(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111453445.1 (22)申请日 2021.12.02 (71)申请人 复旦大学 地址 200433 上海市杨 浦区邯郸路2 20号 (72)发明人 李瑶　鲁亚莉　孔哲　 (74)专利代理 机构 上海正旦专利代理有限公司 31200 代理人 陆飞　陆尤 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12Q 1/6851(2018.01) A61K 45/00(2006.01) A61K 31/7088(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 AP006284.1作为前列腺癌分子靶标的应用 (57)摘要 本发明属于生物技术领域， 具体为一种 AP006284.1作为前列腺癌分子靶标的应用。 经研 究发现， AP006284.1在前列腺癌组织中的含 量高 于前列腺正 常组织中的含 量， 表明AP006284.1与 前列腺癌的肿瘤发生、 发展密切相关。 因此本发 明提供AP006284.1作为与前列腺癌相 关的新的 前列腺癌分子靶 标， 用于制备前列腺癌高危人群 筛选、 诊断、 治疗及状况监测、 预后监测的试剂 盒。 本发明还包括该前列腺癌分子靶 标的抑制剂 在制备预防、 缓解和/或治疗前列腺癌的药物中 的应用。 使用本发明诊断试剂盒诊断前列腺癌， 操作简单、 取材方便、 安全无创伤， 且具有较高的 特异性和灵敏度， 易于进行 大量筛查。 权利要求书1页 说明书7页 序列表3页 附图3页 CN 114182016 A 2022.03.15 CN 114182016 A 1.AP006284.1前列腺癌分子靶标作为标志物在制备前列腺癌高危人群筛选、 诊断或预 后监测的试剂盒中的应用， 所述AP0 06284.1的核苷酸序列为SEQ  ID NO.1所示。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 是通过检测被试者血清、 尿液和 组织样本 中AP006284.1 的含量， 并与正常样本中AP006284.1含量相比较， 以进行前列 腺癌高危人群 筛选、 诊断及预后监测。 3.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 是将被试者血清、 尿液和组织样本中 AP006284.1的含量 通过总RNA提取、 反转录、 定量PCR进行检测。 4.根据权利要求1 ‑3之一所述的应用， 其特 征在于， 所述试剂盒包括： （1） 组织样本、 血 液和尿液中总RNA提取 试剂； （2） 反转录试剂； （3） 定量PCR试剂； （4） 所用对照为β ‑ACTIN， 其引物序列如下： β‑ACTIN上游引物序列： 5＇ ‑  CCTCTCCCAAGTCCACACAG  ‑3＇ β‑ACTIN下游引物序列： 5＇ ‑  GGGCACGAAGGCTCATCAT T  ‑3＇ ； （5） 用于检测前列腺癌分子靶标AP0 06284.1的引物序列： 上游引物序列： 5＇ ‑CAGGCGTCACCACTTACTCACA  ‑3＇ 下游引物序列： 5＇ ‑  GGACACCACATCACAG GCAAA  ‑3＇ 。 5.AP006284.1作为前列腺癌分子靶标在筛选预防、 缓解和/或治疗前列腺癌的药物中 应用。 6.AP006284.1前列腺癌分子靶标的抑制剂在制备缓解和/或治疗前列腺癌的药物中的 应用； 所述AP0 06284.1的核苷酸序列为SEQ  ID NO.1所示。 7.根据权利要求6所述的应用， 所述药物包括AP0 06284.1的siRNA。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114182016 A 2AP006284.1作 为前列腺癌分子靶标的应用 技术领域 [0001]本发明属于生物技 术领域， 具体涉及一种前列腺癌分子靶标AP0 06284.1的应用。 背景技术 [0002]液体活检技术， 根据 《ASCO年度报告： 20 15临床肿瘤学进展》 中相关 内容， 被列为肿 瘤治疗领域下一个十年趋势之一。 血液中的一些分子标志物已经被应用于一些疾病的诊 断， 如谷丙转氨酶用于肝炎的诊断， 白细胞数目用于判断炎症。 血液循环肿瘤DNA (circulating  tumor DNA， ctDNA)是一种无细胞状态的胞外游离DNA， 存在于血液、 滑膜液 和脑脊液等体液中， 体细胞DNA经脱落 或者当细胞凋亡后 释放进入循环系统， 其主要 是由短 的单链或双链DNA以及单链与双链DNA的混合物组成， 以DNA蛋白质复合物或游离DNA两种形 式存在。 ctDNA来自肿瘤细胞的体细胞突变， 因此， ctDNA是一种特征性的新的肿瘤生物标记 物， 并且还可以被定性、 定量和追踪， 将成为临床肿瘤的早期诊断、 预后判定及跟踪随访等 提供一系列方便、 快捷、 特异、 无创或微创和分子生物学检测手段， 尤其对于一些不具有典 型临床症状、 检查无特异性和诊断困难的肿瘤可避免复杂的、 具有创伤性的活检。 结合新一 代测序技 术(NGS)将变成 “液体活检 ”， 并替代侵入组织 性活检。 [0003]AP006284.1属于lncRNA （long  non‑coding RNA， 长链非编码RNA） ， 是一类转录本 长度超过200个碱基并且不编码蛋白的RNA。 近年来， lncRNA的功能在很多生物过程的作用 被发现： 它参与细胞分化、 调控细胞对抗逆境的反应、 影响胚胎干细胞多能化等多样的生物 过程。 在肿瘤研究领域， lncRNA对于各种细胞表型 （增殖、 凋亡、 细胞周期、 侵袭转移 等） 的影 响都提示其在癌症中具有特异性调控功能。 目前己有较多lncRNA被证实在包括乳腺癌、 前 列腺、 黑色素瘤、 肝癌、 结肠癌、 膀胱癌等在内的人类多种肿瘤中存在差异表达并执行重要 的调控功能。 早期有效检测肿瘤的发生、 发展及提高抗癌药物的疗效对于癌症的治疗尤为 重要， 发现新型肿瘤标志 物作为诊断与治疗的靶点 一直是肿瘤研究的热点。 [0004]前列腺癌 （Prostate  cancer, PCa） 是一种常见的男性生殖系统恶性肿瘤。 2020 年， 世界范围内， 前列腺癌发病率在男性恶性肿瘤中位居第二， 致死率排在第五。 在中 国， 随 着社会的发展和人们生活方式的改变， 前列腺癌 发病率近年来呈现持续上升趋势， 前列腺 癌发病率在男性恶性肿瘤中排在第六， 而死亡率位居第九。 另外， 前列腺癌在年龄大于60岁 的男性中发病率显著升高。 近50年来， 雄激素剥夺疗法成为前列腺癌的主要治疗手段。 然 而， 大多数前列腺癌在接受雄激素剥夺治疗18到24个月后对雄激素的依赖性逐渐减弱， 最 终发展为雄激素非依赖性肿瘤。 此时即使接受治疗， 绝大多数患者将发展为去势抵抗性前 列腺癌， 病变已达晚期， 预后极差 。 [0005]前列腺癌的临床诊断方式目前主要有直肠指检、 血清前列腺特异性抗原 （PSA） 检 测、 直肠超声波检测、 活组织病理检查等。 直肠指 检是最简单、 最经济实用的方法， 主要通过 医生的食指触摸前列腺， 用以发现很多无症状的前列腺癌患者， 有可能获得早期诊断及根 治的机会。 但以上的方法都存在局限性。 例如直肠指 检的局限性主要在4个方面： （1） 患者前 列腺肿块不大时， 易漏诊； （2） 部 分患者前列腺癌肿大不明显， 但已属于晚期， 不易根治； （3）说　明　书 1/7 页 3 CN 114182016 A 3