ICS 67 B 20 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3565—2020 植物源食品中有机锡残留量的检测方法 气相色谱-质谱法 Determination of cyhexatin, triphenyltin hydroxide,fenbutatin oxide residues in plant-derivedfoods- Gas chromatography-mass spectrometry 2020-03-20发布 2020-07-01实施 中华人民共和国农业农村部 发布 NY/T3565—2020 本标准由农业农村部种植业管理司提出并归口。 本标准起草单位：农业农村部稻米及制品质量监督检验测试中心、中国水稻研究所。 本标准主要起草人：马有宁、杨欢、牟仁祥、曹赵云、章林平、陈铭学、朱智伟。 一 NY/T3565—2020 植物源食品中有机锡残留量的检测方法 气相色谱-质谱法 1范围 本标准规定了植物源食品中三环锡、三苯基氢氧化锡、苯丁锡3种有机锡农药残留量的气相色 谱-三重四极杆质谱联用检测方法的原理、 式剂和材料、仪器和设备、试样剂量、分析步骤、结果计算、精 密度。 本标准适用于水果、蔬菜 叶、坚果和谷物中3 有机锡农药残留量的定量测定，其他食品科可参照 执行。 本标准在茶叶、坚果和谷物中3 锡的方法定量限为5 4g/kg 2规范性引用文件 下列文件对 木 文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的妞用文件， 的版本适用于本文件。 凡是不注日期的 文伴真 最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件 GB/T668 子析实验室用水规格和试验方法 GB 2763 20 61 食品安全国家标准食品中农药最大残留限量 GB/T885 新鱼水 果和蔬菜 取样方法 U 3原理 试样用乙（ 0.2% 酸）提取与四 取柱 CEN 净化，用气相色谱 三重四极杆质谱联 用检测和确证，外标法 4试剂和材料 除非另有说明，在 【使用分 4.1试剂 4.1.1甲醇(CHOH,CAS号：675 6-1色谱纯 4.1.2正已烷（C.H14,CA 号：110-54-3 4.1.3氯化钠（NaC1,CAS号：7647-14-5）：于(140士2）℃于燥4h，冷却，储于干燥器中备用。 4.1.4无水硫酸镁（MgSO4，CAS号 号：7487-88-9）。 4.2溶液配制 4.2.1丙酮十正已烷（1十9，体积比）：量取100mL丙酮加入900mL正已烷中，混匀。 4.2.2丙酮+甲苯（3十7，体积比）：量取30mL丙酮加70mL甲苯中，混匀 4.2.32%四乙基硼化钠水溶液（C.H2BNa）：称取2.0g四乙基硼化钠，用水溶解稀释至100mL，混匀。 4.2.4乙酸-乙酸钠缓冲液（pH=5.0)：称取26.24g乙酸钠，并吸取10.3mL乙酸，用水溶解稀释至500mL， 混匀。 4.2.50.2%甲酸-乙腈溶液：吸取2mL甲酸，加乙腈定容至1000mL，混匀。 4.3标准品 4.3.1三环锡标准品（C18H34OSn，CAS号：13121-70-5）：纯度≥95%。 4.3.2三苯基氢氧化锡标准品（C18H16OSn，CAS号：76-87-9）：纯度≥95%。 NY/T3565—2020 4.3.3苯丁锡标准品（C6oHzsOSn2，CAS号：13356-08-6）：纯度≥95%。 4.4标准溶液配制 4.4.1标准储备液：称取10mg（精确至0.1mg）各标准品（4.3.1、4.3.2、4.3.3），用丙酮十甲苯溶 1年。 4.4.2混合标准储备液：分别吸取1000mg/L的农药标准储备溶液（4.4.1)1mL，于10mL容量瓶中 用甲醇（4.1.1)稀释至刻度，配制成三环锡、三苯基氢氧化锡和苯丁锡浓度为100mg/L的混合标准工作 溶液，一18℃避光保存，有效期1年。 4.4.3混合标准工作溶液：用甲醇（4.1.1)将混合标准储备液（4.4.2)稀释成浓度为5.0μg/L、10μg/L、 50μg/L、100μg/L和200μg/L的混合标准工作液，现用现配。 4.5固相萃取小柱：弗罗里硅土，填充物1000mg，容积6mL，或相当者。 5仪器和设备 5.1气相色谱-三重四极杆质谱联用仪，配电子轰击离子源（EI)。 5.2分析天平：感量0.01g和0.0001g。 5.3组织捣碎仪。 5.4谷物粉碎机。 5.5高速均质器：转速不低于15000r/min。 5.6涡旋振荡器。 5.7盒 氮吹浓缩仪。 5.8走 超声波清洗器。 5.9离心机：转速不低于5000r/min。 6试样制备 6.1水果和蔬菜 样品取样部位按GB2763一2019附录A的规定执行。取样量按照GB/T8855的规定执行。对于个 体较小的样品，取样后全部处理；对于个体较大的基本均匀样品，可在对称轴或对称面上分割或切成小块 后处理；对于细长、扁平或组分含量在各部分有差异的样品，可在不同部位切取小片或截成小段后处理；处 理后的样品将其切碎，充分混匀，用四分法取样或直接放入组织捣碎机中捣碎成匀浆，放入聚乙烯瓶中于 一18℃保存。 6.2茶叶、坚果和谷物 样品取样部位按GB2763一2019附录A的规定执行。谷物、茶叶、坚果样品各500g，用谷物粉碎机 粉碎后使其全部可通过425μm的标准网筛，放人聚乙烯瓶中一18℃保存。 7分析步骤 7.1提取 7.1.1茶叶、坚果、谷物 称取5g试样（精确至0.01g）于150mL具塞离心管中，加入20mL水，轻摇使样品与水充分混匀， 放置30min。加25mL0.2%甲酸-乙睛溶液（4.2.5），置于高速均质器中匀浆2min，分别加人10g无水 硫酸镁和1g氯化钠，匀浆1min后，以4200r/min的转速离心5min。 7.1.2蔬菜、水果等 称取25g试样（精确至0.01g）于150mL具塞离心管中，加人25mL0.2%甲酸-乙溶液（4.2.5） 置于高速均质器中匀浆2min，分别加入10g无水硫酸镁和1g氯化钠，匀浆1min后，以4200r/min的 2 NY/T3565—2020 转速离心5min。 7.2衍生 移取7.1.1或7.1.21mL上清液于15mL具塞离心管中，置于已调至50℃的氮吹浓缩仪中，缓慢吹 近干后，加人1.0mL甲醇溶解残渣。依次加入5mL乙酸-乙酸钠缓冲液（4.2.4)，2mL2%四乙基硼化钠 水溶液（4.2.3），迅速盖紧盖子，涡旋混匀后超声衍生15min。加入1mL正已烷，涡旋混匀，以4200r/min的 转速离心3min。 7.3净化 移取上层有机相0.5mL于5mL刻度管中，用正已烷溶解加至2mL刻度。将弗罗里硅土柱依次用 5mL正已烷、5mL丙酮十正已烷（4.2.1）预洗条件化，弃去预洗液。当溶剂液面到达柱吸附层表面时， 立即加入定溶液，并用5mL丙酮十正已烷（4.2.1)洗涤刻度管后过柱，并收集洗脱液于另一个10mL刻 度管中，于50℃条件下氮气缓慢吹干，加人0.5mL正已烷振荡溶解残渣，待测。 7.4混合标准溶液的制备 和净化。 7.5气相色谱-质谱条件 7.5.1色谱柱：DB-5MS毛细管柱（30mX0.25mm，0.25μm）或相当者。 7.5.2色谱柱温度：初始温度60℃，以40℃/min升至180℃，再以20℃/min升至280℃，保持10min。 7.5.3进样口温度：250℃。 7.5.4色谱-质谱接口温度：280℃。 7.5.5进样量：1μL。 7.5.6载气：氢气，纯度≥99.999%，流速1mL/min。 7.5.7进样方式：不分流进样，2min后打开分流阀和隔垫吹阀。 7.5.8电离方式：EI源。 7.5.9电离能量：70eV。 7.5.10测定方式：多反应监测方式（MRM)。 7.5.11溶剂延迟：6min。 7.5.12监测离子：见表1。 表1GC-MS/MS分析有机锡衍生物的保留时间、监测离子对和碰撞能量 母离子 定量离子 定性离子 保留时间 有机锡衍生物 的质荷比 质荷比 碰撞能量 质荷比 碰撞能量 min m/2 m/2 eV m/z eV 三环已基乙基锡 8. 52 315.1 232.9 5 151.0 20 三苯基乙基锡 8. 46 351.0 196.9 20 119.7 30 三(2-甲基-2-苯基丙基)乙基锡 16.26 415.1 275. 0 20 303.0 20 7.6标准曲线 取3种有机锡混合标准溶液（7.4），按浓度由低到高依次进样测定，以各有机锡农药色谱峰面积和浓 度作图，得到标准曲线。 7.7定性测定 在相同试验条件下，对标准溶液及样液均按7.5中的条件进行测定。在进行样品测定时，若检出物质 保留时间与标准溶液保留时间的偏差不超过标准溶液保留时间的士2.5%；且在扣除背景后的样品谱图 中，所选择离子全部出现，同时所选择离子的丰度比与标准品对应离子的丰度比在允许范围内（所选范围 见表2），则可判定样品中存在相应的有机锡农药。 3 NY/T3565—2020 表2 定性测定时相对离子丰度的最大允许误差 单位为百分号 相对离子丰度 >50 >20~50 >10~20 ≤10 允许的相对偏差 ±20 ±25 ±30 ±50 7.8定量测定 取试样溶液进样测定，从标准曲线得到样液中有机锡农药浓度。试样溶液中各有机锡农药的响应值 应均在标准曲线线性范围内；如果超出线性范围，应用正已烷进行适当稀释后进样测定。三环锡、三苯基 氢氧化锡和苯丁锡衍生产物三环已基乙基锡 三（2-甲基-2-苯基丙基）乙基锡的选择离子 监测色谱图参见附录A。 8 结果计算 试样中有机锡农药的含量（ 数 ug