(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111288485.5 (22)申请日 2021.11.02 (71)申请人 安徽医科 大学第一附属医院 地址 230000 安徽省合肥市绩溪路218号 (72)发明人 张力　陶良俊　梁朝朝　潘鑫源　 王辉　李春　葛胜东　 (74)专利代理 机构 北京高沃 律师事务所 1 1569 代理人 苏士莹 (51)Int.Cl. A61K 33/242(2019.01) A61K 47/69(2017.01) A61K 47/64(2017.01) A61P 35/00(2006.01) B82Y 5/00(2011.01) B82Y 40/00(2011.01) (54)发明名称 一种识别和降解前列腺癌细胞表 面的PD-L1 的金纳米星及其制备方法和应用 (57)摘要 本发明提供了一种识别和降解前列腺癌细 胞表面的PD ‑L1的金纳米星及其制备方法和应 用， 涉及生物医药技术领域。 本发明首次利用PD ‑ L1结合肽， 自噬诱导肽及金纳米星， 成功构建了 一种能识别并能高效降解前列腺癌细胞表面PD ‑ L1的纳米颗粒。 即将PD ‑L1结合肽及自噬诱导肽 嫁接到金纳米星的表面， 通过该纳米装置识别并 降解PD‑L1， 以抑制前列腺细胞的免疫逃逸， 增强 抗肿瘤免疫， 从而抑制前列腺癌的进展， 达到治 疗前列腺癌的目的。 权利要求书1页 说明书9页 序列表1页 附图4页 CN 114010655 A 2022.02.08 CN 114010655 A 1.一种识别和降解前列腺癌细 胞表面的PD ‑L1的金纳米星P ‑AuNS‑B， 其特征在于， 所述 金纳米星P ‑AuNS‑B的制备原料包括P D‑L1结合肽、 自噬诱 导肽和聚己二醇包被的金纳米星。 2.根据权利要求1所述金纳米星P ‑AuNS‑B， 其特征在于， 所述PD ‑L1结合肽的氨基酸序 列包括SEQ  ID NO.1所示的序列； 所述自噬诱 导肽的氨基酸序列包括SEQ  ID NO.2所示的序列。 3.根据权利要求1或2所述金纳米星P ‑AuNS‑B， 其特征在于， 所述PD ‑L1结合肽和自噬诱 导肽均以酰胺反应偶联到聚己二醇包被的金纳米星表面。 4.根据权利 要求3所述金纳米星P ‑AuNS‑B， 其特征在于， 利用聚己二醇包被金纳米星的 方法， 包括： 去除金纳米星中的CTAB， 重新分散于纯水中， 并与聚己二醇反应10～12h， 得聚 己二醇包被的金纳米星； 所述聚己二醇的一端带有巯基， 另一端带有羧基。 5.根据权利 要求4所述金纳米星P ‑AuNS‑B， 其特征在于， 所述金纳米星与聚己二醇的质 量比为0.5:10； 所述聚己二醇的分子量 为5kD。 6.根据权利要求4或5所述金纳米星P ‑AuNS‑B， 其特征在于， 得聚己二醇包被的金纳米 星后， 还包括重新分散 于MES中。 7.权利要求1～6任一项所述金纳米星P ‑AuNS‑B的制备方法， 其特征在于， 包括以下步 骤： 将聚己二醇包被的金纳米星、 SDS、 PD ‑L1结合肽和自噬诱导肽混合搅拌2h， 与EDC混合后 继续搅拌10～12h， 所 得溶液中包含所述金纳米星P ‑AuNS‑B； 所述聚己二醇包被的金纳米星、 P D‑L1结合肽和自噬诱 导肽的质量比为0.5:0.2:0.2。 8.根据权利要求7所述制备方法， 其特征在于， 在得所述溶液后， 还包括离心， 所述离心 的转速为23 000rpm。 9.权利要求1～6任一项所述金纳米星P ‑AuNS‑B在制备治疗前列腺癌药物中的应用。 10.一种治疗前列腺癌的药物， 其特征在于， 所述药物的有效成分包括权利要求1～6任 一项所述金纳米星P ‑AuNS‑B。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114010655 A 2一种识别和降解前列腺癌细胞表面的PD ‑L1的金纳米星及其 制备方法和应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医药技术领域， 具体涉及一种识别和降解前列腺癌细胞表面的 PD‑L1的金纳米星及其制备 方法和应用。 背景技术 [0002]前列腺癌是全球男性第二常见的癌症， 也是导致男性癌症死亡的第五大原因。 根 治性前列腺切除术或根治性放疗是局限性前列腺癌的主要治疗方法， 而以雄激素剥夺疗法 (ADT)为基础的综合治疗 是晚期前列腺癌的治疗方法。 一旦 发生激素抵抗， 晚期前列腺癌常 发展为转移 性前列腺癌。 疾病复发和转移以及激素难治性疾病的发展仍然 是前列腺癌患者 死亡的主要原因。 因此， 晚期前列腺癌的病死率高， 急 需新的治疗方法。 近年来， 免疫治疗已 成为晚期肿瘤治疗的主要手段之一， 其中应用最为广泛的是免疫检查点分子程序性死亡受 体‑1(programmed  death receptor ‑1， PD‑1)/程序性死亡配体 ‑1(programmed  death  ligand‑1， PD‑L1)信号通路抑制 剂。 PD‑1/PD‑L1抑制剂已被多国FDA批准用于临床治疗， 并 在进展期及晚期癌症患者中取 得了长期且持久的临床反应。 [0003]PD‑1/PD‑L1信号通路是肿瘤免疫逃逸的主要机制之一， PD ‑1和PD‑L1为共刺激分 子， 当表达于肿瘤细胞表 面的PD‑L1和表达于活化T细胞表 面的PD‑1结合时， 便会触发T细胞 凋亡， 并抑制T细胞 活化、 增殖及 毒性T细胞的功能， 从而导致肿瘤细胞免受免疫细胞的攻击 而发生免疫逃逸。 PD ‑L1是一种 Ⅰ型跨膜蛋白， 由IgV样和IgC样胞外结构域、 疏水性跨膜结构 域和由30个氨基酸组成的短细胞质尾组成。 PD ‑L1的表达可以是结构性低水平的， 也可是适 应性高水平的。 越来越多的研究表明， PD ‑L1高表达于多种肿瘤并与多种肿瘤的PD ‑1/PD‑L1 抑制剂疗效及预后相关， 当然也包括前列腺癌。 PD ‑1/PD‑L1信号轴在前列腺癌微环境调控 中也起着重要作用。 此外， PD ‑L1在恩杂鲁胺耐药的前列腺癌小鼠模型及前列腺癌细胞系中 也是高表达的。 总之， PD ‑L1在前列腺癌的发生发展中起着重要作用。 目前用于治疗前列腺 癌的靶向于PD ‑L1的都是PD ‑L1抗体。 然而， 抗体价格昂贵且多个临床试验表明PD ‑L1抗体在 晚期前列腺癌免疫 治疗方面的疗效 并不十分理想 。 发明内容 [0004]有鉴于此， 本发明的目的在于提供一种识别和降解前列腺癌细胞表面的PD ‑L1的 金纳米星及其制备方法和应用， 抑制前列腺细胞的免疫逃逸， 从而促进前列腺癌细胞的死 亡。 [0005]为了实现上述发明目的， 本发明提供以下技 术方案： [0006]本发明提供了一种识别和降解前列腺癌细胞表面的PD ‑L1的金纳米星P ‑AuNS‑B， 所述金纳米星P ‑AuNS‑B的制备原料包括PD ‑L1结合肽、 自噬诱导肽和聚己二醇包被的金纳 米星。 [0007]优选的， 所述P D‑L1结合肽的氨基酸序列包括SEQ  ID NO.1所示的序列；说　明　书 1/9 页 3 CN 114010655 A 3