ICS 65.020.01 B 30 DB41 河 南 省 地 方 标 准 DB41/T 1810—2019 曲茎石斛培养基播种育苗技术规程 2019 - 03 - 19 发布 河南省市场监督管理局 2019 - 06 - 19 实施 发 布 DB41/T 1810—2019 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语和定义 ........................................................................ 1 4 制种 .............................................................................. 1 5 培养基配方 ........................................................................ 2 6 培养基播种育苗 .................................................................... 3 7 炼苗与移栽 ........................................................................ 3 8 种苗出床分级 ...................................................................... 5 附录 A（资料性附录） 曲茎石斛播种培养基配方 .......................................... 7 附录 B（规范性附录） 曲茎石斛瓶苗分级 ................................................ 8 附录 C（资料性附录） 曲茎石斛病害防治方法 ............................................ 9 附录 D（资料性附录） 曲茎石斛虫害防治方法 ........................................... 10 附录 E（规范性附录） 曲茎石斛出床种苗分级 ........................................... 12 I DB41/T 1810—2019 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由河南省林业局提出并归口。 本标准起草单位：国有南阳市黄石庵林场、河南伏牛山国家级自然保护区黄石庵管理局。 本标准主要起草人: 高立献、贾赛、张天鹏、高萨娜、王冰、裴新苗、郭利华、何西豪、吴中州、 常玮、焦铸锦、董江伟、乔世锴、王玲、王君、薛建敏、薛冰。 II DB41/T 1810—2019 曲茎石斛培养基播种育苗技术规程 1 范围 本标准规定了曲茎石斛培养基播种育苗的术语和定义、制种、培养基配方、培养基播种育苗、炼苗 与移栽、种苗出床分级。 本标准适用于曲茎石斛培养基播种育苗。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 5084 农田灌溉水质标准 GB/T 8321（所有部分） 农药合理使用准则 NY/T 496 肥料合理使用准则 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 曲茎石斛 Dendrobium flexicaule Z.H.TSi,S.C.Sun et L.G.XU 兰科石斛属多年生草本植物，附生。茎圆柱形平卧或斜展，显著廻折弯曲，茎长4 cm～11（15） cm, 叶2～4枚互生于茎上部，总状花序，具1～2朵生于无叶的茎上部，花冠黄绿色展开后粉白色，花瓣长 2.5 cm～2.8 cm,中宽1.3 cm，唇瓣具紫色斑块，花期5月。散生于伏牛山海拔800 m～1200 m的阴坡、 半阴坡山谷的岩石上。 3.2 培养基播种苗 将植物种子直接播种在培养基上，在环境因子可控条件下生产出来的苗体。 3.3 原球茎 兰科植物种子萌发过程中，由种胚形成的扁形球状物。 3.4 无根苗 在曲茎石斛培养基播种中，由圆球茎诱导发育用于扩繁的无根苗体。 4 制种 4.1 母株选择 选择原产伏牛山区植株健壮，无病虫害的曲茎石斛作为制种母株。 1 DB41/T 1810—2019 4.2 母株管理 4.2.1 温湿度 母株宜置于荫棚设施中进行培育，在冬季花芽分化期间夜间温度13 ℃～15 ℃，白天18 ℃～20 ℃； 或在阴棚中自然温度越冬。保持60%～70%的空气湿度，干旱时及时补水，生长基质严防积水。 4.2.2 施肥 每年的5月开始，宜每15 d施1次腐熟的80～100倍液的稀释薄饼肥，入冬后宜施0.1%～0.05%的磷酸 二氢钾或其它适量磷钾肥。 4.2.3 通风 不定期的打开棚内通风口，经常保持空气流动。 4.3 授粉 4.3.1 授粉方式 同种源异株异花授粉为佳。 4.3.2 授粉时间 自然开花后第 3 d～4 d 时授粉，以晴天下午 16:00～18:00 点为佳。 4.3.3 授粉方法 将母本花上的唇瓣先摘掉，然后用牙签或镊子尖头拨开药帽后去除花粉块；同样方法摘掉父本上的 唇瓣，用牙签或镊子尖头取出黄色花粉块，置于容器内或纸上，以备授粉。父母本相近时，可直接进行 授粉。授粉时用牙签或镊子将花粉块轻轻放在已去除花粉块的母本合蕊柱下部凹陷的柱头上（蕊腔内）， 轻轻压紧或用牙签将蕊柱腔的黏液全部粘上花粉块。 4.3.4 授粉管理 授粉后，应及时挂牌，注明父母本名称、产地、授粉时间、编号等内容，挂在授粉后的花枝上。授 粉后7 d左右，若花瓣萎缩，子房开始膨大变绿并能看到果实邹形，说明授粉成功。在花朵完全枯萎后， 可向母株喷洒1：1000倍的磷酸二氢钾溶液补充营养，促进果实发育成长。授粉后120 d～140 d果实成 熟。 4.4 果实采收 10月下旬～11月上中旬，当蒴果开始由绿变黄成熟未开裂前采收，采收后用纸巾包裹后放入塑料封 口袋中，置4 ℃冰箱中保存备用。 5 培养基配方 5.1 基本培养基选择 基本培养基选择为MS。 5.2 培养基配方 2 DB41/T 1810—2019 曲茎石斛培养基播种育苗各阶段培养基配方参见附录A。 6 培养基播种育苗 6.1 种子萌发培养 6.1.1 蒴果清洗消毒 将经过后熟未开裂的蒴果，放在流水中洗去表面的灰尘杂质，用牙刷蘸取浓度为10%体积分数的洗 洁精溶液刷洗果实表面并浸泡20 min，然后用流水冲洗1 h。在超净工作台上用75%的酒精浸泡30 s，无 菌水清洗干净，再放入0.1%的升汞溶液中浸泡10 min后，用无菌水冲洗5～6次。 6.1.2 播种培养 在超净工作台上用无菌手术刀、镊子将灭菌好的蒴果剖开，用无菌镊子均匀撒布于种子无菌萌发诱 导培养基（参见附录A）上，在培养瓶中进行固体培养，前期避光培养15 d后，采用光照培养。 6.2 原球茎增殖继代培养 播种培养60 d～75 d后，将原球茎均匀地转接到培养瓶中的原球茎增殖继代培养基（参见附录A） 上进行继代固体培养。 6.3 丛生芽分化培养 继代培养45 d～60 d后，将原球茎均匀转接到培养瓶中的丛生芽分化培养基（参见附录A）上，进 行固体培养。 6.4 壮苗生根培养 丛生芽分化培养60 d～70 d后，将茎株高1 cm以上的无根苗挑出，转接到培养瓶中的壮苗与生根培 养基（参见附录A）上进行固体培养。经过50 d的培育，瓶苗全部生根，生根数多在3～4条，当幼苗生 根后，可继续培养70 d～120 d即可出瓶炼苗。 6.5 培养条件 光照强度1500 Lx～2000 Lx，光照时间10 h～12 h/d，培养温度25 ℃～28 ℃。 7 炼苗与移栽 7.1 大棚选址与构建 大棚设施应选在通风排水良好，水源丰富，交通方便无污染的开阔地段建造，大棚为镀锌钢管拱棚 结构，宽度8 m，长度因地制宜，高度3.6 m，南北向设置，棚顶覆盖无滴薄膜（或不覆盖薄膜），拱棚 架上边覆盖遮阳率为80%的黑色尼龙网，棚下部设防虫网。 7.2 大棚消毒 大棚炼苗7 d～10 d前密闭，用45%百菌清烟熏剂每667 ㎡用量200 g进行熏蒸剂消毒处理，均匀放 置后分别点燃、随即密闭烟熏2 h～3 h。 7.3 苗床构建 3 DB41/T 1810—2019 苗床规格为长3.0 m，宽1.2 m，高0.5 m，床四周用高10 cm的塑料挡板做床围栏，下铺钢网，上铺 塑料网，棚内栽植床分四行摆放。 7.4 基质消毒与铺设 苗床栽培基质为松树皮块. 基质材料规格为大块长2 cm～3 cm，小块长0.5 cm～1.0 cm，大块占80%， 小块占20%，首先基质用水浸泡后，采用蒸汽杀菌的消毒方法处理基质材料，基质蒸煮温度为95 ℃～ 105 ℃，处理时间100 h～120 h。基质铺设厚度为7 cm～8 cm，大料放下层，小料放上层。 7.5 炼苗 石斛组培瓶苗在组培室内逐步降至室温处理7 d后，转移至种植大棚内，闭瓶炼苗3 d～4 d。尔后 先拧松瓶盖1 d左右，第2天至第3天逐步打开瓶盖，使其炼苗10 d～15 d，在炼苗期间若发现有轻度感 染瓶苗时，用多菌灵800倍液及时清洗消毒，苗体消毒5 min～10 min后及时种植。感染严重的瓶苗及时 移出大棚销毁。 7.6 出瓶移栽 7.6.1 出瓶 打开瓶盖后的组培苗瓶中加入60%的清水，然后将培养基摇散倒出，用流动的清水将培养基洗净， 清洗中做到轻拿轻放。 7.6.2 瓶苗分级 将清洗干净的石斛瓶苗进行分级（见附录B）。 7.6.3 晾苗 在荫棚内按行平摊进行晾苗，至根系由青绿略变为泛白为宜。不应在阳光下和强风处晾苗。晾苗期 间，对石斛小苗根系及时喷雾补水，水中加入少量的多菌灵溶液（按正常使用量的1/6比例加入500倍液） 和兰花营养液（正常使用量的1/6）。 7.6.4 移栽 栽植曲茎石斛组培瓶苗时间以每年4～5月