ICS65.020 CCSB05DB4403 深圳市地方标准 DB4403/T528—2024 水稻高效诱变育种技术规程 Codeofpracticeforhighefficiencymutagenesisbreedinginrice 2024-11-15发布 2024-12-01实施 深圳市市场监督管理局发布DB4403/T528—2024 I目次 前言.......................................................................................................................................................................Ⅱ 1范围...................................................................................................................................................................1 2规范性引用文件...............................................................................................................................................1 3缩略语...............................................................................................................................................................1 4术语和定义.......................................................................................................................................................1 5仪器与试剂.......................................................................................................................................................1 6水稻EMS诱变育种程序...................................................................................................................................2 7供试材料选择...................................................................................................................................................2 8水稻种子预处理...............................................................................................................................................2 9EMS诱变处理....................................................................................................................................................2 10发芽试验...........................................................................................................................................................2 11诱变后代的种植与筛选...................................................................................................................................2 12优良株系鉴定...................................................................................................................................................3 13育种档案...........................................................................................................................................................3 参考文献.................................................................................................................................................................4DB4403/T528—2024 II前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由深圳市市场监督管理局提出并归口。 本文件起草单位：深圳市农业科技促进中心、深圳洁田模式生物科技有限公司。 本文件主要起草人：杨晓怀，唐晓艳，金曼，张维乐，陈子晟，陈雷，曾艳红，李永红，陈红娜， 周志豪，曹孔江，陈敏，鲁勇，刘志宏。DB4403/T528—2024 1水稻高效诱变育种技术规程 1范围 本文件规定了水稻EMS诱变育种涉及的仪器与试剂、水稻EMS诱变育种程序、供试材料选择、水稻 种子预处理、EMS诱变处理、发芽试验、诱变后代的种植与筛选、优良株系鉴定以及育种档案等方面的 技术要求。 本文件适用于利用EMS诱变育种技术进行水稻品种选育。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该 日期对应的版本适用于本文件。不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T3543.4—1995农作物种子检验规程发芽试验 GB4404.1粮食作物种子第1部分：禾谷类 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 甲基磺酸乙酯ethylmethanesulfone 一种强效化学诱变剂，属于烷化剂诱变最常用的一种，需避光保存。 3.2 水稻EMS诱变EMSmutagenesisofrice 利用甲基磺酸乙酯（4.1）处理水稻种子。 4缩略语 下列缩略语适用于本文件。 EMS：甲基磺酸乙酯（EthylMethaneSulfone） 5仪器与试剂 5.1仪器设备 仪器包括但不限于以下内容： a）通风橱； b）数种设备：数粒板或电子自动数粒仪等；DB4403/T528—2024 2c）发芽器具：发芽箱、发芽室、发芽皿、发芽盘等。 5.2试剂 EMS、50mmol磷酸钠缓冲液（pH7.0）、氢氧化钠或硫代硫酸钠等。 6水稻EMS诱变育种程序 水稻EMS诱变育种程序应包括供试材料选择、水稻种子预处理、EMS诱变处理、发芽试验、诱变后 代的种植与筛选以及优良株系鉴定六个阶段。 7供试材料选择 应选择符合GB4404.1规定的水稻种子作为供试材料。 8水稻种子预处理 8.1水稻种子应在25～30℃条件下，用清水浸泡48小时，每24小时换一次水。 8.2水稻种子浸泡48小时后，用清水冲洗干净并稍晾干。 9EMS诱变处理 9.1EMS处理液应现配现用。应在通风橱中用50mmol磷酸钠缓冲液（pH7.0）配制体积分数为80%的 EMS处理液。 9.2水稻种子应完全浸没于EMS处理液中，并在28℃暗条件下浸泡处理12小时，期间每隔1小时搅 拌混匀。 9.3EMS诱变处理结束后，倒出EMS处理液。用清水清洗水稻种子后控干水分，重复不少于5次，除 去EMS残留。 9.4EMS处理液及清洗废水应统一收集并装入废液桶中，可采用氢氧化钠（终浓度1mol）中和处理， 并在阳光下暴晒2～3天；或5%硫代硫酸钠，作为解毒剂和终止剂处理废液。 9.5废弃物及废液应按照实验室管理要求集中标记存放，并通过具有资质的固废危废处理公司进行回 收处理。 9.6操作者应穿着实验服，佩戴防护手套、口罩、护目镜等。 10发芽试验 10.1按照GB/T3543.4-1995要求，对EMS诱变处理后的水稻种子进行发芽试验。 10.2统计1000粒水稻种子的发芽