ICS 65.020.01 CCS B 20 15 内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 2795—2022 饲用燕麦干草营养测定技术规程 The code of practice on nutrient determination of forage oat hay 2022-08-30 发布 2022-09-30 实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发 布 DB15/T 2795—2022 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由内蒙古自治区农牧业科学院提出。 本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC 19）归口。 本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、伊金霍洛旗文兵农业机械服务企业。 本文件主要起草人：孙海洲、金鹿、张崇志、李胜利、桑丹、张春华、珊丹、宝华、杨鼎、萨初拉、 刘威、胡晓晓、姚继红、王永荣、刘要仙、刘和平、王泽平、敖特更达赖、梁海霞。 I DB15/T 2795—2022 饲用燕麦干草营养测定技术规程 1 范围 本文件规定了饲用燕麦（Avena sativa L.）干草营养测定技术的术语和定义、样品采集与制备、 测定指标及方法等要求。 本文件适用于饲用燕麦干草。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6432 饲料中粗蛋白的测定 凯氏定氮法 GB/T 6435 饲料中水分的测定 GB/T 6438 饲料中粗灰分的测定 GB/T 14699.1 饲料 采样 GB/T 20195 动物饲料 试样的制备 NY/T 1459 饲料中酸性洗涤纤维的测定 DB15/T 1164 饲草中中性洗涤纤维瘤胃液体外30小时降解率的测定 DB15/T 1165 饲用玉米及青贮玉米淀粉瘤胃液体外 7小时降解率的测定 DB15/T 1583 牧草中aNDFom的测定 DB15/T 1612 饲草质量评价 AOAC 996.11 谷物中淀粉含量的测定 淀粉葡萄糖苷酶/α-淀粉酶法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 燕麦干草 oat hay 以燕麦草为原料，适时刈割后，经干燥含水量小于等于14%的散状或打捆后成型的饲草产品。 中性洗涤纤维体外降解率 the degradability of neutral detergent fiber in vitro 饲料在利用瘤胃液进行体外培养时中性洗涤纤维的降解量占原料中中性洗涤纤维含量的百分比。 1 DB15/T 2795—2022 淀粉体外降解率 the degradability of starch in vitro 饲料利用瘤胃液进行体外培养时，淀粉的降解量占原料中淀粉含量的百分比。 Jones 指数 jones index 样品中，中性洗涤纤维瘤胃液体外30 h降解率与淀粉的百分含量之和与中性洗涤纤维瘤胃液体外 30h未降解率的比值。 比例因子 partitioning factor 样品利用瘤胃液进行体外发酵24 h后的有机物质降解率与产气量的比值。 4 样品采集与制备 采样 按GB/T 14699.1规定的方法对饲用燕麦干草（灌浆期）进行采样。 制备 样品按照GB/T 20195制备，置于烘箱内于65 ℃烘干至恒重，研磨，过1 mm筛后保存备用。 5 测定指标及方法 感观检验 饲用燕麦干草按照DB15/T 1612规定的方法进行测定。 营养成分指标检验 5.2.1 水分 按照GB/T 6435规定的方法进行测定。 5.2.2 粗蛋白质 按照GB/T 6432规定的方法进行测定。 5.2.3 中性洗涤纤维 按照DB15/T 1583规定的方法进行测定。 5.2.4 酸性洗涤纤维 按照NY/T 1459规定的方法进行测定。 5.2.5 粗灰分 2 DB15/T 2795—2022 按照GB/T 6438规定的方法进行测定。 5.2.6 淀粉 按照AOAC 996.11规定的方法进行测定。 体外发酵特性 5.3.1 中性洗涤纤维瘤胃液体外 30 h 降解率 按照DB15/T 1164规定的方法进行测定。 5.3.2 淀粉瘤胃液体外 7 h 降解率 按照DB15/T 1165规定的方法进行测定。 Jones 指数 Jones指数按式（1）计算： ………………………………………………（1） 式中： R —— Jones指数； W1 —— 样品中性洗涤纤维瘤胃液体外30 h降解率，单位为百分比（%）； W2 —— 样品中淀粉的含量，单位为百分比（%）； W3 —— 样品中性洗涤纤维瘤胃液体外30 h未降解率，单位为百分比（%）。 比例因子 5.5.1 操作步骤 操作步骤参见附录A。 5.5.2 计算 试样中有机物质的降解率按式（2）计算： （W4 − W5 ) − (W6 − W7 ) Y= 100 W4 − W5 …………………………………………（2） 式中： Y —— 试样中 24 h 后的有机物质的降解率，单位毫克每克（mg/g）； W4 —— 原样和坩埚的重量，单位克（g）； W5 —— 原样灰化后和坩埚的重量，单位克（g）； W6 —— 残渣烘干后和坩埚的重量，单位克（g）； W7 —— 烘干的残渣灰化后和坩埚的重量，单位克（g）。 试样中比例因子按式（3）计算： Z= Y X ………………………………………………（3） 3 DB15/T 2795—2022 式中： Z —— 代表试样中比例因子，单位毫克每毫升（mg/mL）； Y —— 试样中有机物质的降解率，单位毫克每克（mg/g）； X —— 体外发酵24 h后的产气量，单位毫升每克（mL/g）。 能值估测 5.6.1 估测模型 瘤胃真可消化非纤维性碳水化合物（tdNFC）、真可消化粗蛋白（tdCP）、真可消化中性洗涤纤维 （tdNDF）、真可消化脂肪酸（tdFA）、维持水平消化能（DE1X）、生产水平（采食量维持水平的3倍时） 代谢能（MEp）使用NRC（2001）奶牛估测模型来估测；维持净能（NEm）和增重净能（NEg）使用NRC（1996） 肉牛估测模型进行估测。 5.6.2 计算 维持水平消化能按式（5）计算： ……………………（5） 式中： DE1X —— 维持水平消化能，单位为兆卡每千克（ Mcal/kg） ； tdNFC —— 真可消化非纤维性碳水化合物； tdNDF —— 真可消化中性洗涤纤维； tdCP —— 真可消化粗蛋白； FA —— 真可消化脂肪酸。 生产水平代谢能按式（6）计算： ……………………………………………………（6） 式中： MEP —— 生产水平代谢能，单位为兆卡每千克（Mcal/kg）； DE1X —— 维持水平消化能，单位为兆卡每千克（Mcal/kg）。 维持净能按式（7）计算： ……………………………（7） 式中： NEM —— 维持净能，单位兆卡每千克（Mcal/kg）； ME —— 代谢能，单位兆卡每千克（Mcal/kg）。 增重净能按式（8）计算： ……………………………（8） 式中： NEg —— 增重净能，单位为兆卡每千克（Mcal/kg）； ME —— 代谢能，单位为兆卡每千克（Mcal/kg）。 4 DB15/T 2795—2022 A A 附 录 A （资料性） 比例因子测定操作步骤 A.1 瘤胃液的制备 在晨饲前经瘤胃瘘管利用瘤胃液取样器采集供试羊（牛）的瘤胃液100 mL～200 mL，直接转入预热 至 39 ℃的保温容器中，混合均匀后经4层纱布过滤，滤液持续通入CO2气体，然后量取20 mL～30 mL瘤 胃上清液于39 ℃保温容器备用。 A.2 培养液制备 A.2.1 矿物质溶液1：二水氯化钙13.2 g、四水氯化锰10.0 g、六水氯化钴1.0 g、六水三氯化铁8.0 g，用蒸馏水溶解，冷却后，定容至100 mL。 A.2.2 矿物质溶液2：磷酸氢二钠5.7 g、磷酸二氢钾6.2 g、七水硫酸镁0.6 g用蒸馏水溶解后,定容至 1000 mL。 A.2.3 缓冲溶液：碳酸氢钠35.0 g、碳酸氢铵4.0 g，用蒸馏水溶解，冷却后，定容至1000 mL。 A.2.4 刃天青溶液：用蒸馏水溶解100 mg刃天青，冷却，定容至100 mL。 A.2.5 还原剂溶液：准确量取2.0 mL的1 mol的氢氧化钠溶液、312.5 mg九水硫化钠；加入47.5 mL蒸 馏水即可。需在培养的当天配置。 A.2.6 缓冲溶液的配制：将矿物质溶液1 0.12 mL、缓冲溶液237.00 mL、矿物质溶液2 237.00 mL 以 及1.22 mL刃天青溶液加入到474.00 mL蒸馏水中，温热到39 ℃后，加入还原剂溶液。 A.2.7 人工瘤胃培养液配制：将20 mL瘤胃上清液与40 mL缓冲溶液混合,得到混合人工瘤胃培养液。 A.3 体外产气量的测定 将0.4000 g待测样品干物质置于ANKOM RFS产气测量系统的产气瓶中，用60 mL人工瘤胃培养液消 化。每个培养设3个重复，通过无线传输连接多个容器，仪器自动检测并在电子表格中记录气压信息。 同一批次培养中设定空白组，即为无发酵底物，仅有瘤胃液和培养液，作为产气量校正。 A.4 有机物质降解率的测定 体外发酵24 h产气试验结束后，将产气瓶于冰上冷却，将内容物转移到离心管中，3500转离心15 min，弃上清液，将残渣转移到坩埚中，105 ℃烘干至恒重，然后放到550 ℃的马福炉中灼烧4 h后，称 重，直至恒重。 5