ICS 65.020 B 17 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 1860.35—2016 农药理化性质测定试验导则 第35部分：聚合物分子量和分子量分布 测定（凝胶渗透色谱法） Guidelines on the determination of physico-chemical properties of pesticides Part 35 :Determination of the molecular weight and the molecular weight distribution of polymers using gel permeation chromatography 2016-05-23 发布 2016-10-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T 1860. 35—2016 NY/T1860《农药理化性质测定试验导则》分为38部分： 第1部分：pH； 第2部分：酸(碱)度； 第3部分：外观； 第4部分：热稳定性； 第5部分：紫外/可见光吸收； 第6部分：爆炸性； 第7部分：水中光解； 第8部分：正辛醇/水分配系数； 第9部分：水解； 第10部分：氧化/还原：化学不相容性； 第11部分：闪点； 第12部分：燃点； 第13部分：与非极性有机溶剂混溶性； 第14部分：饱和蒸气压； 第15部分：固体可燃性； 第16部分：对包装材料腐蚀性； 第17部分：密度； 第18部分：比旋光度； 第19部分：沸点； 第20部分：熔点/熔程； 第21部分：黏度； 第22部分：有机溶剂中溶解度； 第23部分：水中溶解度； 第24部分：固体的相对自燃温度； 第25部分：气体可燃性； 第26部分：自燃温度（液体与气体）； 第27部分：气雾剂的可燃性； 第28部分：氧化性； 第29部分：遇水可燃性； 第30部分：水中解离常数； 第31部分：水溶液表面张力； 第32部分：粒径分布； 第33部分：吸附/解吸附； 第34部分：水中形成络合物的能力； 第35部分：聚合物分子量和分子量分布测定（凝胶渗透色谱法）； 第36部分：聚合物低分子量组分含量测定（凝胶渗透色谱法）； 第37部分：自热物质试验； I NY/T 1860.35—2016 第38部分：对金属和金属离子的稳定性。 本部分为NY/T1860的第35部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草 本部分由农业部种植业管理司提出并归口。 本部分负责起草单位：农业部农药检定所。 本部分参加起草单位：浙江省农业科学院 本部分主要起草人：胡秀卿、李国平、于荣、张峰祖、张昌朋、吴珉。 Ⅱ NY/T 1860.35—2016 农药理化性质测定试验导则 第35部分：聚合物分子量和分子量分布测定（凝胶渗透色谱法） 1 范围 本部分规定了聚合物分子量和分子量分布测定的试验方法和试验报告内容等基本要求， 本部分适用于农药登记试验中聚合物农药原药的分子量和分子量分布的测定。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2. 1 数均分子量（Mn）the number-averagemolecularweight 按分子数统计平均的分子量。 2. 2 重均分子量(Mw）the weight-average molecular weight 按质量统计平均的分子量。 2. 3 峰位分子量(M,） the molecular weight at the peak maximum 峰值位置对应的分子量。 2. 4 分子量分布宽度(k） the breadth of the molecular weight distribution 聚合物分子量分散程度的度量，由重均分子量和数均分子量的比值Mu/M,表示。 2. 5 凝胶渗透色谱法(GPC）gelpermeation chromatography 凝胶渗透色谱法是一种特殊的液相色谱法，聚合物样品分子在色谱柱上根据溶质分子的体积大小 分离，大分子先被洗脱，小分子随后洗脱，聚合物按照分子量大小得到分离。淋洗体积在规定的试验条 件下是聚合物分子的单一函数 3试验方法 安全提示：使用本部分的人员应有实验室工作的实践经验。本部分并未指出所有的安全问题。使 用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规的规定。 3.1方法提要 利用凝胶渗透色谱法将聚合物的分子组分在凝胶色谱柱中依据分子量大小顺序分离，使用合适的 检测器测定各分离分子组分的浓度。根据试样溶液各色谱峰的保留体积或保留时间从校正曲线确定各 峰的分子量，利用色谱图确定各色谱峰的峰高，计算样品的数均分子量、重均分子量及分子量分布。 凝胶渗透色谱法测定聚合物的平均分子量是一种相对方法，需用标准物质进行校正。校正曲线是 用一系列分布很窄、分子量已知的高分子标准样品绘制而成。 某些具有特殊复杂结构的聚合物不适于使用凝胶渗透色谱仪来测定时，可采用其他方法测定聚合 物的分子量，并应提供详细的验证材料，参见附录A。 1 NY/T 1860.35—2016 3.2仪器设备 凝胶渗透色谱仪：主要组件有溶剂储存器、泵、溶剂脱气装置、进样系统、色谱柱、恒温装置、检测器、 数据采集与处理系统。 应确保凝胶渗透色谱法系统的材料对所使用的流动相溶剂是惰性的，且无吸收和吸附效应。应测 定色谱柱或连用色谱柱的理论塔板数和分离度。色谱柱系统的分离度应≥1.7。 3.3试剂和材料 3.3.1标准样品 标准样品的结构和分子链的构象要与试林 的分于 能接近。在无法得到与样品一致或相似的 标准样品时，通常使用聚苯乙烯标准样品。如果使用其他参照物（如聚 二醇、聚环氧乙烷、聚甲基丙烯 酸甲酯、聚丙烯酸等)时，应该说明原因 通常使用的聚苯乙烯标准样品的规格是： M<2 000 2 000≤M,≤106 M,>106 3.3.2溶剂 3.3.3 过滤膜(0. 2 根据样品选择相匹配的 膜，不能与溶剂互溶 3.3.4农药原药（含母液）和农药制剂 R 3.4测定步骤 3.4.1标准溶液的配制 将一系列已知 分子量的窄分布标准样品分别用淋 液 浓度的选 择取决于进样体积 溶液黏度、检测器的灵敏度及标准机 品 J分子量 体积必须与 柱长相适应，并 定注意 点防止柱子超载。进样体积与浓度 变的最优比 正前 前确定。在校 正曲线的每个分 数量级内 完整校正曲线不能 交正点，所测样 品的分子量应在这些 若用聚苯乙烯标准 普适校正 曲线，校正曲线上分子量的最低点由 苯或其他适合的 非极性溶质确定。 3.4.2样品溶液的配制 原则上与标准样品溶液的配制要求相同。 样品用合适的溶 ，不能用超声振荡。为 防止大颗粒或微凝胶堵塞色谱 柱，样品溶液应先用对溶剂惰性的过滤膜过 如果样品包含无法溶解 的聚合物成分（如微溶胶），应在报告中明确指出，并说明观察到的现象 所配置的溶液应在24h之内 使用。 3.4.3测定 根据样品性质选择色谱柱、溶剂、温度，待仪器稳定后对标准溶液和样品溶液进行凝胶渗透色谱测 定，获得凝胶渗透色谱图和分子量分布曲线图。样品至少测定两个重复 3.5数据处理 3.5.1校正曲线绘制 以标准样品峰位分子量M，的对数值lgM.对相应的保留体积Vr作图，得到校正曲线（lgM.一Vk 曲线）。 当采用以小角激光光散射仪为分子量检测器的双检测器时，无需建立校正曲线，可直接得到测定样 品的绝对分子量及分子量分布。 2 NY/T 1860.35—2016 3.5.2样品结果计算 根据式(1）、式（2）、式（3)分别计算数均分子量、重均分子量及分子量分布宽度。也可通过相应软件 对采集的凝胶渗透色谱图进行快速准确的数据处理，自动生成结果 ZH: 台 Mn (1) >[H;/ M;] 式中： M. 聚合物的数均分子量，单位为千克每摩尔（kg/m n 所测得数据的个 H; M; 保留体 积为V. g/mol H (2) >H 式中 Mu 合物闸 均分子量 LTURAL (3) 式中 k 3.6允许老 差 在重复收 试验报告 试验报 急规格 1) 样品 三日期/批号、特性、添加剂、杂质等 2) 标准 制造商、特 数、峰位分子量 3) 试验条 仪器条件 步骤及问题描述等； 4) 试验现象描述：样品包含 无法溶 解的聚 合物成分(如微溶胶)等 5) 试验结果：校准曲线、保留体积 数均分子量、重均分子量 量分布宽度，允许差及谱图等 信息； 6) 与结果解释有关的其他信 NY/T1860.35—2016 附录A （资料性附录） 测定聚合物分子量的其他方法 分子量测定中最常用的方法是凝胶渗透色谱法，特别是被测聚合物的结构与标准样品的结构相似 时。但是如果在实际中使用凝胶渗透色谱法有困难时，或者已经估计到待测样品不适合用凝胶渗透色 谱方法测试（需要确认），可以采用其他方法 A.1利用依数性的方法 主要测定在一种溶剂中加人某种聚合物后，溶液的沸点升高或冰点降低。它是根据聚合物溶液的 沸点升高值或冰点降低值与聚合物的分子量成比例的原理进行聚合物分子量的测定。 适用范围：M<20000。 A.1.2蒸气压降低法(lowering of vapor pressure) 在一种参考溶剂中加人某种已知量的聚合物前后，测定溶液的蒸气压。 适用范围：M<20000。 A. 1.3膜渗透压法(membrane osmometry) 膜渗透压法基于渗透原理，当半透膜将两种浓度不同的溶液分开时，两边溶剂的化学位是不同的 于是引起浓度低的一侧的溶剂分子通过半透膜向浓度高的一测渗透，直至达到平衡。 试验中，半透膜一边是纯溶剂，另一边是聚合物溶液，溶剂分子被吸引穿过膜进行转移造成压差（即 渗透压），压差的大小取决