ICS 65.150 B 51 备案号： 吉 DB22 林 省 地 方 标 准 DB 22/T 2707—2017 圆型臂尾轮虫工厂化高密度培养技术规范 Technical regulations for high density culture of Brachionus rotundiformis Tschugunoff 2017 - 11 - 10 发布 吉林省质量技术监督局 2017 - 12 - 30 实施 发 布 DB22/T 2707—2017 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由吉林省水利厅提出并归口。 本标准起草单位：吉林农业大学。 本标准主要起草人：张东鸣、陈玉珂、王秋举、蔺丽丽、刘洪健、郭志欣。 I DB22/T 2707—2017 圆型臂尾轮虫工厂化高密度培养技术规范 1 范围 本标准规定了圆型臂尾轮虫（Brachionus rotundiformis Tschugunoff）（以下均称为轮虫）人工 海水培养的环境、设备及水，室内培养，采收和注意事项。 本标准适用于轮虫的人工海水工厂化高密度培养。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 3 GB 11607 渔业水质标准 NY 5052 无公害食品 海水养殖用水水质 环境、设备及水 3.1 环境 动力设施齐全，保暖防寒。 3.2 设备 塑料桶、水族箱、玻璃钢桶、水泥池等，方便进水和排水。单个容积控制在1 m³～2 m³。 3.3 水 应符合GB 11607规定。 4 室内培养 4.1 消毒 设备未注水之前用10 mg/L～20 mg/L高锰酸钾浸泡20 min～30 min，消毒后用大量清水充分清洗， 保证设备内壁无高锰酸钾残留。 4.2 配置培养用水 4.2.1 要求 培养用水水质按表1水质标准要求。其他应符合NY 5052的规定。 1 DB22/T 2707—2017 表1 4.2.2 水质标准 项目 指标 最适盐度 20 最适 pH 7.8～8.5 最适温度 25℃～30℃ 无机氮 ≤ 0.20 mg/L 非离子氨 ≤ 0.02 mg/L 氨氮 ≤ 0.02 mg/L 亚硝酸盐 ≤ 0.02 mg/L 方法 用符合本标准3.3的水加入适量海水晶，煮沸消毒，配成所需盐度的人工海水；将配置的海水经400 目（网径0.55 μm）筛绢过滤后再充分曝气24 h（或用硫代硫酸钠除去残氯），备用。 4.3 保种 4.3.1 容器 用10 L容器进行保种培养。 4.3.2 条件 盐度为20，溶解氧﹥6 mg/L，自然光照，培养温度为25℃～30℃，培养时保持连续充气。 4.3.3 管理 6 每天投饵2次酵母溶液，投喂量为8×10 cells/mL。保种期间要杜绝其它浮游生物和化学药品的污 染。 4.4 接种 4.4.1 密度 40个每毫升～50个每毫升。 4.4.2 投喂 4.4.2.1 将高活性干酵母（水产养殖专用）与人工配置海水按 1：100 比例混合，再将混合液用搅拌机 充分搅拌（转速为 3500 r/min，搅拌时间为 1 min），制成酵母溶液。 6 4.4.2.2 采用血球计数板在显微镜下计算酵母溶液中单个酵母细胞浓度，按照 8×10 cells/mL 投喂量 投喂。每天投喂 2 次。 4.5 温度控制 最适生长温度为25℃～30℃。 4.6 充气 采用纳米技术连续充气。充气量0.6 L/min。 2 DB22/T 2707—2017 4.7 水质调节 采用虹吸方法去除残留酵母和排泄物。定时监测水质，及时补加预先过滤消毒的人工海水。 4.8 监测生长状况 4.8.1 采用解剖镜准确检测培养轮虫的活力、种群密度、怀卵量、雌雄比例等生长情况。 4.8.2 每天分别从培养容器的上、中、下层分多次随机取样 1000 ml，混匀后准确取 1 mL，用鲁哥试 剂固定后在解剖镜下计算轮虫的种群密度和怀卵数量，计数 3 次，取平均值。 5 采收 5.1 条件 经6 d～7 d培养，种群密度达到每毫升300个时，即可收获。 5.2 方法 用400目筛绢过滤采收。 5.3 收获量的控制 5.3.1 批量培养 一次性彻底采收轮虫。 5.3.2 连续培养 少量多次，每日收获的轮虫不能超过一半。 5.4 清除杂物 经过40目～60目筛绢网过滤，以清除夹杂在轮虫中的大型敌害生物和杂质。 6 注意事项 严格控制酵母投喂量。若在培养初期出现纤毛虫大量繁殖，应当舍弃，重新培养。 _________________________________ 3