ICS65.020.30 CCSB41 T/SNLT 团体标准 T/SNLT0029-2025 动物布鲁氏菌检测方法联用技术规程 2025-09-18发布 2025-09-22实施 石河子农产品流通协会发布 全国团体标准信息平台 T/SNLT0029-2025 1目次 前言................................................................................I 1范围................................................................................1 2规范性引用文件......................................................................1 3术语和定义..........................................................................1 4缩略语..............................................................................1 5生物安全要求........................................................................1 6仪器和设备..........................................................................2 7材料与试剂..........................................................................2 8操作前准备工作......................................................................2 9试验操作............................................................................2 9.1虎红平板凝集试验（BRT）.........................................................2 9.2试管凝集试验（SAT）.............................................................2 9.3免疫层析法（ICA)................................................................2 9.4间接ELISA抗体检测方法（iELISA）................................................2 9.5竞争ELISA抗体检测方法（cELISA）................................................2 10检测方法联用及结果判定.............................................................2 10.1RBT与ICA方法联用..............................................................2 10.2RBT与iELISA抗体检测方法联用...................................................2 10.3ICA与iELISA抗体检测方法联用...................................................3 10.4RBT、ICA、iELISA抗体检测方法和SAT联用.........................................3 10.5RBT、ICA、iELISA抗体检测方法和cELISA抗体检测方法联用..........................3 全国团体标准信息平台 T/SNLT0029-2025 I前言 本文件按照GB/T1.12020给出的规则起草。 本文件由第八师石河子市畜牧水产发展服务中心提出并归口。 本文件起草单位：第八师石河子市畜牧水产发展服务中心、第八师石河子市疾病预防控制中心。 本文件主要起草人：赵艳梅、窦立静、王强、刘强、宋德强、王宏伟、房文斌、万姣、蔺文龙、陈 强斌、贾怀妙、任美玲、李勇军。 全国团体标准信息平台 T/SNLT0029-2025 1动物布鲁氏菌病检测方法联用技术规程 1范围 本文件规定了动物布鲁氏菌检测方法联用技术要点和操作规范，包括生物安全要求、仪器和设备、 材料和试剂、操作前准备、试验操作、检测方法联用及结果判定等内容。 本文件适用于动物布鲁氏菌病的联合检测，以提高检测的准确性和可靠性。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本使用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB19489实验室生物安全通用要求 GB/T18646动物布鲁氏菌病诊断技术 NYT1948兽医实验室生物安全要求通则 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4缩略语 下列缩略语适用于本文件。 RBT：虎红平板凝集试验（RoseBengalTest） SAT:试管凝集试验（SerumAgglutinationTest） ICA：免疫层析试验（ImmunochromatographyAssay） iELISA：间接酶联免疫吸附试验（IndirectEnzymeLinkedImmunosorbentAssay） cELISA：竞争酶联免疫吸附试验（CompetitiveEnzymeLinkedImmunosorbentAssay） 5生物安全要求 为了保护实验室检测人员的安全，实验操作应在相应级别的生物安全实验室内进行，严格按照GB 19489和NY/T1948要求执行。 全国团体标准信息平台 T/SNLT0029-2025 26仪器和设备 微量移液器（100μL）、无酶移液器吸头（50μL、100μL、200μL、1000μL）、一次性反应板、 恒温培养箱、微量振荡器、酶标仪、液体工作站。 7材料与试剂 布鲁氏菌RBT抗原、布鲁氏菌SAT抗原、布鲁氏菌阳性对照血清和阴性对照血清、布鲁氏菌iELISA 抗体检测试剂盒、布鲁氏菌cELISA抗体检测试剂盒、布鲁氏菌ICA检测试剂盒、96孔板。 8操作前准备工作 将试剂和样品恢复至室温（18-26℃），检测操作应在室温下进行。确保所有设备已校准并处于良 好工作状态。 9试验操作 9.1虎红平板凝集试验（BRT） 按照GB/T18646中虎红平板凝集试验的操作方法检测。 9.2试管凝集试验（SAT） 按照GB/T18646中试管凝集实验的操作方法检测。 9.3免疫层析法（ICA) 按照布鲁氏菌病免疫层析检测试剂盒说明书的操作和结果判定进行检测。 9.4间接ELISA抗体检测方法（iELISA） 按照布鲁氏菌iELISA抗体检测试剂盒说明书的操作和结果判定进行检测。 9.5竞争ELISA抗体检测方法（cELISA） 按照布鲁氏菌cELISA抗体检测试剂盒说明书的操作和结果判定进行检测。 10检测方法联用及结果判定 10.1RBT与ICA方法联用 RBT与ICA两种方法中任何一种方法结果为阳性的，判定为疑似布鲁氏菌感染动物。 10.2RBT与iELISA抗体检测方法联用 全国团体标准信息平台 T/SNLT0029-2025 3RBT与iELISA抗体检测方法两种方法中任何一种方法结果为阳性的，判定为疑似布鲁氏菌感染动 物。 10.3ICA与iELISA抗体检测方法联用 ICA与iELISA抗体检测方法两种方法中任何一种方法结果为阳性的，判定为疑似布鲁氏菌感染动 物。 10.4RBT、ICA、iELISA抗体检测方法和SAT联用 RBT、ICA和iELISA抗体检测方法任意一种方法检测，结果为阳性。经SAT复核为阳性的，判定为 布鲁氏菌感染动物。 10.5RBT、ICA、iELISA抗体检测方法和cELISA抗体检测方法联用 RBT、ICA和iELISA抗体检测方法任意一种方法检测，结果为阳性。经cELISA抗体检测方法复核 为阳性的，判定为布鲁氏菌感染动物。 全国团体标准信息平台