ICS 65.020 B 17 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 1860.9—2016 代替NY/T1860.9—2010 农药理化性质测定试验导则 第9部分：水解 Guidelines on the determination of physico-chemical properties of pesticides Part 9 :Hydrolysis 2016-05-23 发布 2016-10-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 1860.9—2016 前言 NY/T1860《农药理化性质测定试验导则》分为38部分： 第1部分：pH； 第2部分：酸(碱)度； 第3部分：外观； 第4部分：热稳定性； 第5部分：紫外/可见光吸收； 第6部分：爆炸性； 第7部分：水中光解； 第8部分：正辛醇/水分配系数； 第9部分：水解； 第10部分：氧化/还原：化学不相容性； 第11部分：闪点； 第12部分：燃点； 第13部分：与非极性有机溶剂混溶性； 第14部分：饱和蒸气压； 第15部分：固体可燃性； 第16部分：对包装材料腐蚀性； 第17部分：密度； 第18部分：比旋光度； 第19部分：沸点； 第20部分：熔点/熔程； 第21部分：黏度； 第22部分：有机溶剂中溶解度； 第23部分：水中溶解度； 第24部分：固体的相对自燃温度； 第25部分：气体可燃性； 第26部分：自燃温度（液体与气体）； 第27部分：气雾剂的可燃性； 第28部分：氧化性； 第29部分：遇水可燃性； 第30部分：水中解离常数； 第31部分：水溶液表面张力； 第32部分：粒径分布； 第33部分：吸附/解吸附； 第34部分：水中形成络合物的能力； 第35部分：聚合物分子量和分子量分布测定（凝胶渗透色谱法）； 第36部分：聚合物低分子量组分含量测定（凝胶渗透色谱法）； 第37部分：自热物质试验； I NY/T 1860.9—2016 一第38部分：对金属和金属离子的稳定性。 本部分为NY/T1860的第9部分 本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草， 本部分代替NY/T1860.9一2010《农药理化性质测定试验导则第9部分：水解》。 本部分与NY/T1860.9一2010相比，除编辑性修改外，主要技术内容变化如下： 将50℃恒温进行5d的试验阶段称为"预试验”，后续水解试验称为“正式试验”。本标准改为 “初步试验”（或第一层次试验）和"第二阶段试验”（或第二层次试验）（详见3.5.3）； 修改原标准“正式试验”温度要求，改为试验温度需要选择三个不同温度（详见3.4.1）； 一修改原标准"正式试验中试验周期”，改为“持续30d或至水解90%为止（两者取其短）”（详见 3. 4. 2); 增加一级动力学计算公式（详见3.6.3）； 本部分由农业部种植业管理司提出并归口。 本部分负责起草单位：农业部农药检定所。 本部分参加起草单位：沈阳化工研究院有限公司。 本部分主要起草人：宋俊华、侯松嵋、王胜翔、赵清华、郭静、黄伟。 本部分的历次版本发布情况为： -NY/T 1860.9—2010。 IⅡI NY/T 1860.9—2016 农药理化性质测定试验导则 第9部分:水解 1范围 本部分规定了水解测定的试验方法和试验报告内容等基本要求。 本部分适用于农药登记试验中农药 有效成分 >98%)或农药原药水解性质的测定。 术语和定义 下列术语和定 义适用 2. 1 农药水解 农药在水中 生的花 分解现象 2. 2 S 半衰期 alf-life( 水解半天 期A) 衰 指被试物 2. 3 R 一级动力 学反应 rst 被试物反 应速率 定比例 系，该比例 学通率 3试验方法 C 安全提 下： 的 安全问题，所涉及 的试验材料、操作 过程产 ，可能具有爆炸性、腐蚀性、毒性等危险 ,试验机构禾 和人员应根据不同 的试验样品、仪 器设 规范建立适当的安全及健康防护措施，并保证符合国 国家有关法规的规定。 3.1方法提要 人 向不同pH(pH4 H7、pH9 )的灭菌缓冲液中加人被试物，在受 空实 冬件下（温度恒定，黑暗） 反应。取适当的时间间隔，分析缓冲液中的被试物浓 用适宜的分析方法测定被试物的浓度。以浓 度的对数形式(lgC,)对时间作图,通过斜率 算出速率常数和半衰期 根据不同温度点产生的数据，利 用阿伦尼乌斯关系估算 25℃时的速率常数和半衰期。 3.2仪器设备 洁净工作台。 高压灭菌锅。 分析仪器：如气相色谱仪、液相色谱仪、质谱、分光光度计等。 培养箱。 pH计。 3.3试剂和材料 缓冲溶液：pH4、pH7和pH9的缓冲溶液（pH允许波动范围为士0.2)。 助溶剂：甲醇、乙腈或丙酮等。 0.22μm水相过滤膜。 NY/T 1860.9—2016 容量瓶。 试剂瓶。 安瓶或磨口试管等密封玻璃容器。 3.4试验条件 3.4.1试验温度和环境 水解试验应在恒温和黑暗条件下进行。控温精度为±1.0℃。 第一阶段试验：试验温度为50℃。 第二阶段试验：应在至少3个温度下进行（包括50℃），建议试验温度范围为10℃～70℃。 3.4.2试验周期 第一阶段（初步试验)应连续进行5d。 第二阶段（高层次试验）应持续30d或至水解90%为止（两者取其短）。 3.5测定步骤 3.5.1缓冲溶液的配制 水解试验应分别在pH4、pH7和pH9的缓冲溶液中进行，缓冲溶液的配制方法见附录B 应使用校准过的pH计在试验温度下测定每个缓冲液的pH,测量精度至少达到0.1。 3.5.2试样溶液配制 被试物应以水溶液的形式加人到不同的缓冲液中。必要时，可以使用少量与水混溶的溶剂（如丙 酮、乙腈和乙醇），以辅助被试物的溶解，但浓度不宜超过1%（V/V）。 如需使用更高浓度的溶剂（如当被试物溶解度很小时），需证明溶剂对被试物水解无影响。 被试物浓度不得大于其水溶解度的50%或0.01mol/L（二者取其小）。 3.5.3水解测定 3.5.3.1第一阶段(初步试验) 应于(50士1.0）℃分别在pH4、pH7和pH9的条件下对被试物进行第一阶段试验。如果5d后观 察到水解率低于10%（T1/225℃>1年），即可认为被试物稳定，无需进行第二阶段试验。 3.5.3.2第二阶段(高层次试验) 在上述第一阶段水解试验中，如发现被试物在某pH下不稳定。则需在该pH下进行第二阶段试 验。在第二阶段的试验过程中，按一定的时间间隔取样并测定试样溶液中的被试物浓度。每次取样的 样品溶液单独置于不同的容器中（避免因从一个容器内反复取样，造成样品污染）。在被试物水解 10%～90%的范围内至少要设6个浓度测定点。每个取样点的样品设置2个平行，取样的同时，对被试 物溶液的pH进行测定。 3.5.4分析方法质量控制 3.5.4.1回收率 对于测定被试物浓度的分析方法，回收率应在70%～110%的范围内，如低于70%，应给出合理解释， 3.5.4.2分析方法的重复性和灵敏度 最低检测浓度满足检测要求。 分析方法应能够定量测定初始浓度10%或以下的被试物浓度。 分析方法重复性应满足3次平行测定结果的RSD%不大于20%。 3.6数据处理 3.6.1被试物浓度的测定 选择适宜的定量方法测定试验溶液中的被试物浓度。 3.6.2水解程度的计算 2 NY/T 1860.9—2016 利用式(1)计算水解程度，以初始浓度的百分数表示。 占初始浓度的百分数（%） X 100 (1) 式中: C,——t时的浓度，单位为毫克每升(mg/L)； C 初始浓度，单位为毫克每升（mg/L）。 3.6.3反应动力学 （假）一级反应的速率一般表示为： dC dt (2) 积分得： lnC, = lnC-k. (3) 以lnC,对t作图，若为直线，表明符合假一级动力学反应，按回归分析的最佳拟合方式得出直线的 斜率，由此计算反应的速率常数k,按式(4)计算： k =- slope (4) 式中： slope- -lnC,对t 的斜率。 半衰期按式(5)计算得出： ln2 to.5 (5) k 式中: to.5 水解半衰期,单位为小时(h)； k 速率常数，单位为每小时（h-1）。 3.6.425℃水解速率常数的估算 根据不同温度下的k值，利用阿伦尼乌斯方程，以1nk对1/T作图，得到一条直线，以此估算25℃ 条件下的水解速率常数和半衰期，见式（6）。 k= A×e 或 lnk = E +InA (6) RXT 式中： A 拟合曲线的截距； E 活化能，单位为千焦每摩尔(kJ/mol)； R 气体常数[8.314J/（mol·k)]； T 绝对温度，单位为开尔文(K）。 4试验报告 试验报告至少应包括以下内容： a） 被试物和对照物信息：名称、性状、规格或纯度、生产者、生产日期/批号、失效期、贮存条件等； b） 试验条件和试验方法：试验体系pH、除菌条件、试验温度、试验溶液配制方法、初始浓度、采样 时间、色谱条件、样品处理方法和定量分析方法等； 试验现象描述； (P 试验结果：初步试验结果、被试物浓度对数值对时间的关系图(适当时，还包括水解产物浓度对 数值与时间的关系图）、25°C时的速率常数和半衰期、典型色谱图等； e） 结果讨论和评价； f）与结果解释有关的其他信息。 3 NY/T 1860. 9—2016 附录A （资料性附录） 分层次试验流程图 分层次试验流程见图A.1。 是 被试 大于 ptB 用缓冲溶液配制浓度小于 1 × 10-mol -L-l 白 内溶液 溶液 第一层次 在 50℃和pH4,pH7pH9 (预实验） 进行5d预 否在5d内水解率小于 第二层