(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211183312.1 (22)申请日 2022.09.27 (71)申请人 广西师范大学 地址 541004 广西壮 族自治区桂林市七 星 区育才路15号 (72)发明人 沈星灿　张淑平　刘兴月　陈华　 (74)专利代理 机构 桂林市华杰 专利商标事务所 有限责任公司 451 12 专利代理师 杨雪梅 (51)Int.Cl. C07D 409/14(2006.01) C09K 11/06(2006.01) A61K 41/00(2020.01) A61K 49/00(2006.01) A61K 49/22(2006.01)A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种双比率型荧光/光声探针及其制备方法 和应用 (57)摘要 本发明公开了一种双比率型荧光/光声探针 及其制备方法和应用， 探针结构为下述式( Ⅱ)所 示。 本发明提供的双比率型荧光探针是一类新型 的单分子， 具有在光热治疗时实现对肿瘤部位缺 氧水平的精 准量化， 作为治疗与预后评估一体化 探针在肿瘤的精准治疗具有广泛的应用前景； 本 发明荧光探针合成步骤简单、 纯化方便， 并且产 率较高。 (Ⅱ)。 权利要求书2页 说明书8页 附图11页 CN 115521300 A 2022.12.27 CN 115521300 A 1.一种双比率型荧 光/光声探针， 其特 征在于， 所述探针的结构为下述式( Ⅱ)所示： (Ⅱ) 式(Ⅱ)中， R1为下述S1～S5结构式 中的一种，  ； R2为C1‒C20烷基、 取代烷基中的一种； 所述C1‒C20烷基为包括甲基、 乙基、 丙基、 丁基、 戊基、 异丙基、 叔丁基在内的C1 ‒C20烷 基基团； 取代烷基为包括氨基、 羧基、 叠氮取代甲基、 乙基、 丙基、 丁基、 戊基、 异丙基、 叔丁基末 端碳上的氢在内的C1 ‒C20烷基衍 生物基团。 2.权利要求1所述的双比率型荧光/光声探针的制备方法， 其特征在于， 所述探针的合 成路线如下： (Ⅰ) (Ⅰ)                                  (Ⅱ) 所述探针的制备 方法， 包括以下步骤： （1） 将含有R1， R2基团的花菁染料与3 ‑羟基苯硫酚分别溶解于N,N ‑二甲基甲酰胺中， 溶 解后混合均匀， 在混合液中加入 氢化钠， 在氮气保护和40℃条件 下搅拌反应6 ‑10小时， 得到权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115521300 A 2的粗产品； （2） 将得到的粗产品用洗脱剂洗脱， 再用硅胶层析柱进行纯化， 得到含有R1， R2基团的荧 光染料， 具有式( Ⅰ)所示结构； （3） 取步骤 （2） 具有式( Ⅰ)所示结构的荧光染料溶于N,N ‑二甲基甲酰胺中， 随后加入2 ‑ 溴甲基‑5‑硝基呋喃和碳 酸钾， 在氮气保护和40℃条件下搅拌 反应12‑18小时； （4） 搅拌反应完毕后， 将反应液倒入冰水中混合， 用乙酸乙酯萃取， 无水硫酸钠干燥， 用 旋转蒸发仪浓缩， 洗脱剂 洗脱， 再用硅胶层析柱进 行纯化， 得到具有式( Ⅱ)所示结构的双比 率型荧光/光声探针。 3.根据权利要求2所述的双比率型荧 光/光声探针的制备 方法， 其特 征在于： 步骤 （1） 所述含有R1， R2基团的花菁染料与3 ‑羟基苯硫酚的物质的量比例 是1 : 1， 与 氢化钠的物质的量比例为1  : 2。 4.根据权利要求2所述的双比率型荧 光/光声探针的制备 方法， 其特 征在于： 步骤 （2） 所述粗产品用体积比为50:1的二 氯甲烷与甲醇为洗脱剂洗脱， 用200 ‒300目硅 胶层析柱进行 纯化。 5.根据权利要求2所述的双比率型荧 光/光声探针的制备 方法， 其特 征在于： 步骤 （3） 所述荧光染料与2 ‑溴甲基‑5‑硝基呋喃的物质的量比例 是1 : 1， 与碳酸钾的 物质的量比例为1  : 1。 6.根据权利要求2所述的双比率型荧 光/光声探针的制备 方法， 其特 征在于： 步骤 （4） 所述洗脱剂是采用体积比为50:1的二 氯甲烷与甲醇为洗脱剂洗脱， 用200 ‒300 目硅胶层析柱进行 纯化。 7.权利要求1所述的双比率型荧光/光声探针的应用， 其特征在于， 所述探针应用于非 疾病诊断与治疗目的 的细胞内缺氧程度变化的检测。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115521300 A 3