(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202111051973.4 (22)申请日 2021.09.08 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 113797175 A (43)申请公布日 2021.12.17 (73)专利权人 齐鲁工业大学 地址 250300 山东省济南市长清区大 学路 3501号 (72)发明人 高美香　王其才　肖加奇　 (74)专利代理 机构 济南竹森知识产权代理事务 所(普通合伙) 37270 专利代理师 朱家富　邱燕燕 (51)Int.Cl. A61K 9/51(2006.01) A61K 47/30(2006.01)A61K 47/22(2006.01) A61K 31/704(2006.01) A61K 31/352(2006.01) A61P 39/06(2006.01) A61P 35/00(2006.01) B82Y 5/00(2011.01) B82Y 40/00(2011.01) (56)对比文件 US 6544581 B1,20 03.04.08 审查员 白雪 (54)发明名称 一种葡萄籽木质素纳米颗粒及其制备方法 与在载药中应用 (57)摘要 本发明公开一种葡萄籽木质素纳米颗粒， 所 述纳米颗 粒为从葡萄籽中提取的木质素为原料； 所述纳米颗粒为中空结构， 平均粒径为200～ 500nm， 比表面积为200～600g/m2， 所述纳米颗粒 中含有原花青素， 原花青素的负载量为0.5％～ 2％(质量分数)。 本发明原料应用酿酒下脚料葡 萄籽， 在整个木质素的溶出与纳米颗粒的制备过 程中， 所用溶剂均为乙醇， 使得部分原花青素溶 解到溶液中且被纳米微球吸附。 原花青素的存在 不仅使得木质素纳米颗粒载体利用具有清除自 由基的作用， 进 一步促进药物的抗癌效果。 而且， 原花青素还对木质素纳米颗粒的粒径均匀度、 比 表面积、 药物负载料等 性能具有提高作用。 权利要求书1页 说明书5页 附图2页 CN 113797175 B 2022.12.16 CN 113797175 B 1.一种葡萄籽木质素纳米颗粒， 其特征在于， 所述纳米颗粒为中空结构， 平均粒径为 200~500 nm， 比表面积为200~600g/m2， 所述纳米颗粒中含有原花青素， 原花青素的负载量 为0.5%~2% （质量分数） ； 所述纳米颗粒的制备 方法包括以下步骤： （1） 将葡萄籽进行清洗、 干燥、 粉碎后得葡萄籽粉末， 加入乙醇 ‑水溶剂及浓酸， 于一定 温度下浸渍反应； 葡萄籽的粉粹粒径为40~60 μm； 浓酸与葡萄籽粉末的体积/质量比为1： 5~ 20ml/g； 所述浓酸为浓硫酸或者浓盐酸； 葡萄籽粉末与乙醇 ‑水溶剂的料液比为1:20~40g/ ml； 所述乙醇/水的体积比为7： 3~2； 所述温度为5 0~80℃， 所述反应时间为3~5小时； （2） 反应结束后过 滤反应物， 将滤 液用水稀释5~20倍， 于透析袋中透析24~48h； （3） 冷冻干燥得葡萄籽纳米微球。 2.根据权利要求1所述的纳米颗粒， 其特征在于， 平均粒径为300~450 nm； 原花青素的 负载量为1.0%~1.5%。 3.根据权利要求1所述的纳米颗粒， 其特 征在于， 步骤 （1） 中， 所述干燥温度为5 5~65℃。 4.根据权利要求1所述的纳米颗粒， 其特征在于， 步骤 （1） 中， 所述葡萄籽为酒厂废弃葡 萄籽。 5.根据权利要求1所述的纳米颗粒， 其特 征在于， 步骤 （1） 中所述温度为6 0~70℃。 6.根据权利要求1所述的纳米颗粒， 其特征在于， 步骤 （2） 中透析袋的分子量是7000~ 8000； 稀释10倍。 7.根据权利要求1所述的纳米颗粒， 其特征在于， 步骤 （3） 中所述冷冻干燥的条件是： 氮 气14~16Pa、‑45~‑55℃， 8~12h。 8.一种载药葡萄籽木质素纳米颗粒， 其特征在于， 权利要求1~7任一项所述纳米颗粒负 载盐酸阿霉素 （DOX） ， 所述DOX的负载量 为0.4~0.8 mg/g。 9.权利要求8所述纳米颗粒的制备方法， 其特征在于， 将DOX溶解在去离子水中与木质 素纳米颗粒孵育， DOX与木质素纳米颗粒的质量比为1:10； 然后在pH为7.4的PBS缓冲溶液中 透析， 将DOX脱盐酸 化， 吸附于微球上， 并通过清洗除去未吸附的阿霉素。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 113797175 B 2一种葡萄籽木质素纳米颗粒 及其制备方 法与在载药中应用 技术领域 [0001]本发明属于生物质纳 米材料领域， 涉及一种葡萄籽木质素纳米颗粒及 其制备方法 与在载药中应用。 背景技术 [0002]盐酸阿霉素(DOX)是一种广泛应用的抗肿瘤活性抗生素， 但由于该药物不能直接 深入肿瘤组织且对心脏等器官具有很强的毒副作用， 导致其治疗效果有限。 中空纳米或微 米球具有较低的密度、 较高比表面积和较好的表 面渗透性能。 当用于药物输送时， 相比密实 结构的实心球， 空心球拥有较高的载药率。 作为药物的承载体， 纳米粒子一般通过渗透率和 滞留效应增 加药物的溶解度， 扩展循环时间， 增强肿瘤对药物的吸 收。 [0003]现有载药纳 米微球材料有海藻酸钠 ‑壳聚糖纳米微球、 姜黄素纳米微球、 蛋白纳 米 微球、 聚合物纳米微球以及碳纳米微球等， 但是， 上述材料均存在着制备方法相对复杂， 载 药方面比较局限， 在制备过程中应用一些化学试剂， 可能有部 分残留等不 足。 中国专利文献 CN 111956618  A(202010897326.4)公开一种木质素基抗肿瘤药物载体的制备方法和应用， 可有效解决木质素基药物载体制备过程复杂， 效率低， 载药量和包封率过低， 不具有pH响应 特性， 不能靶向释放药物， 不适用于包载抗肿瘤药物的问题。 但是， 该专利使用了多种有机 溶剂， 制备方法复杂， 且易有残留。 中国专利文献CN  108409984  A(201810250553.0)公开了 一种快速同步制备木质素纳米颗粒和碳量子点的方法， 具体步骤如下： 将废弃生物质加入 酸溶液中， 微波处理后固液分离获得 处理液； 对处理液离心分离， 所得下层沉淀为木质素纳 米颗粒， 所得上层清液为氮掺杂碳量子点溶液， 所述酸溶液中的溶剂为包含乙醇的混合溶 剂。 但是， 该制备方法仅仅将溶解的木质素通过微波处理溶出小颗粒的木质素， 非球形结 构、 也非中空结构、 颗粒 大小不够均一， 不可应用于载 药方面。 [0004]中国专利文献CN107774204  A(2016107334 13.X)提供一种中空开口木质素纳米球 及其制备方法。 步骤为： 第一步， 将适量的木质素原料(酶解木质素、 碱木质素、 高沸醇木质 素、 木质素磺酸盐中的任一种)加入到有机溶剂(四氢呋喃、 二氧六环、 二甲基甲酰胺中的任 一种)中溶解。 第二步， 在适当的搅拌速度下， 将去离子水以适量的速度滴加到有机溶液中， 或将溶有木质素 的有机溶液以适量的速度滴加到去离子水中， 中空开口纳米球缓慢形成。 第三步， 将悬浮液转移到透析袋中进行透析， 除去残余有机溶剂。 第四步， 将透析后的悬浮 液进行冷冻干燥， 最终得到中空开口木质素纳米球的粒径为50～600nm。 但是， 该专利制备 的纳米球颗粒粒径分布不均， 且由于溶剂不 易挥发导 致残留， 不 适用于药物载体。 发明内容 [0005]本发明为了解决木质素纳米颗粒载体中溶剂残留以及、 药物负载率不高的问题， 提供一种葡萄籽 木质素纳米颗粒， 及其制备 方法与在载 药中应用。 [0006]为了实现上述目的， 本发明采用以下技 术方案： [0007]一种葡萄籽木质素纳米颗粒， 其特征在于， 所述纳米颗粒为从葡萄籽中提取的木说　明　书 1/5 页 3 CN 113797175 B 3