ICS 65.020.01 B 15 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3688—2020 小麦田阔叶杂草抗药性监测技术规程 Technical code of practice for monitoring of herbicide resistance- Broad leaf weeds inwheat 2020-08-26发布 2021-01-01实施 中华人民共和国农业农村部 发布 NY/T3688—2020 品标准 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起章 本标准由农业农村部种植业管理司提出开归口。 本标准起草单位：全国农业技术推广服务中心、中国农业科学院植物保护研究所 本标准主要起草人：张帅、李香菊、崔海兰、陈景超、全宗华、梁瑞、任宗杰 I NY/T3688—2020 小麦田阔叶杂草抗药性监测技术规程 ： 范围 本标准规定了小麦田阔叶杂草抗药性监测的基本方法。 本标准适用于小麦田阔叶杂草对常用除草剂的抗性监测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的P几是B日期的引用文件，仅 注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件 NY/T1155.3 药室 内生物测定试验准则 土壤喷雾法 NY/T1155.4 准则 性测 定试验 茎叶喷雾法 NY/T1667( 农 理术语 NY/T1859 药抗性 风险评估 第生部 成酶抑 剂抗性风险评估 NYT1997 剂 更用技术规 3 术语和定义 NY/T1667 和定义 3.1 生长抑制中 使杂草生物量 3. 2 抗性指数 stange index(R) 同一除草剂对 R 3.3 ( 土壤处理法 Pre-energence application 草的施药方法。 3.4 茎叶处理法 post-emergence application 将除草活性化合物喷洒于杂草植株上的施药方法。 4 仪器设备 电子天平（感量0.001g，0.01g等）； 移液管或移液器（100μL，200μL，1000μL,5000μL等）； 容量瓶（10mL25mL,50mL，100mL，200mL等）； 量简、量杯等玻璃仪器； 具有扇形喷头及控压装置的喷雾塔或其他喷雾器械； 培养箱、人工气候箱（室)或温度可控温室。 5 材料与试剂 5.1 杂草试材 播娘蒿（Descurainiasophia）、荠菜（Capsellabursa-pastoris）、麦瓶草（Sileneconoidea）、繁缕（Stel 1 NY/T3688—2020 lariamedia）、鹅肠菜（Myosotonaquaticum）、猪殃殃（Galiumaparine）、阿拉伯婆婆纳（Veronicapersi ca）、田紫草（Lithospermumarvense）、藜（Chenopodiumalbum）、救荒野豌豆（Viciasativa）、鸭跖草 （Commelinacommunis）、宝盖草（Lamiumamplericaule）、篇蓄（Polygonumaviculare）、打碗花（Calys tegiahederacea）等。 5.2试验药剂 监测用的除草剂原药或制剂。 6试验步骤 6.1试材准备 6.1.1种子采集 在杂草抗药性监测区域设立采样点，每个采样点采集5块麦田，每块麦田用倒置“W”九点取样方法， 采集成熟的阔叶杂草种子。每点每种杂草采集30株以上，以保证每块田每种杂草种子量不少于2000粒。 以采样点为单位将种子混合，记录采集信息（参见附录A）。将采集的种子晾干，置于阴凉干燥处备用。 6.1.2种子预发芽 取100粒6.1.1的杂草种子进行预发芽试验，种子发芽率大于80%时方可用于抗药性监测试验。发 芽率较低时，可采用物理或化学方法处理，提高其发芽率。 6.1.3试材培养 配制无其他除草剂和其他杂草种子的营养王，装于直径不小于10cm的培养钵，将待测种子均匀撒播 在土壤表面，依据种子粒径大小，覆土0.1cm～0.5cm。采用培养钵底部渗灌方式补充水分，置于25℃ （12h）和20℃（12h），光照强度不小于300001x（白天），光周期12h：12h，相对湿度60%～70%条件下 的培养箱、人工气候箱（室）或温度可控温室内培养。 与抗性监测的杂草种群同时播种经试验证实为对待测除草剂敏感的杂草种群，在相同条件下进行 培养。 每个培养钵播种20粒～50粒杂草种子。 6.2剂量设计及药剂配制 将试验药剂的原药或制剂配制梯度剂量。通过预试验确定试验药剂的剂量（浓度范围。 准确称取一定量的原药或制剂（精确至0.001g）。如为原药，水溶性药剂用去离子水溶解，非水溶性 药剂用适宜溶剂（丙酮、二甲基甲酰胺或二甲基亚砜等)溶解，配制成母液；用0.1%吐温-80水溶液将母液 按试验要求稀释成梯度剂量。若为制剂，可直接用去离子水稀释成梯度剂量。 单剂量甄别法的除草剂剂量，只设对敏感种群的最低致死剂量；剂量反应曲线法的除草剂剂量，需设 置5个～7个梯度剂量。 6.3药剂处理 除草剂喷雾需在喷雾压力和喷雾速度稳定的喷雾设施内进行，标定喷雾塔或喷雾器械工作参数（喷雾 压力和喷雾速度）；并按照试验设计从低剂量到高剂量的顺序进行土壤处理或茎叶处理，土壤处理喷液量 为450L/hm²～600L/hm²，茎叶喷雾法喷液量为300L/hm²～450L/hm。 设不含药剂的处理作空白对照。每处理不少于4次重复 处理后移入培养箱、人工气候箱（室)或温度可控温室内，保持土壤湿润培养。 6.3.1土壤处理法 供试杂草播种后24h进行土壤喷雾处理。其他按照NY/T1155.3的规定执行。 6.3.2茎叶处理法 供试杂草长至2叶期间苗，每盆保留相同数量长势一致的杂草植株，继续培养至2叶～4叶期进行茎 叶喷雾处理。其他按照NY/T1155.4的规定执行。 6.4结果检查 处理后定期观察、记载杂草生长情况。采用日测法或数测法调查杂草防除效果。 2 NY/T3688—2020 6.4.1目测法 目测观察杂草受除草剂伤害的症状，比较药剂处理与空白对照处理的杂草防效差异。记录除草剂对 供试杂草的效果，以防效百分数（%)表示。具体标准为： 1级无草；防效100%； 2级 相当于空白对照杂草的0.1%~2.5%；防效97.5%~99.9%； 3级相当于空白对照杂草的2.6%~5.0%；防效95.0%~97.4%； 4级 相当于空白对照杂草的5.1%~10.0%；防效90.0%~94.9%； 5级 相当于空白对照杂草的10.1%~15.0%；防效85.0%~89.9%； 6级 相当于空白对照杂草的15.1%~25.0%；防效75.0%~84.9%； 7级相当于空白对照杂草的25.1%~35.0%；防效65.0%~74.9%； 8级相当于空白对照杂草的35.1%~67.5%防效32.5%~64.9%； 9级相当于空白对照杂草的67.6%~100%；防效0%~32.4%。 根据除草剂处理方式和特性，在处理后第7d～28d进行目测。 6.4.2数测法 土壤处理后14d，调查各处理杂草出苗数，处理后第21d～28d，调查各处理存活杂草株数，剪取植株 地上部分，称量鲜重或干重，统计杂草株数和重量抑制率，计算毒力回归方程及GR50值。 茎叶处理后第7d～28d，调查各处理存活杂草株数，剪取植株地上部分，称量鲜重或干重，统计杂草 株数和重量抑制率，计算毒力回归方程及GR50值。 7数据统计与分析 7.1防治效果 日测法直接得出药剂对杂草的防效；数测法以杂草抑制率表示，通过与空白对照比较，计算各处理对 杂草株数、鲜重或干重抑制率。计算公式采用式（1）。 (1) Xo 式中： CE 杂草株数或鲜重抑制率，单位为百分号（%）； Xo 空白对照处理杂草株数或鲜重，单位为株或克（g)； X 药剂处理杂草株数或鲜重，单位为株或克（g）。 注：计算结果均保留到小数点后两位。 7.2单剂量甄别 依据试验药剂的特性，采用6.3.1和6.3.2方法对需要监测的杂草种群进行土壤处理或茎叶喷雾处 理。除草剂剂量采用敏感种群的最低致死剂量。依据试验药剂特性，在施药后7d28d，按照6.4.1方 法目测防效，或调查杂草存活株数，按式(1)计算防效。 7.3剂量反应曲线 依据试验药剂的特性，采用6.3.1和6.3.2方法对需要监测的杂草种群进行土壤处理或茎叶喷雾处 理。除草剂剂量采用6.2剂量反应曲线法设计的系列浓度。依据试验药剂特性，在施药后7d～28d，按 6.4.2方法调查杂草鲜重（或干重），按式（1)计算防效。以杂草鲜重、干重为指标，建立剂量反应方程。 一般情况下，按式（2)计算抗性种群和敏感种群生长抑制中量（GR5o）。 D-C 式中： Y 在除草剂处理下杂草地上部分鲜重、干重与对照鲜重、干重的百分比，单位为百分号（%）； X -除草剂剂量，单位为克有效成分每公顷（ga.i./hm")； C Y值下限，单位为百分号（%）； 3 NY/T3688—2020 D Y值上限，单位为百分号（%）； GR50 杂草生长抑制中量，单位为克有效成分每公顷（ga.i./hm²）； b 斜率。 也可以按式(3)计算抗性种群和敏感种群生长抑制中量(GR5o）。 Y=a+bX... (3) 式中： Y 杂草抑制率（%）概率值； X 除草剂剂量（单位为克有效成分每公顷.ga.i./hm²)的对数； b 斜率； n 截距。 抗性水平、频率计算与评估 RD 小麦田阔叶杂草对部分除草剂的敏感基线 参见附录B。 8.2抗性指数计算 根据杂草对除草齐 线和测试种群的R50 均保留到小数点 后两 (4) 式中： RI GR50