(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210882466.3 (22)申请日 2022.07.26 (71)申请人 扬州大学 地址 225009 江苏省扬州市大 学南路88号 (72)发明人 王建斌　薛彤　陈丽　赵文佳　 董家辉　 (74)专利代理 机构 南京苏高专利商标事务所 (普通合伙) 32204 专利代理师 王艳 (51)Int.Cl. A61K 31/19(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 对映-贝壳杉烷型二萜化合物DKA在制备抗 肿瘤转移药物或抑制剂中的应用 (57)摘要 本发明公开了对映 ‑贝壳杉烷型二萜化合物 DKA在制备抗肿瘤侵袭转移药物或抑制剂中的应 用， 本发明从豨莶草中分离得到对映 ‑贝壳杉烷 型二萜化合物DKA， 并通过transwell试验、 划痕 试验、 小鼠乳腺癌肺转移等试验证实得到的对 映‑贝壳杉烷型二萜化合物DKA没有细胞毒活性， 可显著抑制细胞迁移， 可以显著抑制MDA ‑MB‑231 乳腺癌细胞肺转移。 具有显著的抗肿瘤转移作 用， 可以用于制备抗肿瘤侵袭转移的药物或抑制 剂。 权利要求书1页 说明书6页 附图4页 CN 115282135 A 2022.11.04 CN 115282135 A 1.对映‑贝壳杉烷型二萜化 合物DKA在制备抗肿瘤侵 袭转移药物中的应用。 2.对映‑贝壳杉烷型二萜化 合物DKA在制备抗肿瘤侵 袭转移抑制剂中的应用。 3.根据权利要求1或2所述的应用， 其特 征在于， 所述肿瘤为乳腺肿瘤。 4.根据权利要求1或2所述的应用， 其特征在于， 所述对映 ‑贝壳杉烷型二萜化合物DKA 的制备方法包括如下步骤： (1)将豨莶草 地上干燥部分用乙醇回流 提取多次， 过 滤， 收集滤 液； (2)将滤液减压浓 缩， 得到稠浸膏； (3)将稠浸膏分散到水中， 搅拌均匀， 然后用乙酸乙酯萃取多次， 合并乙酸乙酯溶液， 将 乙酸乙酯溶 液减压浓 缩， 得乙酸乙酯部位浸膏； (4)将乙酸乙酯部位浸膏进行硅胶柱层析， 氯仿 ‑甲醇系统洗脱， 收集氯仿甲醇洗脱部 位， 再进行硅胶柱层析， 石油醚 ‑乙酸乙酯系统洗脱， 洗脱15 ‑20个柱体积 至有白色粉末或结 晶析出， 收集该部分洗脱液， 将洗脱液浓缩至有大量白色粉末析出， 过滤， 石油醚—乙酸乙 酯冲洗， 即得对映 ‑贝壳杉烷型二萜化 合物DKA纯化物。 5.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 步骤(1)中， 所述的多次为3次以上， 每次 1.5h。 6.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 步骤(2)中， 将滤液减压浓缩至密度为 1.15‑1.20g/ml， 无明显乙醇气味。 7.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 步骤(3)中， 稠浸膏与水的质量比为1:20， 用乙酸乙酯萃取时乙酸乙酯与水 液的体积比为1.5 ‑2:1， 萃取三次以上。 8.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 步骤(4)中， 氯仿甲醇洗脱部位进行硅胶柱 层析时使用氯仿 ‑甲醇系统洗脱， 氯仿与甲醇的体积比为3 0:1～10:1。 9.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 步骤(4)中， 氯仿甲醇洗脱部位即氯仿与甲 醇的体积比为3 0:1时收集得到的液体。 10.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 步骤(4)中， 将氯仿甲醇洗脱部位进行硅 胶柱层析时使用石油醚 ‑乙酸乙酯系统洗脱， 石油醚 ‑乙酸乙酯体积比为6:1， 冲洗白色粉末 时用体积比为6:1～10:1石油醚 ‑乙酸乙酯系统冲洗 。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115282135 A 2对映‑贝壳杉烷型二萜化合物DKA在制备抗肿瘤转移药物或抑 制剂中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及对映 ‑贝壳杉烷型二萜化合物DKA在制 备抗肿瘤转移药物或抑制剂中 的应用， 属于生物制药技 术领域。 背景技术 [0002]乳腺癌是全世界女性最常见的恶性肿瘤之一， 严重威胁着女性的健康。 乳腺癌转 移是导致其临床失败的主要原因。 早期乳腺癌(I期和II期)的治疗过程一般是先进行肿瘤 切除手术， 然后再进行化疗或放疗， 对多数乳腺癌患可以达到治愈目的。 然而， 化疗药物蒽 环霉素类药物有很强的心脏毒性， 比如 会引发心肌病和心源性晕厥。 流行病学研究显示， 蒽 环霉素类药物 化疗结束10‑20年后， 有50％的乳 腺癌患者 发生心脏病变， 40％的患者会 出现 心律不齐， 5％的患者出现心力衰竭。 此外， 乳腺癌转移或晚期患者在蒽环霉素类药物化疗 结束10年的生存率仅为22％。 目前临床 应用的药物无法从根本上控制疾病的发生、 发展， 特 别是激素类药物， 更 因它们广泛的副作用而难于坚持长期用药。 因此， 从临床 应用广泛的传 统中药中寻找疗效好、 副作用少的先导化合物是抗乳腺癌肿瘤转移药物开发的一条重要途 径。 [0003]豨莶为菊科(Asteraceae)豨莶属(Siegesbeckia)一年生草本植物。 《中国药典》 2015年版收载菊科植物豨莶(Siegesbeckia  orientalis  L.)、 腺梗豨莶(Siegesbeckia   pubescens M.)和毛梗 豨莶(Siegesbeckia  glabresc ent M.)3种植物的干燥地上部位作为 中药豨莶入药。 现代药 理实验表明豨莶草提取物具有抗炎、 抗过敏、 抗血栓、 抗肿瘤、 抗组胺 释放的等活性， 并且二萜是豨莶草的主要活性 成分。 对映 ‑16,17‑二羟基贝壳杉烷 ‑19‑羧酸 (Ent‑16β,17‑dihydroxy ‑kauran‑19‑oic acid(DKA))系从豨莶草中分离得到的二萜类化 合物， 药理活性研究表明其具有较好的抗血栓活性， 目前此化合物应用较窄， 急需开 发其在 其他领域中的新用途。 发明内容 [0004]发明目的： 针对现有技术中存在的技术问题， 本发明的目的是提供对映 ‑贝壳杉烷 型二萜化合物DKA(对映 ‑16β,17‑二羟基贝壳杉烷 ‑19‑羧酸)在制备抗肿瘤侵袭转移药物或 者抑制剂中的用途。 [0005]技术方案： 本发明所述对映 ‑贝壳杉烷型二萜化合物DKA在制备抗肿瘤侵袭转移药 物中的应用。 [0006]本发明还包括对映 ‑贝壳杉烷型二萜化合物DKA在制备抗肿瘤侵袭转移抑制剂中 的应用。 [0007]其中， 所述肿瘤为乳腺肿瘤。 [0008]其中， 所述对映 ‑贝壳杉烷型二萜化 合物DKA的制备 方法包括如下步骤： [0009](1)将豨莶草 地上干燥部分用乙醇回流 提取多次， 过 滤， 收集滤 液；说　明　书 1/6 页 3 CN 115282135 A 3