20cm²或25cm； d）灭菌塑料袋，可用于拍击式均质器上。 6.2.2.2样品的采集 在躺体的有关部位上，在灭菌规格板圈定的范围内，用灭菌的解剖刀和镊子挖取约2mm厚的 样品。 本方法所用器材用6.2.1.4中描述的方法处理后可以重新使用。 6.3非破坏性方法 6.3.17 棉拭子法 6.3.1.1试剂 灭菌缓冲蛋白陈水，按通常用法配制（参见附录C)。在每个试管或瓶子中分装10mL的量。 6.3.1.2设备和材料 a）带有木柄的大号的灭菌棉拭子； b）灭菌的正方形规格板，内部中空面积为50cm²或更大。 6.3.1.3样品的采集 先将拭子在分装的10mL的缓冲蛋白陈水（见6.3.1.1)中浸湿，在每一个被选中躺体的受检验一 侧，将规格板用力压在其表面，然后用拭子在规格板圈定的所有地方用力擦。擦的方式是先水平地移动 拭子再翻转拭子，使拭子的每个面都能用到。采样后将拭子放人稀释液中浸湿拭子，截断露在瓶子外面 的木柄。然后，用一个干拭子，按照上述方法在同样的地方再次采样，并将采样后的拭子放人同一个容 器中。 本方法所用规格板用6.2.1.4中描述的方法处理后可以重新使用。 3