(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210899681.4 (22)申请日 2022.07.28 (71)申请人 西安交通大 学 地址 710049 陕西省西安市咸宁西路28号 (72)发明人 郭增军　曹珍　张新新　祝上钧　 薛兆玮　张钰　 (74)专利代理 机构 西安通大专利代理有限责任 公司 6120 0 专利代理师 范巍 (51)Int.Cl. C07D 491/056(2006.01) C07J 73/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映 异构体生物碱的方法和应用 (57)摘要 本发明公开了一种从拐枣七中提取分离苯 并菲啶类对映异构体生物碱的方法和应用， 该方 法是将拐枣七原料经过回流提取、 浓缩、 分离、 纯 化 ，得 到 6 R ‑c a r b o x y m e t h y l ‑ dihydrochelerythrine和6S ‑carboxymethyl ‑ dihydroch elerythrine， 该方法从拐枣七中成功 提取分离 出一对苯并菲啶类对映异构体生物碱， 本方法操作简单、 提取率和纯度均较高， 实现了 结构相似度大、 难分离的一类化合物的分离， 尤 其是消旋体的拆 分， 进一步丰富了对拐枣七中异 喹啉类物质基础的认识， 本方法提取分离得到的 6S‑carboxymethyl ‑dihydrochel erythrine具有 一定的体外抑制MCF ‑7乳腺癌细胞增殖的作用， 为后续开发新型抗乳腺癌药物或先导化合物提 供了实验依据。 权利要求书2页 说明书6页 附图4页 CN 115093426 A 2022.09.23 CN 115093426 A 1.一种从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映异构体生物碱的方法， 其特征在于， 包括 以下步骤： 1)取粉碎后的拐枣七药材， 采用80％乙醇 ‑水体系回流提取， 得到总浸膏， 加水进行混 悬处理， 得到混悬 液； 2)调节混悬液的pH值至2， 采用二 氯甲烷萃取若干次， 合并萃取液后蒸干， 得到pH值为2 的二氯甲烷部位和酸 性提取液部位； 3)将pH值为2的二氯甲烷部位采用干法上样， 常压色谱柱进行分离， 以石油 醚‑乙酸乙 酯体系为洗脱剂进行梯度洗脱， TLC检测， 合并收集相同馏分， 得到含有目标组分的馏分A， 浓缩干燥， 得到浸膏A； 4)将步骤3)得到的浸膏A采用正相硅胶色谱柱进行分离， 以二氯甲烷 ‑甲醇体系为洗脱 剂进行梯度洗脱， TLC检测， 合并收集相同馏分， 得到含有目标组分的馏分B， 浓缩干燥， 得到 浸膏B； 5)将步骤4)得到 的浸膏B， 以石油醚 ‑乙酸乙酯体系进行梯度洗脱， TLC检测， 合并收集 相同馏分， 得到含有目标组分的馏分C， 浓 缩干燥， 得到浸膏C； 6)将步骤5)得到的浸膏C经半制备型HPLC进行分离， 得到一个外消旋的苯并菲啶类生 物碱； 7)将步骤6)得到的外消旋的苯并菲啶类生物碱采用HPLC进行手性色谱拆分处理， 获得 一对对映异构体， 分别为6R ‑carboxymet hyl‑dihydroch elerythrine和6S ‑carboxymethyl ‑ dihydroc helerythri ne。 2.根据权利要求1所述的从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映异构体生物碱的方法， 其特征在于， 步骤1)中， 回流 提取次数为3次， 每次3小时。 3.根据权利要求1所述的从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映异构体生物碱的方法， 其特征在于， 步骤2)中， 采用10％盐酸溶 液调节悬 液的pH值。 4.根据权利要求1所述的从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映异构体生物碱的方法， 其特征在于， 步骤3)中， 干 法上样是将pH值为2的二氯甲烷部位用100～200目柱层析硅胶拌 样后上样； 常压色谱柱进行分离时， 石油醚与乙酸乙酯按照(12:1)～(0:1)的体积比进行梯 度洗脱。 5.根据权利要求1所述的从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映异构体生物碱的方法， 其特征在于， 步骤4)中， 色谱柱分离时， 二氯甲烷和甲醇按照(20:1)～(0:1)的体积比进行 梯度洗脱。 6.根据权利要求1所述的从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映异构体生物碱的方法， 其特征在于， 步骤5)中， 色谱柱分离时， 石油醚和乙酸乙酯按照(8:1)～(0:1)的体积比进行 梯度洗脱。 7.根据权利要求1所述的从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映异构体生物碱的方法， 其特征在于， 步骤6)中， 半制备 型HPLC分离的色谱条件为： 色谱柱： Welc h Xtimate C18， 10×250mm， 5 μm； 洗脱液： 流动相采用5 0％甲醇‑水加0.5％的氨水， 流速为： 2mL/mi n， 等度洗脱。 8.根据权利要求1所述的从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映异构体生物碱的方法， 其特征在于， 步骤7)中， 采用HPLC进行手性色谱拆分处 理的色谱条件为：权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115093426 A 2色谱柱： IC， 4.6×250mm， 5 μm； 洗脱液： 正己烷： 异丙醇＝80:20， 流速： 0.8mL/mi n， 等度洗脱。 9.采用权利要求1～8中任意一项所述的从拐枣七中提取分离苯并菲啶类对映异构体 生物碱的方法分离得到的苯并菲啶类生物碱， 其特征在于， 其构型为S型， 命名为6S ‑ carboxymethyl ‑dihydroc helerythri ne， 结构式如下： 10.权利要求9所述的苯并菲啶类生物碱在制备抗乳腺癌药物中的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115093426 A 3