(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210891093.6 (22)申请日 2022.07.27 (71)申请人 海南师范大学 地址 571158 海南省海口市龙昆南路9 9号 (72)发明人 颜慧琼　陈秀琼　林强　文彦诗　 孙秀英　宫翠宇　李娟　王秋叶　 (74)专利代理 机构 浙江永航联科专利代理有限 公司 33304 专利代理师 侯兰玉 (51)Int.Cl. C08B 37/04(2006.01) C09K 11/06(2006.01) A61K 9/107(2006.01) A61K 31/704(2006.01) A61K 47/36(2006.01)A61K 49/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 海藻酸-g-香豆素衍生物的合 成及其制备负 载阿霉素的Pickeri ng乳液的方法 (57)摘要 本发明涉及一种海藻酸 ‑g‑香豆素衍生物的 合成及其制备负载阿霉素的Pickering乳 液的方 法。 本发明以疏水性荧光 分子7‑(二乙氨基)香豆 素‑3‑甲酸(DEAC)作为疏水改性剂， 采用水溶性 的碳二亚胺化学法， 通过胱胺二盐酸盐(构建二 硫键)将其连接到亲水性的低分子海藻酸钠 (LSA)骨架上， 合成一种新型的含发色基团的两 亲性海藻酸衍生物(LSA ‑SS‑DEAC)， 其在水溶液 中能够自组装形成具有还原响应性的聚合物胶 束， 并可以有效负载抗肿瘤药物阿霉素(DOX)。 权利要求书2页 说明书11页 附图6页 CN 115433291 A 2022.12.06 CN 115433291 A 1.一种海藻酸 ‑g‑香豆素衍生物(LSA ‑SS‑DEAC)的合成方法， 其特征在于该方法包括如 下步骤： S1、 海藻酸钠 ‑胱胺的合成： 用pH为6.4 ±0.2的MES缓冲液配制0.01～0.0 5g/ml的LSA溶 液， 加入EDC·HCl和NHS， 充分搅拌以活化LSA中的羧基， 然后加入胱胺二盐酸盐， 继续搅拌 反应24h以上， 将反应液装入MWCO  3500Da透析袋， 透析以去除残留的杂质， 冷冻干燥， 得到 中间产物海藻酸钠 ‑胱胺(LSA ‑CYS)； LSA糖醛酸单体与 EDC·HCl和NHS的摩尔比为1:(2～4):(2～4)， LSA糖醛酸单体和胱胺 二盐酸盐的摩尔比为1:1～3； S2、 7‑(二乙氨基)香豆素 ‑3‑甲酸(DEAC)的合成： 4‑(二乙氨基)水杨醛和米氏酸以摩尔比0.83～1.2： 1混合， 并加入适量无水乙醇， 在 70 ℃±10℃的温度下搅拌5h～6h， 析出大量固体， 抽滤， 用少量无水乙醇洗涤3～5次， 烘干， 得 到7‑(二乙氨基)香豆素 ‑3‑甲酸(DEAC ‑COOH)； S3、 海藻酸 ‑g‑香豆素衍 生物(LSA ‑SS‑DEAC)的合成： 将DEAC‑COOH溶解在少量DMF中， 依次加入EDC ·HCl和NHS， 室温搅拌充分以活化DEAC ‑ COOH中的羧基 基团， 备用， 其中DEAC ‑COOH与EDC·HCl和NHS的摩尔比为1:1:1； 将S1得到的LSA ‑CYS在溶剂中溶解， 剧烈搅拌下滴入上述活化好 的DEAC‑COOH溶液， 所 述LSA‑CYS糖醛酸单体与DEAC ‑COOH的摩尔比为1:1～5， 室温机械搅拌48h以上， 将反应液装 入MWCO 3500Da透析袋进行透析， 以除去小分子原料试剂和有机溶剂， 冷冻干燥， 得海藻酸 ‑ g‑香豆素衍 生物(LSA ‑SS‑DEAC)。 2.根据权利要求1所述的合成方法， 其特征在于： S1中所述的海藻酸盐质均分子量Mw≤ 80000， 其单体古洛糖醛酸(G)和甘露糖醛酸(M)的摩尔比G/ M≤1.0。 3.根据权利要求1所述的合成方法， 其特 征在于： S1中LSA的浓度为0.01～0.0 3g/mL。 4.根据权利 要求1所述的合成方法， 其特征在于： S3中， 溶剂是由DMF与水等体积混合而 成。 5.根据权利要求1所述的合成方法， 其特征在于： S3中， 透析方法是： 先用乙醇与水体积 比4:1的混合溶 液透析三天除去 小分子原料 试剂， 然后再用水透析三天除去 有机溶剂。 6.一种采用权利要求1所述的LSA ‑SS‑DEAC制备负载阿霉素的Pickering乳液的方法， 其特征在于该 方法包括如下步骤： ①负载阿霉素(DOX)LSA ‑SS‑DEAC胶束的制备： 有机溶剂存在下， 将三乙胺与DOX ·HCl以摩尔比2～3:1混合， 避光搅拌2～3h， 得到DOX 溶液； 将LSA‑SS‑DEAC制成LSA ‑SS‑DEAC的水溶液， 在100 ±100rpm的搅拌速度下缓慢滴入所 述的DOX溶液， 超声分散， 然后将该溶液置于MWCO  3500Da透析袋， 透析去除有机溶剂， 用 0.45 μm的微 孔滤膜过 滤除去未负载于胶束中的DOX， 得到LSA ‑SS‑DEAC载药胶束； ②以LSA‑SS‑DEAC载药胶束溶液为水相， 以醋酸乙酯为油相， 以3:7～5:5的油水体积比 将两者混合， 超声搅拌， 得到载 药LSA‑SS‑DEAC胶束稳定Pickeri ng乳液。 7.根据权利要求6所述的方法， 其特征在于： ①中的有机溶剂是DMSO， 所述DOX ·HCl预 先溶于DMSO中， DOX ·HCl的DMSO溶 液质量浓度为1.0～5.0mg/mL。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115433291 A 28.根据权利要求6所述的方法， 其特征在于： ①中， LSA‑SS‑DEAC的水溶液质量浓度为 1.0～5.0mg/mL。 9.根据权利 要求6所述的方法， 其特征在于： ②中， 所述LSA ‑SS‑DEAC载药胶束溶液浓度 为0.5～2.0mg/mL。 10.一种权利要求1所述的LSA ‑SS‑DEAC或权利要求6所述的负载阿霉素的Pickerin g乳 液在药物靶向递送及示踪方面的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115433291 A 3