(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211205473.6 (22)申请日 2022.09.29 (71)申请人 北京大学 地址 100191 北京市海淀区学院路38号北 京大学医学部 申请人 哈药(北京)生物科技有限公司 (72)发明人 杨振军　潘宇飞　管静　 (74)专利代理 机构 北京科龙寰宇知识产权代理 有限责任公司 1 1139 专利代理师 马鑫 (51)Int.Cl. A61K 47/54(2017.01) A61K 31/7105(2006.01) C07H 21/02(2006.01) C07H 1/00(2006.01)A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 反义核酸糖基缀合物及其制备方法和在肝 癌治疗中的应用 (57)摘要 本发明公开了反义核酸糖基缀合物及其制 备方法和在肝癌治疗中的应用。 所述的反义核酸 糖基缀合物是由糖分子通过连接臂缀合于反义 核酸5′末端共价偶联而成。 体外药效显示各缀合 物的抗肿瘤细胞增殖活性及靶基因沉默活性与 非缀合反义核酸链相当， 个别缀合物活性稍优。 同时， 经缀合后药物 摄取率提升。 体内实验证明， 缀合物显示出更高的肝癌抑制活性， 其中Glu ‑ CT102MOE5效果最为显著。 此外， 本发明还优选出 了与CT102相同靶标但是体内外活性更优的反义 核酸PHN02和PHN07， 经进一步化学修饰后， PHN02MOE5的抗肿瘤能力与CT102MOE5相当。 本发明 的提出为抗肝癌反义核酸药物在临床的广泛应 用奠定了基础， 同时在基因治疗 领域也将具有广 泛的应用前 景。 权利要求书3页 说明书26页 附图11页 CN 115487308 A 2022.12.20 CN 115487308 A 1.一种反义核酸糖基缀合物， 其特征在于， 所述的反义核酸糖基缀合物是由糖分子通 过连接臂缀 合于反义核酸5 ′末端共价偶联而成； 其中， 所述的糖分子为乙酰氨基半乳糖(Gal)， 乙酰氨基葡萄(Glu)或甘露糖(Man)； 其中， 所述的连接臂的结构如下L1、 L2、 L3、 L 4或L5所示； 其中， 所述连接臂左端与糖分子连接， 右端与反义核酸5 ′端羟基连接 。 2.如权利要求1所述的反义核酸糖基缀合物， 其特征在于， 当所述的糖分子为乙酰氨基 半乳糖时， 连接臂的结构如L1， L2， L3， L4或L5所示， 当所述的糖分子为乙酰氨基葡萄时， 连 接臂的结构如L2， L4或L5所示， 当所述的糖分子为甘露糖时， 连接臂的结构如L2， L4或L5所 示。 3.如权利要求1所述的反义核酸糖基缀合物， 其特征在于， 其中的反义核酸选自 以下序 列： CT102： TsCsCs  TsCsCs GsGsAs GsCsCs AsGsAs CsTsTs CsA CT102MOE5： TesmCesmCesTesmCesmCSGSGSASGSmCSmCSASGSASmCesTesTesmCesAe； PHN01： GsAsGs CsCsAsGsAsCsTsTsCs  AsTsTsCsCsTsTsT PHN02： GsAsGs AsAsAsCsAs Gs GsAsGsCsCsCsCsCsAsCsA PHN02MOE5： GesAesGesAesAesAsmCsAsGsGsAsGsmCsmCsmCsmCesmCesAesmCesAe PHN03： CsCsGsGsAsGsCsCsAsGsAsCsTsTsCs  AsTsTsCsC PHN04： TsTsCsTsCsCsAsCsTsCs GsTsCsGsGsCsCsAsGsA PHN05： GsTsTsCsCsCs GsCsAsGsTsGs GsCsCsGsCsGsGsG PHN06： GsCsTsGsCsTsGsAsTsAsGsTsCsGsTsTsGsCsGsG PHN07： TsCsCsCsTs GsGsAsCsAsCsAs GsGsTsCsCsCsCsA 其中：mC表示5‑甲基胞嘧啶修饰(5mC)； s表示磷硫代修饰(PS)； e表示2 ′ ‑O‑MOE修饰(2 ′ ‑权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 115487308 A 2O‑MOE)； 结构分别如下 所示： 4.如权利要求3所示的反义核酸糖基缀合物， 其特征在于， 所述的反义核酸糖缀合物选 自以下化 合物： 5.如权利要求4所述的反义核酸糖基缀合物， 其特征在于， 还包括在所述的反义核酸糖 基缀合物的反义核酸的3 ′端进一步缀合荧光标记分子 。 6.如权利要求5所述的反义核酸糖基缀合物， 其特征在于， 所述的反义核酸糖基缀合物 的结构如下 所示：权　利　要　求　书 2/3 页 3 CN 115487308 A 3