ICS 65.020.30 B 44 吉 DB22 林 省 地 方 标 准 DB 22/T 2738—2017 梅花鹿细管冻精人工授精技术规程 Technical specification of sika deer artificial insemination with frozen straw semem 2017 - 12 - 04 发布 吉林省质量技术监督局 2018 - 01 - 30 实施 发 布 DB22/T 2738—2017 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由吉林省畜牧业管理局提出并归口。 本标准起草单位：中国农业科学院特产研究所。 本标准主要起草人：赵伟刚、魏海军、许保增、崔学哲、曹新燕、常彤、薛海龙、张宇飞、杨镒峰、 陈秀敏、赵蒙、鞠妍。 I DB22/T 2738—2017 梅花鹿细管冻精人工授精技术规程 1 范围 本标准规定了梅花鹿人工授精过程中输精准备、输精和档案管理。 本标准适用于梅花鹿繁殖育种。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 LY/T 1167 畜禽场环境质量及卫生控制规范 DB 22/T 2599 梅花鹿精液采集及冷冻技术规程 DB 22/T 2611 梅花鹿冷冻精液 3 3.1 输精准备 输精场地 输精场地应符合 LY/T 1167 的规定。 3.2 药品与器械 根据输精方法准备相应的药品与器械，参见附录 A 。 3.3 器具清洗和消毒 器具清洗和消毒方法见附录 B 。 3.4 冷冻精液 冷冻精液的贮存、运输、解冻与检查应按 DB22/T 2599 和DB22/T 2611 规定执行。 3.5 细管安装 将细管冻精解冻，安装入专用输精枪内。 3.6 操作人员准备 操作人员应剪短磨光指甲，手臂消毒并戴长臂手套。 3.7 母鹿准备 对待输精母鹿进行保定，术部进行消毒。 4 输精 1 DB22/T 2738—2017 4.1 输精适机 4.1.1 4.1.2 4.2 自然发情时，母鹿接受试情公鹿爬跨转为拒爬后输精。 同期发情时，在阴道栓取出后 48 h～56 h 输精，亦可结合试情情况输精。 输精方法 4.2.1 直肠把握法 4.2.1.1 直肠把握输精法主要适用于盆腔内径围度在 20 cm 以上梅花鹿。 4.2.1.2 母鹿置于操作台上，输精人员一手从肛门伸进直肠，扶持子宫颈，另一手持输精枪，由阴道 口斜向与背部呈 450 缓缓插入，当枪头部位进入后，再将输精枪后端抬起呈平行状态插入，通过双手相 互配合，在输精枪头通过子宫颈后注入精液。 4.2.2 开膣器输精法 母鹿置于操作台上，将开膣器外端涂上润滑剂，徐徐插入阴道，使前端紧靠子宫颈口处，借助光源， 找到子宫颈口。将输精枪插入子宫颈内，进行子宫颈深部或子宫体输精。 4.2.3 腹腔镜输精法 母鹿仰卧置于手术架上，术部备皮消毒。将手术架前低后高成 45°～60° 角，用连接二氧化碳减压 阀供气管的穿刺针在乳头前 10 cm、腹中线一侧 2 cm～3 cm 处避开可见血管进行腹腔穿刺后注入适量 二氧化碳，抽出穿刺针，通过穿刺管放入腹腔镜，打开冷光源，观察两侧卵巢卵泡和子宫角发育情况。 在穿刺孔的另一侧距腹中线 2 cm～3 cm 处进行相同的腹腔穿刺操作，通过穿刺管将专用输精枪插入腹 腔，将精液输到有成熟卵泡发育一侧的子宫角大弯处。 5 档案管理 5.1.1 5.1.2 2 做好母鹿配种记录，配种记录表参见附录 C。 档案应长期保存备查。 DB22/T 2738—2017 AA 附 录 A （资料性附录） 人工输精器材药品 人工输精器材药品见表A.1。 表A.1 品 名 人工输精器材药品表 规格 数量 品名 规格 数量 腹腔镜系统 套 1 止血钳 把 2 蒸汽消毒锅 台 1 弯头剪 把 2 4 孔数显衡温水浴锅 台 1 平头剪 把 2 干燥箱 台 1 医用酒精杯 个 2 广口保温瓶 台 1 酒精灯 台 2 640 倍生物显微镜 台 1 医用凡士林 瓶 1 盖玻片、载玻片 片 适量 瓷盘 20×30 ㎝ 个 1 擦镜纸 本 1 有盖瓷盘 个 2 30 立升液氮罐 个 2 100℃水温计 支 3 细管镊子 把 2 一次性塑料手套 支 适量 细管剪 把 1 乳胶手套 包 适量 金属输精枪 把 3 试情布 个 若干 鹿用开膣器 个 2 冷冻精液 支 1 支/头 电动推子 把 1 消毒脱脂棉花 磅 1 注射药用长杆或吹管 套 1 消毒脱脂纱布 磅 1 化学保定药物 套 1 手术衣、洞巾 套 5 手术刀片、刀柄 套 适量 缝合针、缝合线 套 适量 夹卵钳 把 1 注射器 支 适量 创巾夹 把 8 操作台 台 1 持针器 把 2 手术架 台 1 注：其它常用必备物品有蒸溜水、75%酒精、2%碘酊、新洁尔灭、戊二醛、青霉素、药匙、桌椅、 标签、毛巾、肥皂、洗衣粉、手电筒、指甲刀、笔、记录本、工作服、纸巾、生理盐水等。 3 DB22/T 2738—2017 BB 附 录 B （规范性附录） 器具清洗与消毒 B.1 器具清洗 B.1.1 器具使用后应立即浸入水中，流水冲洗。粘有污垢或斑点应立即洗刷掉，然后再用洗涤液清洗。 B.1.2 新的玻璃器皿用清水洗净后，放入洗液中浸泡 24 h ，流水冲洗掉洗液，再用洗涤液认真刷洗， 或用超声波洗涤器洗涤。洗涤液可用市售品。具体操作如下： a) 从洗涤液中取出后立即放入流水中完全冲掉洗涤液； b) 用去离子水冲洗 5 次，再用蒸馏水洗 5 次，最后用双蒸水冲洗 2 次； c) 冼净后的器具放入干燥箱烘干，再用白纸或牛皮纸包装待消毒。 B.2 器具消毒 B.2.1 高压灭菌 适用于玻璃器具、金属制品、耐压耐热的塑料制品、以及可用高压蒸汽灭菌的溶液、液体石蜡油等。 上述器具经包装后放入高压灭菌器中，在 120 ℃处理 20 min～30 min 。 B.2.2 气体灭菌法 对于不能用高压蒸汽灭菌处理的塑料器具，可用环氧乙烯等气体灭菌。灭菌方法与要求可根据不同 设备说明进行操作。气体灭菌过的器具需放置一定时间才能使用。 B.2.3 干热灭菌法 对耐高温的玻璃及金属器具，包装好后放入干热灭菌箱（干烤箱），160 ℃ 处理 1 h～1.5 h 。 B.2.4 紫外线灭菌 塑料制品可放置在无菌间距紫外线灯 50 cm～80 cm 处，器皿内侧向上。塑料细管需垂直于紫外线 灯下照射 30 min 以上。 B.2.5 钴同位素照射灭菌 将需要灭菌的器具包装好，送有关单位处理。 B.2.6 70%酒精浸泡消毒 聚乙烯管以及乳胶管等，冼净后可在70%酒精液浸泡消毒。 4 DB22/T 2738—2017 CC 附 录 C （规范性附录） 母鹿输精产仔记录 母鹿输精产仔记录见表C.1。 表C.1 母鹿号 母鹿输精产仔记录表 年龄 时间 品种 名称 剂量 药物注射 试情鹿 时间 表现症状 责任人 发情 鉴定 输精 公鹿 精液 精液 时间 耳号 类别 编号 怀孕期 性别 输精量 精子 输精 活力 方法 耳号 初生重 责任人 人工 输精 产仔 预产期 产仔 时间 品种 记录员 记录 备 注 _________________________________ 5