ICS 67.080.20 B 31 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3170-2017 香菇中香菇素含量的测定 气相色谱一质谱联用法 Determination of 1,2,3,5,6-Pentathiepane in Lentinula edodes by GC-MS 2017-12-22 发布 2018-06-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 3170—2017 前 言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 本标准由农业部种植业管理司提出并归口。 本标准起草单位：农业部食用菌产品质量监督检验测试中心(上海)、上海市农业科学院农产品质量 标准与检测技术研究所。 本标准主要起草人：周昌艳、白冰、周佳欣、唐庆九、邢增涛、邵毅、刘海燕。 I NY/T 3170—2017 香菇中香菇素含量的测定 气相色谱-质谱联用法 1范围 本标准规定了香菇中香菇素[Lentinula edodes(Berk.）Pegler]含量的气相色谱-质谱测定方法。 本标准适用于香菇中香菇素含量的测定 本标准方法的检出限为 0. 1 mg/ kg。定量检测范围为 0. 25 mg/ kg -20.0 mg/ kg. 2规范性引用文件 件,凡是不注日期的引用文件,其最新版 本（包括所有的修改单） 适 GB/T 6682 分析实验室用水 3原理 串罗里硅土柱净化，以正已烤 丙酮溶液洗脱，氮 余物以正已烷溶 解,经气相色谱 质谱联用仪 制定，外标法定量 RA 4 试剂和材料 除另有说明外 使用访 T 6682规定的 二级水 4. 1 乙睛（色谱纯 4. 2 正已烷(色谱） 4.3 丙酮(色谱纯 4. 4 氯化钠(NaC 4. 5 正已烷-丙酮溶氵 50mL正 4.6香菇素标准品 4.7香菇素标准储备溶液： 称取香 标准品 11. mg(精确至0.1mg 已烷溶解，全部转 移到20mL试管中，超声 min,将溶液移入100mL容量瓶中,残余标准物质 次加人正已烷，重复上 述步骤 4 次后,将 100 mL容量瓶定容至刻度线,配制成浓度为 100 μg/ml 标准储备液。该储备液置 于0℃～4℃避光储存,有效期3个月 4. 8 香菇素标准工作溶液:分别吸取适量的标准储备溶液,用正已烷稀释为 1 μg/ mL、2 μg/ mL、5 μg/ mL、10 μg/mL、20 μg/mL 的标准工作液。该标准工作液置于 0℃～4℃避光条件下,有效期 1 个月。 4. 9弗罗里硅土柱(Florisil):3 mL,500 mg 或相当者。 5仪器和设备 5.1气相色谱-质谱联用仪：配有电子轰击电离源(EI)。 5.2分析天平：感量士0.0001g和±0.01g。 5.3回旋式振荡器。 5. 4组织捣碎机。 5.5抽滤装置。 NY/T 3170—2017 5.6氮吹仪。 5.7固相萃取装置。 5.8涡旋混合器。 6试样制备 鲜样：分取约500g，切碎,用组织捣碎机匀浆后，置于密闭容器中。在一20℃～一16℃条件下冷冻 保存。 干样：分取约200g，机械粉碎，过380μm筛，混匀置于密闭容器中室温保存。 7 分析步骤 7.1提取 7.1.1鲜样的提取：称取试料5g(精确至0.01g)置于100mL具塞锥形瓶中,准确加人10mL乙腈,在 回旋式振荡器上以150r/min转速振摇45min后，过滤，将滤液至事先加入4g氯化钠的50mL具塞量 筒中，剧烈震荡1min，静置15min以上待分层。吸取2mL上层有机相于10mL烧杯中，50℃氮吹至近 干，加入2mL正已烷溶解，待净化。 7.1.2干样的提取:称取试料 0. 5 g(精确至 0.01g)置于 100mL具塞锥形瓶中,加人 4.5 mL水混匀, 15min后准确加人10 mL乙腈,其他同 7.1. 1。 7.2净化 将弗罗里硅土柱用3mL正已烷-丙酮溶液、2mL正已烷依次淋洗，当溶剂液面到达吸附层表面时， 立即倒入上述待净化溶液,用15mL刻度离心管接收洗脱液,用3mL正已烷-丙酮溶液重复冲洗2次， 将装有洗脱液的离心管置于氮吹仪上，50℃氮吹至近干，用2mL正已烷定容，在涡旋混合器上混，移 入 2 mL进样瓶中,待测。 7.3测定 7.3.1色谱参考条件 色谱参考条件如下： a)1 色谱柱:HP-5MS毛细管柱,30mX0.25mmX0.25μm,或等效色谱柱"; b) i 进样口温度：220℃； c) 柱温箱温度：初始温度50℃保持1min，以10℃/min升温至280℃保持5min，后运行1min d) 载气：氮气，纯度>99.99%； e） 载气流速：1.0mL/min; f）进样方式和进样量：不分流进样，进样量1μL。 7. 3. 2 质谱参考条件 a) 离子源温度：220℃； 四级杆温度：150℃； 传输线温度：280℃； d) 离子源：EI源； 扫描模式：选择离子模式(SIM); f）定性离子：m/z=142,124,78; 定量离子m/z=142。 1）HP-5MS毛细管柱是Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品的认可 如果其他等效产品具有相同的效果，可使用这些等效产品。 2 NY/T 3170—2017 7.3. 3 色谱分析 用气相色谱-质谱联用仪分别测定标准工作溶液和待测液，以标准工作溶液的峰面积对质量浓度绘 制标准工作曲线，以待测液溶液的峰面积与标准工作曲线比较定量。图谱参见附录A。 7. 4 空白试验 除不加待测样品外，采用完全相同的测定步骤进行操作。 8结果计算 试料中香菇素含量的测定结果按式(1)计算。 AXpXV = (1) A,Xm 式中: 试料中香菇素含量,单位为毫克每千克(mg/kg); A - 试料溶液中香菇素的峰面积； 标准工作溶液中香菇素的质量浓度,单位为微克每毫升(μg/mL)； Ps V 试料溶液定容体积,单位为毫升(mL)； A, 标准工作溶液中香菇素的峰面积； m- 试料质量，单位为克(g)； f 样品稀释倍数。 测定结果取其 2 次测定的算术平均值,计算结果保留 2 位有效数字;当结果大于 1 mg/ kg 时保留 3 位有效数字。 9 精密度 9. 1 重复性 在重复性条件下,获得的 2 次独立测试结果的绝对差值不超过算术平均值的 10%。 9.2再现性 在再现性条件下,获得的2次独立测试结果的绝对差值不超过算术平均值的15%。 NY/T 3170—2017 附录A (资料性附录) 参考谱图 A. 1 1. 0 μg/mL 香菇素标准溶液的总离子流图 见图 A.1。 中 f,m 圭溶液 #的总离子 流 A. 2 1. 0 μg/ m GRI 素标准 见图A. 人 088525858445350505 124.00 10 120 130 40 150 160 170 质核比，m/ 图A.2 1.0μg/mL香菇素标准溶液的质谱图 NY/T 3170—2017 中华人民共和国 农业行业标准 香菇中香菇素含量的测定 气相色谱-质谱联用法 NY/T 3170—2017 * * * 中国农业出版社出版 (北京市朝阳区麦子店街18号楼) （邮政编码：100125 网址： www.ccap.com.cn) 北京印刷一厂印刷 新华书店北京发行所发行 各地新华书店经销 * * * 开本880mmX1230mm1/16 印张0.75 字数15千字 2018年5月第1版 2018年5月北京第1次印刷 书号：16109·4379 定价：18.00元 版权专有 侵权必究 NY/T 31702017 举报电话：（010）65005894