(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202211051392.5 (22)申请日 2022.08.31 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 115120573 A (43)申请公布日 2022.09.30 (73)专利权人 上海浙江大 学高等研究院 地址 201203 上海市浦东 新区丹桂 路799号 国创中心三期5号楼 (72)发明人 周如鸿　张连学　 (74)专利代理 机构 杭州求是专利事务所有限公 司 33200 专利代理师 万尾甜　韩介梅 (51)Int.Cl. A61K 9/51(2006.01) A61K 31/704(2006.01)A61K 47/55(2017.01) A61K 47/61(2017.01) A61K 47/42(2017.01) A61P 35/00(2006.01) A61K 31/502(2006.01) 审查员 张影 (54)发明名称 含肼屈嗪的高效抗肿瘤纳米载药体系及其 制备方法 (57)摘要 本发明公开了一种含肼屈嗪的高效抗肿瘤 纳米载药体系 （H ‑NPs） ， 所述载药体系是以通过 ππ键结合后的肼屈嗪与阿霉素作为疏水核心， 以葡聚糖作为亲水外壳。 本发明的含肼屈嗪的高 效抗肿瘤纳米载药体系可通过扩张肿瘤血管和 调节TME， 从而增加肿瘤部位的血管通透性、 血液 灌注、 改善纳米颗粒在肿瘤内的富集和渗透、 减 少肿瘤乏氧， 增加肿瘤对化疗药物阿霉素的敏 感 度， 显著提高其 抗肿瘤效果。 权利要求书1页 说明书7页 附图5页 CN 115120573 B 2022.12.20 CN 115120573 B 1.一种含肼屈嗪的高效抗肿瘤纳米载药体系， 其特征在于， 所述载药体系是Dex ‑hyd‑ DOX/cRGD与肼屈 嗪共同组装成以阿霉素和肼屈嗪为疏水核心的H ‑NPs纳米粒子； 所述的 Dex‑hyd‑DOX/cRGD为具有pH响应性和靶向肿瘤的cRGD多肽葡聚糖 ‑阿霉素前药。 2.如权利要求1所述的含肼屈嗪的高效抗肿瘤纳米载药体系的制备方法， 其特征在于， 具体步骤如下： 1） 制备Dex ‑hyd‑DOX/cRGD： 首先， 制备具有叠氮端基的阿霉素， 然后通过click点击化学法将具有叠氮端基的阿霉 素和cRGD与炔基修饰的葡聚糖反应形成Dex ‑hyd‑DOX/cRGD； 2） 制备载药体系 将Dex‑hyd‑DOX/cRGD和HDZ溶解在超纯水中， 然后使用间断超声法， 边超声边搅拌， 直 至溶液变成红褐色， 停止超声； 继续搅拌直至得到红色溶液， 然后用透析袋MWCO  : 3500 Da 透析24‑30 h， 即得到所述含肼屈嗪 的高效抗肿瘤 纳米载药体系。 3.根据权利要求2所述的含肼屈嗪的高效抗肿瘤纳米载药体系的制备方法， 其特征在 于， 步骤1） 中， 所述具有叠氮端基的阿霉素、 cRGD与炔基修饰的葡聚糖的摩尔比为2.51  ： 1  ： 4.58。 4.根据权利要求2所述的含肼屈嗪的高效抗肿瘤纳米载药体系的制备方法， 其特征在 于， 步骤2） 中， 所述的Dex ‑hyd‑DOX/cRGD与HDZ的质量比为10 ‑13.3： 1。 5.根据权利要求2所述的含肼屈嗪的高效抗肿瘤纳米载药体系的制备方法， 其特征在 于， 步骤2） 中， 所述的间断超声法中， 超声的参数具体为： 超声电压为120  V， 超声频率为20   KHz， 每间隔5秒超声20秒。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115120573 B 2含肼屈嗪的高 效抗肿瘤纳米载药 体系及其制备方 法 技术领域 [0001]本发明属于生物医用材料技术领域， 特别涉及一种pH响应性和靶向肿瘤的含肼屈 嗪的高效抗肿瘤 纳米载药体系。 背景技术 [0002]据 《2017中国肿瘤登记年报》 报道癌症已成为我国居民的第一致死病因。 目前， 各 种新型肿瘤治疗手段虽已兴起很多年， 但基于小分子药物 （阿霉素、 喜树碱等） 的化疗仍然 是临床上治疗肿瘤的主要手段。 这些小分子药物都存在着水溶性或结构稳定性差、 药代动 力学和生物分布不理想等问题， 造成有效药物在肿瘤组织的富集浓度低， 同时大部分药物 分布到患者健康组织器官中并对其造成严重的毒副作用， 这降低了患者的生存质量和免疫 能力， 从而限制了药物的临床使用剂量、 治疗的连续性， 最 终导致了化疗对患者总体上毒副 作用太大、 无法达 到预期的治疗效果的现状。 [0003]纳米粒子递送药物系统为癌症治疗带来了巨大的希望。 由于肿瘤部位增强的通透 性和滞留效应 （EPR） ， 基于纳米粒子递送药物的化疗可以大大延长药物分子在人体的血液 循环时间， 从而增强纳米粒子在肿瘤部位的滞 留和富集， 另外纳米粒子很难从致密的正常 毛细血管中渗出， 减少 了药物在正常组织中的分布， 并大大降低了化疗药物脱靶造成的全 身毒性。 与传统小分子化疗药物相比， 这些优势可以减少药物带给患者的副作用， 提高癌症 患者的药物耐受剂量。 例如， 盐酸 阿霉素脂质体 ‑DOXIL降低了阿霉素在患者心脏中的富集 从而避免了阿霉素对心脏产生的致命毒性。 近年来， 盐酸阿霉素脂质体 ‑DOXIL、 紫杉醇 ‑白 蛋白纳米粒ABRAXA NE等纳米制剂已在临床 应用， 另有很多个高分子纳米药物 正处在临床试 验的各个阶段。 但是与游离原药相比， 临床研究结果表明目前临床应用的纳米药物大部分 仅仅能够降低药物带给患者的毒副作用， 仅有为数不多的纳米粒子递送药物系统表现出很 好治疗肿瘤效果。 这也导致许多纳米药物在临床试验中最 终的失败。 因此， 进一步设计和制 备出提高治疗肿瘤效果的纳米药物是目前 药物输送领域亟 待解决的问题。 [0004]通过进一步的临床研究发现， 其主要原因是： 肿瘤靶向纳米药物的体内输送过程 是一个从血液循环系统（Circulation） 向肿瘤组织内蓄积 （Accumulation）、 渗透 （Penetration） 、 细胞内吞 （Internalization） 、 胞内药物释放 （Release） 的五步" CAPIR级 联"过程。 每步 都有高的效率是纳米药物获得高的治疗肿瘤疗效的关键。 国内外学者在长循 环C、 提高细胞内吞 I与胞内释放 R 等方面做了大量工作， 但纳米药物在肿瘤部位的富集 A和 肿瘤组织内的渗透 P仍是瓶颈。 这是 因为： 1） 曲折的脉管系统是肿瘤微环 境 （TME） 的特点， 是 纳米颗粒递送的主要障碍。 肿瘤部位 曲折的脉管系统使肿瘤部位血管变得狭窄， 血流量减 少， 减少了纳米颗粒在肿 瘤部位的富集。 2） 此外， 升高的间质液压力 （IFP） 和异常 的细胞外 基质 （ECM） 形成了第二道物理屏障。 因为纳米药物的尺寸在几个纳米至100多纳米之间， 扩 散速率与尺寸成反比， 所以这种 大尺寸的纳米药物的扩散能力远远小于小分子， 进一步削 弱了纳米颗粒在肿瘤部位的渗透， 导致纳米颗粒仅在肿瘤脉管系统周围区域积累。 因此， 纳 米颗粒通常无法到达远离血管系统的深层肿瘤细胞。 3） 肿瘤中间质细胞、 细胞间质基质和说　明　书 1/7 页 3 CN 115120573 B 3