ICS 65.020 B 17 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3277-2018 水中88种农药及代谢物残留量的测定 液相色谱一串联质谱法和 气相色谱一串联质谱法 Determination of 88 pesticides and their metabolites residues in water- Liquid chromatography-tandem mass spectrometry and gas chromatography-tandem mass spectrometry 2018-07-27 发布 2018-12-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T 3277—2018 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草 本标准由农业农村部种植业管理司提出并归口。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准起草单位：农业农村部农药检定所、浙江省农业科学院农产品质量标准研究所。 本标准主要起草人：何红梅、周艳明、吴珉、张春荣、袁善奎、张晶、陈秋初。 NY/T 3277—2018 水中88种农药及代谢物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法和气相色谱-串联质谱法 1范围 本标准规定了水中88种农药及代谢物残留量的液相色谱-申联质谱和气相色谱-串联质谱检测 方法。 本标准适用于地表水和地下水中 88 种农药及代谢物残留量的测定和确证 规范性引用文件 下列文件对于 件的应用 少的。凡是注日期的 牛，仅违 是必不 用文 期的版本适用于本文 ，其最新版本（包括所有的修改单）适用于 GB/T 668 析实验室用水规格和式验方法 NY/T 396 衣用水源 环境质量监测技术规范 3原理 试样中88种衣 物经有机试剂提取净化浓缩和定容后，用液相 谱-串联质谱检测 根据所选 解产生的2对子离子的丰度比和色谱 峰的保留时间定性，外 标法定量。 4试剂与材料 除非另有说明 4.1试剂 R 4. 1. 1 丙酮(CH; COC HD 4. 1.2 乙腈(CH:CN) : 4. 1.3 甲醇(CH;OH): 4. 1. 4 正已烷（C.H14）：色谱 4. 1. 5 异辛烷(C:H18）：色谱纯 4. 1. 6 乙腈(CH;CN):分析纯。 4. 1. 7 甲醇(CH;OH):分析纯。 4. 1. 8 二氯甲烷(CHzCl2）分析纯。 4. 1. 9 丙酮(CHsCOCHs）：分析纯。 4. 1. 10 甲酸铵(CH,NOz）：色谱纯。 4. 1. 11 氯化钠(NaCI)：分析纯。 4. 1. 12 无水硫酸钠（Na2SO4）：分析纯 4.1.13 高纯氮：纯度不低于99.999%。 4.2溶剂配制 NY/T 3277—2018 4.2.1丙酮-二氯甲烷溶液（50十50，体积比)：量取50mL丙酮加入到50mL二氯甲烷中，混匀，使用前 配制。 4. 2. 2 2丙酮-正已烷溶液（50十50，体积比）：量取50mL丙酮加人到50mL正已烷中，混匀，使用前 配制。 4.2.3乙腈-水溶液（50十50，体积比）：量取50mL乙腈加人到50mL水中，混匀，使用前配制。 4.3标准品 88种农药及代谢物标准品：纯度≥95%。 4.4标准溶液配制 4.4.1单一农药标准储备溶液 称取适量（精确到0.1mg)标准品，根据农药性质选择合适色谱纯溶剂(丙酮、甲醇、异辛烷等)逐一 配制成500mg/L～1000mg/L的标准储备液，一18℃以下冰箱储存，有效期为半年。 4.4.2混合农药标准储备溶液 根据各农药在质谱中的响应值，逐一吸取一定体积的农药标准储备液分别注入同一容量瓶，用色谱 纯丙酮(用于气相色谱-串联质谱)或色谱纯甲醇(用于液相色谱-串联质谱)稀释至刻度，配制成混合农 药标准储备溶液，一18℃以下冰箱储存,有效期为2周。 4.4.3混合农药标准工作溶液 使用前用丙酮-正已烷溶液（4.2.2）（用于气相色谱-串联质谱）或乙腈-水溶液（4.2.3）（用于液相色 谱-串联质谱)稀释成所需的不同浓度的标准工作溶液,用做标准工作曲线。 4.4.4基质混合标准工作溶液 当基质效应明显时，用空白样品基质液配制不同浓度的标准工作溶液，用做标准工作曲线，现用 现配。 5仪器设备 5.1液相色谱-串联质谱：配电喷雾离子源(ESI)。 5.2气相色谱-串联质谱：配电子轰击源(EI)。 5.3分析天平：感量0.1mg。 5.4旋转蒸发仪。 5.5 超声波清洗器。 5.6 分液漏斗:250mL。 5.7圆底烧瓶:250mL。 5.8刻度试管：5mL。 6水试样采集与保存 6.1水试样的采集 按照NY/T396的规定采集水样，将取得的全部原始样品倒人洁净的聚乙烯容器内，密封，作为试 样，贴好标签。 6.2水试样的保存 一18℃以下冰箱储存。 7 分析步骤 7.1提取和净化 2 NY/T 3277—2018 量取20.0mL水样于分液漏斗中，加人60mL丙酮-二氯甲烷溶液（4.2.1)，剧烈振摇进行液液萃 取，静置分层，下层有机相经无水硫酸钠收集于250mL圆底烧瓶中,将分液漏斗中剩余水相再用60mL 丙酮-二氯甲烷溶液（4.2.1)萃取1次，合并有机相于圆底烧瓶中，旋转浓缩至近干,加人2.00mL丙酮 正已烷溶液（4.2.2）复溶，移取该溶液1.00mL至试管，氮气吹至近干，再用1.00mL乙腈-水溶液 （4.2.3)复溶，过0.22μm滤膜，用于液相色谱-串联质谱检测；圆底烧瓶中剩余的1.00mL溶液转移至 进样小瓶中用于气相色谱-串联质谱检测。 7.2液相色谱-串联质谱测定 7.2.1液相色谱参考条件 a) 色谱柱:C8,100mmX2.1mm(内径）,或性能相当者： b) 流动相:A为甲醇(含有 5 mmol/I 酸铵),B为水溶液（含有5mmol/L甲酸铵),流动相梯度 洗脱条件见表1； P c) 流速：0.25ml min; d) 进样体积：5 ul 动相及梯度洗脱 动相 相B min RAL 7.2.2 质谱参 a) 电离 电喷 b）扫描 正负 检测方 多反应 7.3气相色谱 7.3.1气相色谱参考 a) 色谱柱:DB ms B0 m b) 载气：高纯氮 流速:1 mL/min d) 进样口温度：250℃ e) 传输线温度：280℃； f) 程序升温：初始温度为100℃ 保持 温至150℃，再以10℃/min升温至 300℃，保持2min； g) 进样量：1.0μL。 7. 3. 2 质谱参考条件 a) 电离方式：电子电离； b) 电离能量：70eV； 离子源温度：230℃； CP 检测方式：多反应监测(MRM)，多反应监测条件参见附录B。 7.4定性测定 按照上述条件测定样品和基质(或溶剂)混合标准溶液，如果样品中检出的色谱峰保留时间与所用 3 NY/T 3277—2018 标准溶液中某种农药的保留时间一致,并且在扣除背景后所选择的2对子离子的丰度比与标准溶液中 该种农药的2对子离子丰度比的偏差不超过表2的限定,则可判断样品中存在相应的被测物。 表 2定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差 单位为百分率 类别 范 围 相对离子丰度 >50 20～50(含) 10～20（含） <10 允许的相对偏差 ±20 ±25 ±30 ±50 7.5定量测定 采用外标法进行定量计算。按浓度由小到大的顺序，依次分析所用混合工作标准溶液，得到浓度与 定量离子峰面积的工作曲线。样品溶液中分析物的响应值应在工作曲线范围内。 标准溶液的液相色谱-串联质谱和气相色谱-串联质谱多反应监测（MRM)色谱图分别参见附录C 和附录D。 7.6空白试验 按照7.1的步骤进行空白试剂和空白基质试验。 8结果计算 试样中每种被测组分含量按式(1)计算。 p: X V W; = (1) Vo 式中： 试样中每种被测组分的含量，单位为毫克每升(mg/L)； 从混合标准工作曲线上得到的样液中每种被测组分的质量浓度，单位为毫克每升（mg/L)； V一—试样最终定容体积,单位为毫升(mL); V。一—移取试样体积,单位为毫升(mL); 计算结果保留2位有效数字。 9精密度 9.1在重复性条件下,2 次独立测定结果的绝对差不大于重复性限(r),重复性限(r)的数据参见附 录E。 9.2在再现性条件下,2次独立测定结果的绝对差不大于再现性限（R），再现性限(R)的数据参见附 录F。 10.1定量限 本方法的88种农药及代谢物的定量限参见附录A。 10.2回收率 本方法的88种农药及代谢物的添加水平和回收率数据参见附录G。 4 NY/T 3277—2018 附录A （资料性附录） 88种农药及代谢物的中英文名称、CAS号、分子式和定量限 A.1 液相色谱-串联质谱检测的 40 种农药及代谢物的基本信息 见表A.1。 表A.1 RD 定量限 序号 中文名称 名秋 分 μg/ L 1 2-羟基葬 去津 N5 0. 1 2 3-羟基克百 hydro arboful 665 NO 5 3 4-羟 百菌 清 hydrox 1 6-脱异 4 丙基 1 HNO 5 苯磺 tribenuror 1 6 醚甲 HTN 0. 1 7 055- 0. 1 8 吡 midaclopri 1 9 此嘧 thy 0. 1 10 60207- Ln ChNs C 丙 坐 0. 1 11 稻壮 9s 0. 1 12 敌百 5 13 0. 1 nipric 14 .H.N 0. 1 15 氟苯虫 酰 HaF 4S 0. 1 16 氟环咚 N30 0. 1 17 甲胺磷 ,PS 0.1 18