ICS 65.020 CCS B30 43 湖南省 地方 标准 DB 43/T 2991—2024 水产养殖环境（水体、底泥）中大环内酯 类抗生素的测定 液相色谱-串联质谱法 Determination of macrolide antibiotics in water and sediment from aquaculture environment —Liquid chromatography- tandem mass spectrometry 2024 - 05 - 13发布 2024 - 07 - 13实施 湖南省市场监督管理局 发布 DB 43/T 2991 —2024 I 目次 前言................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语和定义 ........................................................................ 1 4 方法原理 .......................................................................... 1 5 试剂与材料 ........................................................................ 1 6 仪器与设备 ........................................................................ 2 7 样品 .............................................................................. 2 8 测定步骤 .......................................................................... 3 9 结果计算和表述 .................................................................... 5 10 检测方法的灵敏度、准确度和精 密度 ................................................. 6 附录A（资料性） 大环内酯类药物中英文通用名称、化学分子式和 CAS号 ..................... 7 附录B（资料性） 标准溶液特征离子质量色谱图 .......................................... 8 DB 43/T 2991 —2024 II 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由湖南省农业农村厅提出。 本文件由湖南省农业标准化技术委员会归口。 本文件起草单位：湖南省水产科学研究所、农业农村部渔业产品质量检验测试中心（长沙）、澧县 农产品质量安全检测中心、长沙市雨花区农业农村局。 本文件主要起草人：万译文、杨霄、何咏、李小玲、谢仲桂、崔先锋、曾春芳、索纹纹、陈湘艺、 刘伶俐、雷琴、肖维、洪波、尹升福、谢玉昆、黄向荣、黄华伟、杨宇。DB 43/T 2 991—2024 1 水产养殖环境（水体、底泥）中大环内酯类抗生素的测定 液相色 谱-串联质谱法 1 范围 本文件描述了水产养殖环境（水体、底泥）中大环内酯类抗生素的液相色 谱-串联质谱测定方法。 本文件适用于水产养殖环境（水体、底泥）中脱水红霉素、罗红霉素、克拉霉素、竹桃霉素、吉他 霉素、交沙霉素、泰乐菌素、替米考星的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB 17378.5 海洋监测规范 第5部分：沉积物分析 SC/T 9102.3 渔业生态环境监测规范 第3部分：淡水 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 方法原理 水试样中的大环内酯类抗生素经 HLB固相萃取柱富集和净化，底泥试样中的大环内酯类抗生素经 氨化乙腈提取， PSA和C18吸附剂净化。 净化后的溶液用带有电喷雾离子源的液相色谱- 串联质谱仪测定， 内标法定量。 5 试剂与材料 试剂 5.1.1 水：GB/T 6682 规定的一级水。 5.1.2 甲醇（CH3OH）：色谱纯。 5.1.3 乙腈（CH3CN）：色谱纯。 5.1.4 甲酸（HCOOH）：色谱纯。 5.1.5 氯化钠（ NaCl）：分析纯。 5.1.6 氨水（NH3 ▪ H2O）：分析纯，浓度为 25%～28%。 5.1.7 无水硫酸镁（ MgSO 4）：分析纯。 5.1.8 乙二胺四乙酸二钠（ Na2EDTA）：分析纯 。 溶液配制 DB 43/T 2991 —2024 2 5.2.1 0.1%甲酸水溶液：取甲酸 0.5 mL，用水稀释至 500 mL。 5.2.2 甲酸-乙腈溶液：取乙腈 30 mL，用 0.1%甲酸水溶液稀释至 100 mL。 5.2.3 1%氨化乙腈：取氨水 5 mL，用乙腈稀释至 500 mL。 标准品 5.3.1 大环内酯类抗生素：脱水红霉素、罗红霉素、克拉霉素、竹桃霉素、吉他霉素、交沙霉素、泰 乐菌素、替米考星，纯度均大于等于 95.0%，具体内容见附录 A。 5.3.2 内标：罗红霉素 -D7，纯度大于等于 95.0%，具体内容见附录 A。 标准溶液配制 5.4.1 标准储备液（ 100 μg/mL）：取大环内酯类抗生素标准品各约 10 mg，精密称定，用甲醇溶解并 稀释至100 mL，配制成浓度均为 100 μg/mL的标准储备液。 4 ℃避光保存，有效期 3个月。 5.4.2 内标标准 储备液（ 100 μg/mL）：取罗红霉素- D7标准品约 10 mg，精密称定，用甲醇溶解并稀释 至100 mL，配制成浓度为 100 μg/mL的内标标准储备液。 4℃避光保存，有效期 3个月。 5.4.3 混合标准工作液（ 1.0 μg/mL）：分别精密量取标准储备液各 1 mL，于100 mL容量瓶中，用甲 醇稀释至刻度，配制成浓度为 1.0 μg/mL的混合标准工作液。4 ℃避光保存，有效期 1个月。 5.4.4 内标标准工作液（ 1.0 μg/mL）：精密量取内标标准储备液 1 mL，于 100 mL容量瓶中，用甲醇 稀释至刻度，配制成浓度为 1.0 μg/mL的内标标准工作液。 4 ℃避光保存，有效期 1个月。 材料 5.5.1 HLB（二乙烯苯和 N-乙烯基吡咯烷酮共聚物）固相萃取柱：500 mg/6 mL ，或相当者。 5.5.2 PSA（N-丙基乙二胺）吸附剂：粒径 40 μm～63 μm，或相当者。 5.5.3 C18（十八烷基键合硅胶）吸附剂：粒径 40 μm～63 μm，或相当者。 5.5.4 玻璃纤维滤膜： 0.45 μm。 5.5.5 尼龙滤膜： 0.22 μm。 6 仪器与设备 液相色谱 -串联质谱仪：配有电喷雾离子源。 分析天平：感量 0.01 g和0.00001 g 。 冷冻干燥机。 涡旋混合器。 高速离心机：转速大于等于 10000 r/min。 超声波清洗器。 固相萃取装置。 氮吹仪。 旋转蒸发仪。 pH计。 7 样品 样品采集