ICS 65.020.30 CCS B 43 3715 聊城市 地方 标准 DB 3715/T 39—2023 鲁西黑头羊人工授精技术规程 2023 - 10 - 7发布 2023 - 11 - 7实施 聊城市市场监督管理局 发布 DB 3715/T 39 —2023 I 前言 本文件按照 GB/T 1.1 —2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机 构不承担识别这些专利的责任。 本文件由 聊城市农业农村局提出、归口并组织实施。 本文件起草单位： 聊城市东昌府区畜牧兽医事业发展中心、聊城市东昌府区兴堂 牧业有限公司、聊 城职业技术学院、莘县畜牧兽医事业发展中心、高唐县畜牧水产事业中心、冠县农业综合服务中心、聊 城市东昌府区道口铺街道农林水综合服务中心、聊城市东昌府区闫寺街道农林水综合服务中心。 本文件主要起草人： 侯国生、张娅娣、曹学香、李孟燕、齐来勇、李长磊、石延国、郭广玲、许文 婷、王兰天、贾国富、衣慧静、苏子明、张东福、杨雪青、张广瑞、李乐军、张瑞华、张国良、赵景龙、 付崇波。 DB 3715/T 39 —2023 1 鲁西黑头羊人工授精技术规程 1 范围 本文件规定了鲁西黑头羊 的术语和定义、种公羊选择与调教、采精前准备、精液品质检查、精液稀 释、精液保存运输、发情母羊鉴定、输精及档案记录 。 本文件适用于规模化养羊场 、养殖专业户、配种站点鲁西黑头羊的人工授精技术操作。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 DB37/T 3367 鲁西黑头羊 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 鲁西黑头羊 luxi black -head sheep 头颈背毛黑色，体躯背毛白色，头清秀，鼻梁隆起，耳大稍下垂，颈背部结合良好，公、母羊均无 角，瘦尾。胸宽深、背腰平直、后躯丰满、结构匀称，四肢较高且粗壮，蹄质坚实 ，全身呈桶装结构， 肉用体型明显。 4 种公羊选择与调教 4.1 种公羊选择 4.1.1 种公羊应符合DB37/T 3367要求，体型外貌、体重体尺、繁殖性能，综合评定 达到一级以上。 4.1.2 选择符合鲁西黑头羊种用标准，体质结实，结构匀称，生产性能高，生殖器官发育正常，有明 显鲁西黑头羊品种特征，精液品质良好、健康无病的公羊作为种 公羊。 4.2 种公羊调教 配种前30 d加强营养、进行调教训练，配种前 21 d开始采精 1次，前14 d每隔3 d采精1次，前7 d 每隔1 d采精1次。 4.3 公羊牵引 公羊牵到采精现场后，停留 3 min～5 min，再让其爬跨。 5 采精前准备 5.1 器械洗涤和消毒 DB 3715/T 39 —2023 2 5.1.1 采精前 人工授精所用器械（见附录 A） ：假阴道内胎、玻璃棒、温度计、金属镊子用 75%酒精棉球擦试消毒； 集精杯、输精器、稀释液、生理盐水、棉球、毛巾、纱布、保存运输精液用的玻璃容器高压蒸汽消毒， 消毒温度 115 ℃，时间 30 min。 5.1.2 输精时 当连续数只母羊输精时，输精器及开膣器在为每只母羊使用后，应经 75 %酒精棉球由前向后擦拭消 毒再为另一只母羊输精。 5.1.3 输精后 人工授精所用器械每次使用后，用洗涤剂洗刷干净。假阴道内胎、集精杯、输精器、保存运输精液 用的容器等接触精液的器械，彻底消毒后，再用经灭菌的稀释液冲洗 2次。开膣器洗涤干净消毒后，再 用灭菌生理盐水棉球冲洗 2次。假阴道内胎的油渍及输精器内残留的精液，均应彻底洗涤干净，最后再 经清水和蒸馏水各冲洗 1次并保持清洁、干燥，存放于清洁柜内。 5.2 假阴道准备 5.2.1 安装 检查所用内胎有无损坏和沙眼，完整无损者放入沸水浸泡 3 min～5 min，将内胎装入外壳，光面朝 内，两头等长，一端翻套在外壳上，依同法套好另一端。注意勿使内胎有扭转情 况，并使松紧适度，然 后两端分别套上橡皮圈固定。 5.2.2 调试 用漏斗将 50 ℃～55 ℃温水注入到假阴道夹层内，水量为外壳与内胎间容量的 1/2～1/3，用消毒玻 璃棒蘸取润滑剂，将假阴道内胎前 1/2段由外向内均匀涂抹一薄层，用经消毒的温度计检测假阴道内腔 温度，以达 39 ℃～42 ℃为宜，若过低、过高可用热水、冷水调节，向夹层内注入适量空气，使假阴道 内腔形成一定的压力，采精口端形成三角形，用长柄镊子夹上 75 %酒精消毒内胎，从内向外旋转，勿留 空白，停留 3 s～5 s，酒精挥发后，用生理盐水棉球擦拭，冲洗。 5.3 台羊准备 选择体格大小与公羊大小相 近的发情健康母羊作为台羊 。假母羊为台羊时， 应先经过训练，即先用 真母羊为台羊，适应采精后，再改用假母羊作台羊。 6 采精 6.1 采精方法 6.1.1 种公羊在采精之前，以湿毛巾将阴茎包皮周围擦拭干净。 6.1.2 采精人员蹲于台羊右侧，右手持假阴道与地面成 35 °～40 ° 角，紧靠于台羊尻部，当种公羊爬 跨于台羊背上并伸出阴茎时，立即敏捷地用左手指轻托阴茎包皮，将阴茎导入假阴道内。公羊射精后， 立即将假阴道竖起，排 出空气，取下集精杯，盖上集精杯盖，挂上公羊牌号送往精液处理室。 6.2 采精次数 DB 3715/T 39 —2023 3 种公羊宜采精 1次～2次/d，每周宜采 5 d，休息2 d。 7 精液品质检查 7.1 感官检查 种公羊射精量 1 mL～1.5 mL，精液乳白色，无味或略带腥味；带有腐败臭味，出现红色、褐色的精 液不应用于输精。 7.2 显微镜检查 7.2.1 检测周期 每隔7 d～14 d测定1次。 7.2.2 检查方法 用消毒过的干净玻璃棒取原精液或用生理盐水稀释过的精液 1滴，滴在干净的干燥载玻片上，盖上 干净的盖玻片，使盖玻片与载玻片之间充满精液，避免产生气泡，然后在显微镜下放大 300倍～600倍 进行观察，观察时盖玻片、载玻片、显微镜载物台的温度≥ 30 ℃，室温≥ 18 ℃。 7.2.3 精子活率 100 %的精子呈直线前进运动者评为 1.0；90 %的精子呈直线前进运动者评为 0.9，依此类推。 7.2.4 精子密度 显微镜视野内精子密集，精子间空隙小于 1个精子长度的精液定为“密”级；精子间空隙相当于 1 个精子的长度，能看到每个精子活动的定为“中”级；精子稀少，精子间空隙超过 1个精子长度的定为 “稀”级。 8 精液稀释 8.1 精液稀释液 配制 8.1.1 奶类稀释液 取健康母牛、母羊的新鲜奶， 92 ℃～95 ℃水浴消毒 15 min，温度降至 40 ℃ 以下，加入青霉素 100 000 U/100mL～200 000 U/100mL。 8.1.2 葡-柠-卵稀释液 葡萄糖3 g，柠檬酸钠 1.4 g，蒸馏水加至 100 mL后取上液 80 mL，加卵黄 20 mL，青霉素 100 000 U。 8.1.3 生理盐水 0.9 %氯化钠溶液。 8.2 精液稀释 8.2.1 稀释倍数根据精液密度、活率和选用的稀释液而定，每个输精剂 0.1 mL～0.2 mL，保持有效精 子数在20 000 000个以上。 DB 3715/T 39 —2023 4 8.2.2 调整稀释液的温度与原精液温度相同。先以 1:5作第一次稀释，放置 10 min后再稀释至原精液 的1倍～3倍，精液稀释后，进行精子活率评定，以检验稀释效果。 8.2.3 精液瓶作好标记，注明种公羊号、采精时间、精液量及其活率评定等级。 9 精液保存运输 9.1 采出的精液，经精液品质检查，精子活率≥ 0.8的精液，应迅速稀释、包装、降温。 9.2 运送精液的保温瓶放入冰块，精液温度保持在 2 ℃～5 ℃。精液瓶的温度应缓慢下降，并稳妥安 置于保温瓶内。 9.3 精液在运输过程中，严防剧烈振荡，尽可能缩短途中运输时间。 9.4 经运输和保存的精液，经精液品质检查，精子活率≥ 0.6的，方可用于输精。输精时从保温瓶中 取出，在室温下，温水中使精液温度升高至 18 ℃～25 ℃。 10 母羊发情鉴定 10.1 初配年龄 鲁西黑头羊适宜的初配年龄为 7月龄～8月龄。 10.2 母羊发情表现 10.2.1 鲁西黑头羊母羊每次发情持续时间一般为 26 h～30 h。发情周期平均为 18 d。 10.2.2 母羊发情时，兴奋不安，行为异常，尾巴频频摆动，对外界刺激反应敏感，食欲减退，外阴部 松驰、充血、肿胀、阴蒂勃起；阴道充血、松驰，分泌粘液，有交配欲，主动接近公羊，在公羊追逐或 爬跨时站立不动。发情终止时，拒绝公羊接近和爬跨。 10.3 试情 10.3.1 选择体格健壮无疫病，年龄 2岁～5岁的公羊做试情公羊，在腰部绑系试情布，将阴茎罩住， 或做输精管结扎或阴茎移除术。 10.3.2 试情公羊单圈喂养，除作试情外严禁和母羊在一起，试情公羊给予良好的饲养条件，未作手术 的种公羊 每隔5 d～6 d排精或本交一次。 10.3.3 试情公羊与