(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111296810.2 (22)申请日 2021.11.03 (71)申请人 南方科技大 学 地址 518000 广东省深圳市南 山区桃源街 道学苑大道1088号 (72)发明人 董金堂　黄青青　 (74)专利代理 机构 深圳市世纪恒程知识产权代 理事务所 4 4287 代理人 陈小娟 (51)Int.Cl. C12Q 1/02(2006.01) A61K 31/426(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) (54)发明名称 预防前列腺癌的药剂的筛选方法、 硝唑尼特 在制药中的应用 (57)摘要 本发明公开一种预防前列腺癌 的药剂的筛 选方法、 硝唑尼特在制药中的应用， 包括以下步 骤： S10、 将前列腺癌细胞进行3D细胞培养， 得肿 瘤球状体； S2 0、 将待筛选 药剂配制成浓度为10μ M的溶液， 用溶液对肿瘤球状体进行细胞侵袭实 验， 并计算肿瘤球状体的侵袭面积， 筛选出侵袭 面积小于50％的肿瘤球状体对应的药剂， 其中， 待筛选药剂选自FDA上市及药典收录化合物库； S30、 将筛选出的药剂配制成0～10μM的多个不 同浓度梯度的溶液， 并分别加入肿瘤球状体中培 养后， 计算肿瘤球状体的侵袭面积， 筛选出侵袭 面积小于70％的7个药剂； S40、 测定7个药剂的 IC50， 筛选 出IC50值小于28μM的药剂， 即为预防 前列腺癌的药剂。 硝唑尼特安全性好， 预防效果 明显。 权利要求书1页 说明书11页 附图6页 CN 114134195 A 2022.03.04 CN 114134195 A 1.一种预防前列腺癌的药剂的筛 选方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： S10、 将前列腺癌细胞进行3D细胞培 养， 得肿瘤球 状体； S20、 将待筛选药剂配制成浓度为10 μM的溶液， 用所述溶液对所述肿瘤球状体进行细胞 侵袭实验， 并计算所述肿瘤球状体的侵袭面积， 筛选出侵袭面积小于50％的肿瘤球状体对 应的药剂， 其中， 所述待筛 选药剂选自FDA上市及药典收录化 合物库； S30、 将筛选出的所述药剂配制成0～10μM的多个不同浓度梯度的溶液， 并分别加入肿 瘤球状体中培养后， 计算所述肿瘤球状体的侵袭面积， 筛选出侵袭面积小于70％的7个药 剂； S40、 测定所述7个药剂中至少部分药剂的IC50， 筛选出IC50值小于28 μM的药剂， 即为预 防前列腺癌的药剂。 2.如权利要求1所述的预防前列腺癌的药剂的筛 选方法， 其特 征在于， 步骤S10包括： S11、 用前列腺癌细胞PC 3和连接体K3 69Q， 构建前列腺癌高转移PC 3‑KQ细胞； S12、 将所述前列腺癌高转移PC 3‑KQ细胞进行3D细胞培 养， 得肿瘤球 状体。 3.如权利要求1所述的预防前列腺癌的药剂的筛选方法， 其特征在于， 所述预防前列腺 癌的药剂包括呋喃菌素、 硝呋太尔、 硝唑尼特和瑞他帕林。 4.硝唑尼特在制备 预防前列腺疾病的药物中的应用。 5.硝唑尼特在制备 预防前列腺癌的药物中的应用。 6.硝唑尼特在制备 预防前列腺癌骨转移的药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114134195 A 2预防前列腺癌的药剂的筛选方 法、 硝唑尼 特在制药中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物医药技术领域， 特别涉及一种预防前列腺癌的药剂的筛选方法、 硝唑尼特在制药中的应用。 背景技术 [0002]前列腺癌是男性泌尿系统最常见的恶性肿瘤， 全球癌 症病发率居第四位。 据估计， 在2020年就有1414259例患者病发于前列腺癌， 有375304例癌症患者死于前列腺癌。 相比欧 美国家， 虽然我国的前列腺癌发病率较低， 但是随着近年来我国社会 人口老龄化， 经济水平 提高及人们饮食习惯改变， 我国前列腺癌 发病率逐年升高的趋势， 严重威胁着我国中老年 男性的健康。 根据2013年中国前列腺癌发病现状和流行趋势分析显示， 1998年中国男性前 列腺癌发病率仅为3.52/10万， 但至2008年发病率达到11.00/10万， 10年间的年均增长比例 为12.07％。 前列腺癌骨转移是前列腺癌常见的并发症之一， 也是患者 发病和死亡的主要原 因。 前列腺癌在初始阶段， 生长在局部的肿瘤可通过外科手术或放射疗法成功治疗， 但是大 约20～30％的患者会复发。 虽然复发的患者一开始会对雄激素剥夺疗法或雄激素 受体拮抗 剂敏感， 但是最终都会不可避免地发展为去势抵抗性前列腺癌(castration ‑resistant   prostate  cancer,CRPC)。 这一阶段会同时或随后迅速出现继发性肿瘤， 90％的转移性去势 抵抗性前列腺癌(mCRPC)都会转移到骨骼部位。 尽管对于患有骨转移的CRPC患者建议使用 denosumab或zoledronic  acid预防或延迟骨骼相关事件(skeletal  related events, SRE)， 但在癌症特异 性和总体生存方面未见明显疗效。 目前， 多西紫杉醇和卡巴他赛是唯一 对mCRPC患者具有生存益处的化疗药物， 但实际上所有mCRPC最终都会产生耐药性， 多西紫 杉醇治疗的骨转移患者预后仍然较差 。 发明内容 [0003]本发明的主要目的是提出一种预防前列腺癌的药剂的筛选方法、 硝唑尼特在制药 中的应用， 旨在筛 选新的能够预防前列腺疾病的药剂。 [0004]为实现上述目的， 本发明提出一种预防前列腺癌的药剂的筛选方法， 包括以下步 骤： [0005]S10、 将前列腺癌细胞进行3D细胞培 养， 得肿瘤球 状体； [0006]S20、 将待筛选药剂配制成浓度为10 μM的溶液， 用所述溶液对所述肿瘤 球状体进行 细胞侵袭实验， 并计算所述肿瘤球状体的侵袭面积， 筛选出侵袭面积小于50％的肿瘤球状 体对应的药剂， 其中， 所述待筛 选药剂选自FDA上市及药典收录化 合物库； [0007]S30、 将筛选出的所述药剂配制成0～10μM的多个不同浓度梯度的溶液， 并分别加 入肿瘤球状体中培养后， 计算所述肿瘤球状体的侵袭面积， 筛选出侵袭面积小于70％的7个 药剂； [0008]S40、 测定所述7个药剂中至少部分药剂的IC50， 筛选出IC50值小于28 μM的药剂， 即 为预防前列腺癌的药剂。说　明　书 1/11 页 3 CN 114134195 A 3