DB50/T1573—2024ICS65.020.20 CCSB30/39DB50 重庆市地方标准 DB50/T1573—2024 草莓脱毒种苗快速繁育技术规程 2024-03-15发布 2024-06-15实施 重庆市市场监督管理局发布DB50/T1573—2024 I前  言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由重庆市农业农村委员会提出、归口并组织实施。 本文件起草单位：重庆市农业技术推广总站。 本文件主要起草人：胡黎华、黄振霖、杨灿芳、赵雨佳、欧建龙、曾卓华、熊伟、寇琳羚。DB50/T1573—2024 1草莓脱毒种苗快速繁育技术规程 1范围 本文件规定了草莓脱毒试管苗培育、脱毒原原种苗生产、脱毒原种苗繁殖、脱毒种苗繁殖、病毒检 测等要求。 本文件适用于草莓脱毒种苗快速繁育。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T8321农药合理使用准则 GB/T29375马铃薯脱毒试管苗繁育技术规程 NY/T406脱毒草莓种苗病毒检测技术规程 NY/T3032草莓脱毒种苗生产技术规程 3术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4脱毒试管苗培育 4.1消毒处理 按GB/T29375的规定执行。 4.2培养基制备 4.2.1培养基配方：茎尖分化培养基MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖3%+琼脂0.7%；增殖 培养基MS+6-BA0.3mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖3%+0.7%琼脂；生根培养基1/2MS+IB0.05mg/L+蔗 糖1.5%+琼脂0.7%。 4.2.2将配置好的培养基溶液分装入培养容器中，培养基深度约2cm，密封瓶口，在0.12mpa/cm²压 力下灭菌15min，冷却备用。 4.3接种材料 4.3.1母株选择 田间选择生长健壮、无病虫害、能充分表现本品种优良性状的植株为母株。 4.3.2接种材料DB50/T1573—2024 2选择充实饱满、无机械损伤的新生匍匐茎，截取2cm～3cm顶端部位为接种材料。 4.3.3清洗 将接种材料放入纱布袋，流水冲洗去除表面沙尘和杂质，灭菌滤纸吸干水分备用。 4.4茎尖剥离及接种 4.4.1在超净工作台上，将接种材料置于灭菌容器中，加入75%酒精浸泡30s。倒出酒精，无菌水 冲洗3次。加0.1%升汞溶液浸泡7min～8min，期间适当晃动容器，倒出升汞溶液，无菌水冲洗5 次，用灭菌滤纸吸干水分后备用。 4.4.2在体视解剖镜下用解剖针逐层剥去茎尖组织顶端的叶原基，直至露出顶端生长点，期间每剥离1 层应将解剖针浸入75%的酒精中消毒1s。切取0.2mm～0.3mm大小的生长点组织，按1～3个/ 瓶接种于分化培养基上，密封瓶口，注明品种、编号和接种日期。 4.5培养 4.5.1培养条件 温度23℃±2℃，相对湿度70%，光照强度2400Lx，每天光照时间14h～16h，生根阶段可适 当增加光照强度至5000Lx。 4.5.2茎尖分化成苗 将接种茎尖的培养瓶置于无菌室内培养，直至茎尖分化成带叶原基的小芽丛，将小芽丛编号后转移 至增殖培养基，每瓶接种1个，成苗后剪取叶片检测病毒，保留无病毒苗丛。 4.5.3脱毒苗扩繁 将无病毒苗丛切分成2～4块小苗丛，接种于增殖培养基继代培养，每20d～30d增殖1代。 4.5.4生根培养 从继代苗丛剪取2cm以上的小苗接种于生根培养基，间距1cm～2cm，培养20d～30d，获得 脱毒试管苗。 5脱毒原原种苗生产 5.1生产条件 在无病虫的网室或温室中生产，纱网规格100目。工作人员进入前应对手部、鞋底消毒，穿戴专 用工作服。室内工具专用。 5.2基质配置 将草炭、蛭石、细土、有机肥按体积5:2:2:1比例混合，按1㎏/m³加入氮磷钾（N-P2O5-K2O， 15-15-15）复合肥，混匀、过筛，高温日晒或按4g/㎏拌入50%多菌灵可湿性粉剂消毒后备用。 5.3炼苗移栽 生根试管苗在室温弱光环境下炼苗1d，揭去瓶盖后再炼苗1d。取苗洗去培养基，移栽入温、网 室内的基质苗床（穴盘），浇透水后喷施1次多粘类芽孢杆菌生物菌肥，间隔7d再喷施1～2次。DB50/T1573—2024 35.4管理 苗床（穴盘）上方搭建小拱棚,覆盖塑料薄膜、遮阳网，7d后逐渐通风和增加光照。棚内温度 15℃～25℃，相对湿度85%～90%。14d后撤除薄膜，移栽60d后生长成可定植的脱毒原原种苗。 5.5品种真实性观察 将脱毒原原种苗定植后观察植物学性状和生物学性状，淘汰变异植株。 6脱毒原种苗繁殖 将脱毒原原种苗带土定植于基质苗床，株行距1m×1m。将匍匐茎节压入基质，子苗长至4片叶 以上，得到脱毒原种苗，可作为扩繁脱毒种苗的母株。 7脱毒种苗繁殖 7.1育苗地选择 海拔1000m～1200m，地势平坦、排灌方便、光照充足，无土壤线虫及草莓病源，土质疏松肥沃、 微酸性或中性、3年内未种植过草莓和茄科作物的沙壤土地块,建立脱毒种苗繁育苗圃。 7.2整地施肥 每667㎡施入腐熟的有机肥1000㎏，深翻、平整土地，耕匀耙细开厢，厢宽1m～1.2m。 7.3定植 在春季气温达到10℃以上时，将脱毒原种苗按株距50cm～60cm单行定植于厢面中部，栽植 深度“上不埋心，下不露根”。栽后浇透定根水，保持土壤湿润。 7.4田间管理 7.4.1水肥管理 7.4.1.1宜配套安装喷灌设施，夏季浇水选择早晚地温较低时进行，雨季应开沟排水。 7.4.1.2匍匐茎发生期，结合浇水每次用3kg/亩氮磷钾复合肥（N-P2O5-K2O，20-20-20）追肥1～2 次，生长后期，宜叶面喷施0.1%～0.3%磷酸二氢钾水溶肥。 7.4.2花、叶管理 及时摘除母株上的花蕾花序、干枯老叶、病叶。 7.4.3匍匐茎整理 匍匐茎发生期及时将交叉重叠的匍匐茎拉开，将匍匐茎上发生的不定根茎节段压入土中。 7.5病虫害防治 7.5.1防治原则 坚持“预防为主，综合防治”的植保方针，以农业防治和物理防治为基础，优先采用生物防治技术， 辅以化学防治应急控害措施。DB50/T1573—2024 47.5.2主要防治对象 主要虫害有蚜虫、螨类、斜纹夜蛾、蛴螬等，主要病害有蛇眼病、炭疽病、白粉病、红心根腐病等。 7.5.3用药安全 农药使用应符合GB/T8321的规定。 7.6出圃标准 具有4片以上展开叶，叶色鲜绿，叶柄粗壮，中心芽饱满，根茎粗1cm以上，根系发达，初生 根长度6cm以上，无病虫害、无机械损伤。 8病毒检测 病毒检测按NY/T406的规定执行。脱毒瓶苗和脱毒原原种苗脱毒率100%，脱毒原种苗脱毒率≥ 95%，脱毒种苗脱毒率≥90%。