ICS 65.020 CCS B30 43 湖南省 地方 标准 DB 43/T 2990—2024 水产养殖环境（水体、底泥）中地西泮的 测定 液相色谱-串联质谱法 Determination of diazepam in water and sediment from aqua culture environments — Liquid chromatography- tandem mass spectrometry method 2024 - 05 - 13发布 2024 - 07 - 13实施 湖南省市场监督管理局 发布 DB 43/T 2990 —2024 I 目次 前言................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语和定义 ........................................................................ 1 4 方法原理 .......................................................................... 1 5 试剂与材料 ........................................................................ 1 6 仪器与设备 ........................................................................ 2 7 样品 .............................................................................. 2 8 测定步骤 .......................................................................... 3 9 结果计算和表述 .................................................................... 5 10 检测方法的灵敏度、准确度和精密度 ................................................. 5 附录A（资料性） 地西泮标准溶液特征离子质量色谱图 .................................... 6 DB 43/T 2990 —2024 II 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由湖南省农业农村厅提出。 本文件由湖南省农业标准化技术委员会归口。 本文件起草单位：湖南省水产科学研究所、农业农村部渔业产品质量检验测试中心（长沙）、澧县 农产品质量安全检测中心、邵阳县畜牧水产事务中心。 本文件主要起草人：李小玲、万译文、杨霄、索纹纹、谢仲桂、崔先锋、曾春芳、雷琴、谢玉昆、 何咏、陈湘艺、黄向荣、张永勇、尹升福、刘伶俐、洪波、黄华伟、肖维。 DB 43/T 2990 —2024 1 水产养殖环境（水体、底泥）中地西泮的测定 液相色谱-串联质谱 法 1 范围 本文件描述了水产养殖环境（水体、底泥）中地西泮的液相色谱 -串联质谱测定方法。 本文件适用于水产养殖环境（水体、底泥）中地西泮的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB 17378.5 海洋监测规范 第5部分：沉积物分析 SC/T 9102.3 渔业生态环境监测规范 第3部分：淡水 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 方法原理 底泥试样经氨化 乙酸乙酯提取，氮气浓缩。底泥试液、水体试样加入甲酸酸化，固相萃取柱富集净 化，液相色谱串联质谱仪测定，内标法定量。 5 试剂与材料 试剂 5.1.1 水：GB/T 6682 规定的一级水。 5.1.2 乙腈（CH3CN）：色谱纯。 5.1.3 乙酸乙酯（ CH3COOC 2H5）：色谱纯。 5.1.4 甲酸（HCOOH）：色谱纯。 5.1.5 氨水（NH3 ▪ H2O）：分析纯，浓度为 25%～28%。 溶液配制 5.2.1 1%氨水-乙酸乙酯：取氨水 5 mL，用乙酸乙酯稀释至 500 mL。 5.2.2 1%甲酸-水溶液：取甲酸 10 mL，用水稀释至 1000 mL。 5.2.3 5%氨水-乙腈溶液：取氨水 25 mL，用乙腈稀释至 500 mL。 5.2.4 0.1%甲酸-水溶液：取甲酸 1 mL，用水稀释至 1000 mL。 DB 43/T 2990 —2024 2 标准品 5.3.1 地西泮（ Diazepam, C 16H13ClN2O, CAS号：439-14-5）。 5.3.2 氘代地西泮（ Diazepam- D5, C16H8D5ClN2O, CAS号：65854-76-4）。 标准溶液配制 5.4.1 标准储备液（ 100 μg/mL）：取地西泮标准品 10 mg，精密称定，用乙腈溶解并稀释至 100 mL， 配制成浓度为 100 μg/mL的标准储备液。 -18 ℃避光保存，有效期 12个月。 5.4.2 内标储备液（100 μg/mL）：取氘代地西泮标准品 10 mg，精密称定，用乙腈溶解并稀释至 100 mL，配制成浓度为 100 μg/mL的内标储备液。 -18 ℃避光保存，有效期 12个月。 5.4.3 标准中间液（ 1.0 μg/mL）：准确移取地西泮标准储备液 1 mL，于100 mL容量瓶中，用乙腈稀 释至刻度，配制成浓度为 1.0 μg/mL的标准中间液。 -18 ℃避光保存，有效期 6个月。 5.4.4 内标中间液（1.0 μg/mL）：准确移取氘代地西泮标准储备液 1 mL，于100 mL容量瓶中，用乙 腈稀释至刻度，配制成浓度为 1.0 μg/mL的内标中间液。- 18 ℃避光保存，有效期 6个月。 5.4.5 标准使用液（0.10 μg/mL）：准确移取 5 mL地西泮标准中间液于 50 mL容量瓶中，用乙腈稀释 至刻度，配制成浓度为 0.10 μg/mL的标准使用液。 4 ℃避光保存，现配现用。 5.4.6 内标使用液（0.10 μg/mL）：准确移取 5 mL氘代地西泮内标中间液于 50 mL容量瓶中，用乙腈 稀释至刻度，配制成浓度为 0.10 μg/mL的内标使用液。4 ℃避光保存，现配现用。 材料 5.5.1 混合型强阳离子交换固相萃取小柱： 150 mg/6 mL，或相当者。 5.5.2 聚四氟乙烯滤膜： 0.22 μm。 5.5.3 玻璃纤维滤膜： 0.45 μm。 6 仪器与设备 液相色谱 -串联质谱仪：配有电喷雾离子源。 分析天平：感量 0.01 g和0.00001 g 。 冷冻干燥机。 涡旋混合器。 高速离心机：转速大于等于 8000 r/min。 超声波清洗器。 固相萃取装置。 氮吹仪。 7 样品 样品采集 水样和底泥样品按照 SC/T 9102.3 规定的方法进行采集。 试样制备 水样采样量应不少于 1 L，经0.45 μm玻璃纤维滤膜过滤，置于棕色样品瓶中，0 ℃～4 ℃避光保 存，一周内完成分析。 底泥样品采样量应不少于 500 g，于 -20 ℃预冷冻 24 h， 经冷冻干燥机（ -50 ℃，