ICS 65.020.01 B 16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3680—2020 西花蓟马抗药性监测技术规程 叶管药膜法 Technical code of practice for resistance monitoring in Frankliniella occidentalis (Pergande)-leaf-tube residue method 2020-08-26发布 2021-01-01实施 中华人民共和国农业农村部 发布 NY/T 3680—2020 言 本标准按照GB/T1.1—2009缩出的规则起章。 本标准由农业农村部种植业管理司提出并归口 典通 植物保护与微生物研究所、江西省植保植检局。 本标准主要起草人：张帅、吴青君、郭兆将、张友军、张治军、舒宽义、王希。 NY/T 3680—2020 西花蓟马抗药性监测技术规程 叶管药膜法 1范围 本标准规定了用叶管药膜法监测西花蓟马Frankliniellaoccidentalis（Pergande）抗药性的方法。 本标准适用于西花蓟马对杀虫剂的抗性监测 2术语和定义 下列术语和定义适用于 文件 2. 1 RD 叶管药膜法 leaf-tube siduemethod 将浸过药液的叶 干碟置 用感 行 力测定的方法。 3试剂与材料 3.1生物试材 3.1.1试虫 田间采集 3.1.2饲料植物 无药剂污 四 L.1o 3.1.3供试植物 无药剂污 尚未形 3.2试验药剂 2 杀虫剂原药 CIX 3.3化学试剂 丙酮或其他有机 为分析纠 4 仪器设备 4. 1 11.5mL离心管（Axy 4.2 2电子天平（感量0.1mg 4.3移液器（200μL,1000μL)。 4.4打孔器（直径为1cm)。 4.5 烧杯（25mL,50mL,100mL)。 4.6 量筒（10mL，25mL,50mL,100mL）。 4.7 自制吸虫器或真空泵，1mL移液器枪头（Axygen），直径为8mm的乳胶管。 4.8Paralilm封口膜，养虫罐，200日纱网。 4.9 光照培养箱、恒温养虫室或人工气候箱。 5试验步骤 5.1试虫采集 按随机抽样原则，在田间采集西花蓟马成虫或若虫放人到200目纱网袋中，并采摘少量寄主植物花朵 或叶片供试虫食用。室内将试虫抖落到白纸上，然后转移至装有2根～3根四季豆荚的养虫罐中供试。 NY/T3680—2020 5.2药剂配制 杀虫剂原药用丙酮或其他有机溶剂溶解，配制成高浓度储存液，然后用含0.01%的曲拉通X-100蒸 馏水将储存液等比稀释到所需要的6个～8个系列浓度梯度，以用含0.01%的曲拉通X-100蒸馏水作为 对照，每浓度梯度配制药液量不少于50mL。 杀虫剂制剂直接用含0.01%曲拉通X-100蒸馏水配制成母液，然后用含0.01%的曲拉通X-100蒸馏 水将母液等比稀释到所需要的6个～8个系列浓度梯度，以含0.01%的曲拉通X-100蒸馏水作为对照，每 浓度梯度配制药液量不少于50mL。 5.3处理方法 5.3.1浸管和浸叶 将药液注满1.5mL离心管（Axygen），放置4h后倒掉药液、晾干。每管为一个重复，每个浓度至少4 个重复。用剪刀在离心管底部侧面剪直径为3mm～5mm的小孔。采用厚度一致的新鲜甘蓝叶片，避开 主要叶脉，用打孔器制成直径为1cm的叶碟，将叶碟分别在每个浓度药液中浸渍10s，于室温下自然晾 干。用小镊子连同1cm大小的滤纸片（干燥用)装人相应药液浓度的离心管中，叶碟背面朝上，每管1片。 5.3.2接虫 将自制吸虫器的纱网端与5.3.1处理后的离心管管口相连，在另一端吸气，将试虫吸入管中，每管约 15头试虫，然后盖好管盖，用两层封口膜封好吸虫孔；或用真空泵吸虫，将真空泵的接口用200目纱封好， 套在处理好的离心管管口，打开真空泵，调节气流大小，把离心管管底的剪口对准试虫，使试虫顺气流吸入 离心管内，用封口膜封口，振动离心管使试虫进人离心管，再盖好管盖。将带有试虫的离心管放在温度为 25℃，光照16h：8h(L：D)，湿度60%～70%的光照培养箱（恒温养虫室、人工气候箱）中。 5.4结果检查 根据药剂的性质确定检查时间，通常是48h或72h，以毛笔尖轻触虫体不能爬动者视为死亡，记录死 虫数和总虫数。 6数据统计与分析 6.1死亡率计算方法 根据检查数据，计算各处理的校正死亡率。按式(1)和式(2)计算，计算结果均保留到小数点后两位。 K X100 .(1) 式中： P 死亡率，单位为百分号（%）； K 每处理总死亡虫数，单位为头； N—每处理浓度总虫数，单位为头。 P,-P。 100-P。 X100: (2) 式中： P1一—校正死亡率，单位为百分号（%)； P,—处理死亡率,单位为百分号（%)； P。—对照死亡率，单位为百分号（%)。 对照死亡率在10%以下。 6.2回归方程和致死中浓度（LC50）计算方法 采用机率值分析的方法对数据进行处理。可用SAS统计分析系统、POLO-Plus、DPS等软件进行统 计分析，求出每种供试药剂的LCso值及其95%置信限、斜率（6值)及其标准误差等。 7抗药性水平的计算与评估 7.1西花蓟马对部分杀虫剂的敏感性基线 2 NY/T3680—2020 见附录A。 7. 2 2抗药性倍数的计算 根据敏感品系的LCso值和测试种群的LC5o值，按式（3)计算测试种群的抗药性倍数，计算结果均保留 小数点后一位。 RR= (3) s 式中： RR 测试种群的抗药性倍数； T 测试种群的LCso值； S 敏感品系的LCso值。 7.3抗药性水平的评估 根据抗药性倍数的计算结果，按照表1中抗药性水平的分级标准，对测试种群的抗药性水平做出 评估。 表1 抗药性水平的分级标准 抗药性水平分级 抗药性倍数，倍 低水平抗药性 5.0<RR≤10.0 中等水平抗药性 10.0<RR≤100.0 高水平抗药性 RR>100.0 3 NY/T3680—2020 附录A （规范性附录） 西花蓟马对部分杀虫剂的敏感性基线 西花蓟马对部分杀虫剂的敏感性基线见表A. 表A.1 西花蓟马对部分杀虫剂的敏感性基线 药剂名称 斜率土标准误差 多杀菌素 1.43±0.24 乙基多杀菌素 2.05±0.27 甲氨基阿维菌素苯甲 0.92±0.15 阿维菌素 39±0.17 虫螨腊 92±0.37 噻虫崂 6872~ ±0.26 氯氟氰 0.18 溴氰 酯 0.20 顺式氰 菊 .19 氯氰 菊 15 吡 虫味 22 37 灭 20 节 出 21 注：敏感品装 市科区 清洗下茶 NY/T 3680—2020 全国农业食品标准 中华人 民共和国 农业行业标准 西花蓟马抗药性监测技术规程 叶管药膜法 NY/T3680—2020 * 中国农业出版社出版 （北京市朝阳区麦子店街18号楼） （邮政编码：100125 网址：www.ccap.com.cn) 北京印刷一厂印刷 新华书店北京发行所发行各地新华书店经销 * * * 开本880mm×1230mm1/16 印张0.75 字数15千字 2020年12月第1版 2020年12月北京第1次印刷 书号：16109·8325 定价：18.00元 版权专有 侵权必究 NY/T3680-2020 举报电话：（010）59194261