(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111521107.7 (22)申请日 2021.12.13 (71)申请人 河南省肿瘤医院 地址 450003 河南省郑州市金 水区东明路 127号 (72)发明人 刘文静　邱建阁　赵艳秋　江秉华　 (74)专利代理 机构 北京盛凡佳华专利代理事务 所(普通合伙) 11947 代理人 王艳 (51)Int.Cl. A61K 45/00(2006.01) C12Q 1/6886(2018.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种靶向miR-493/HIF-1α/PDK1制 备药耐 药性药物的应用 (57)摘要 本发明公开了一种靶向miR ‑493/HIF‑1α/ PDK1制备药耐药性药物的应用， miR ‑493、 HIF‑1 α和PDK1在制备治疗铬暴露导致的肺癌药物中 的应用， 包括miR ‑493、 HIF‑1α和PDK1在制备治 疗铬暴露导致的肺癌药物中的应用， 所述治疗铬 暴露导致的肺癌药物包含靶向miR ‑493、 HIF‑1α 和PDK1的药物、 载体和助剂， 所述逆转肿瘤多药 耐药性药物可制备成片剂、 颗粒、 胶囊或溶液形 态， 所述肿瘤耐药性检测包括以miR ‑493、 HIF‑1 α和PDK1为靶点或者以下游主要调控分子为靶 点的检测试剂或检测试剂盒， 本发 明通过体外和 体内实验， 从功能、 细胞、 蛋白等多个水平进行实 验， 证明靶向miR ‑493、 HIF‑1α和PDK1介导铬暴 露引起的肺癌的发生发展。 权利要求书1页 说明书4页 附图4页 CN 114177293 A 2022.03.15 CN 114177293 A 1.一种靶向miR ‑493/HIF‑1α/PDK1制备药耐药性药物的应用， 其特征在于， 包括miR ‑ 493、 HIF‑1α 和PDK1在制备治疗铬暴露导 致的肺癌药物中的应用。 2.根据权利要求1所述的一种靶向miR ‑493/HIF‑1α /PDK1制备药耐药性药物的应用， 其 特征在于， 所述治疗铬暴露导致的肺癌 药物包含靶向miR ‑493、 HIF‑1α和PDK1 的药物、 载体 和助剂。 3.根据权利要求2所述的一种靶向miR ‑493/HIF‑1α /PDK1制备药耐药性药物的应用， 其 特征在于， 所述逆转肿瘤多药耐药性药物可制备成片 剂、 颗粒、 胶囊或溶 液形态。 4.根据权利要求2所述的一种靶向miR ‑493/HIF‑1α /PDK1制备药耐药性药物的应用， 其 特征在于， 所述肿瘤耐药性检测包括以miR ‑493、 HIF‑1α和PDK1为靶点 或者以下游主要调控 分子为靶点的检测试剂或检测试剂盒。 5.根据权利要求2所述的一种靶向miR ‑493/HIF‑1α /PDK1制备药耐药性药物的应用， 其 特征在于， 所述载体优选自乳糖、 淀粉、 明胶、 羧甲基纤维素钠、 甲基纤维素、 聚乙烯吡咯烷 酮和水中的一种或两种以上。 6.根据权利要求2所述的一种靶向miR ‑493/HIF‑1α /PDK1制备药耐药性药物的应用， 其 特征在于， 所述助剂包括蹦解剂、 抗 黏剂、 润滑剂、 黏 合剂和助溶剂中的一种或两种以上。 7.根据权利要求6所述的一种靶向miR ‑493/HIF‑1α /PDK1制备药耐药性药物的应用， 其 特征在于， 所述崩解剂优选 淀粉或微晶纤维素。 8.根据权利要求6所述的一种靶向miR ‑493/HIF‑1α /PDK1制备药耐药性药物的应用， 其 特征在于， 所述 抗黏剂和润滑剂优选滑石粉、 胶体硅胶、 硬脂酸甘油酯、 硬脂酸钙或镁 粉。 9.根据权利要求6所述的一种靶向miR ‑493/HIF‑1α /PDK1制备药耐药性药物的应用， 其 特征在于， 所述助溶剂优选甲磺酸、 富马酸、 山梨醇单月桂酸酯、 单硬脂酸酯或单油酸酯。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114177293 A 2一种靶向miR ‑493/HIF‑1α/PDK1制备 药耐药性药物的应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物制药以及肿瘤耐药性检测应用技术领域， 具体涉及一种靶向miR ‑ 493/HIF‑1α /PDK1制备药耐药性药物的应用。 背景技术 [0002]铬广泛存在于自然界， 其存在的主要形式分别为三价铬和六价铬， 其中六价铬Cr (VI)具有毒性， Cr(V I)的产生大部 分源于工业生产， 如不锈钢生产、 焊接、 镀铬、 颜 料和染料 以及铬酸盐化合物等， 诱发的癌症有肺癌、 鼻癌和鼻窦癌等。 目前， Cr(VI)已被国际癌症研 究机构(IARC)确认 为I类致癌物。 Cr(VI)可通过等电和等结构阴离子转移 通道进入细胞， 在 细胞中Cr(VI)被还原成三价铬， 三价铬可与核酸和蛋白质形成稳定的络合物， 导致DNA损伤 且干扰DNA修复， 从而诱导癌症的发生。 相关研究报道， Cr(VI)致癌的机制包括Cr(VI)诱导 的氧化应激、 DNA损伤和调控表观遗传修饰等。 基于已有的Cr(VI)的致癌机制， 有研 究表明 Cr(VI)可通过调节关键信号通路、 microRNA失调、 组蛋白修饰和DNA甲基化等影 响癌症的发 生发展。 [0003]微小RNAs(micro RNAs、 miRNAs)是约为21 ‑22个核苷酸长的非编 码RNA家族， 通过与 靶基因的3 ’非翻译区(3 ’ ‑UTR)中的互补序列结合， 调控靶基因的转录。 miRNAs通过抑制靶 基因的表达进而调控肿瘤的发生发展。 研究表明， miR ‑143通过调节IL ‑6/HIF‑1α及其下游 信号通路抑制CrT细胞的增殖和血管生成， 即Cr(VI)能够导致miRNAs的失调从而调控细胞 的恶性转化。 以往研究中， miR ‑493的表达水平在肝癌、 大肠癌、 舌鳞癌、 肺癌及结直肠癌等 癌症中显著降低。 [0004]有研究表明丙酮酸脱氢激酶1(PDK1)在乳腺癌、 卵巢癌、 胶质瘤、 大肠癌和胃癌等 多种人类恶性肿瘤中的表达水平显著升高， 并调控肿瘤细胞的发生发展， 且是糖酵解过程 中的主要调控分子。 PDK1是PDK家族的一员， 是一种丝氨 酸/苏氨酸蛋白激酶， 是磷酸化和失 活丙酮酸脱氢酶(PDH)E1α 的主要成员。 PDK1抑制PDH  A1， 阻断丙酮酸生成乙酰辅酶A， 无法 进入TCA循环量， 而促使丙酮酸主要转化为乳酸。 缺氧诱导因子 ‑1α(HIF‑1α )是一种转录因 子， 在肿瘤的发生发展中起重要作用， 在多种肿瘤中显著高表达 。 [0005]我们的研究发现， 人肺支气管上皮细胞BEAS ‑2B(B2B)经Cr(VI)长期诱导后得到的 人肺支气管上皮恶性转化的细胞BEAS ‑Cr(CrT)， 其与B2B细胞相比， 丙酮酸脱氢酶激酶1 (PDK1)的表达水平显著升高。 CrT细胞中糖酵解水平较B2B细胞显著升高。 同时miR ‑493在 CrT细胞中较B2B细胞表达水平显著降低， 且miR ‑493的低表达介导了HIF ‑1α和PDK1的表达 水平升高。 本研究通过探究PDK1、 miR ‑493和HIF ‑1α 对CrT细胞的葡萄糖摄取、 乳酸产生、 细 胞增殖、 细胞迁移和克隆形成等生物学功能的影响， 为铬接触职业病的早期诊断和预防癌 变提供新思路。 发明内容 [0006]为解决上述技术问题， 本发明提供一种靶向miR ‑493/HIF‑1α/PDK1制备药耐药性说　明　书 1/4 页 3 CN 114177293 A 3