(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210639024.6 (22)申请日 2022.06.08 (71)申请人 宁波市第一医院 地址 315000 浙江省宁波市海曙区柳汀街 59号 (72)发明人 牧启田　应琪明　陈莹　石淙　 罗守军　 (74)专利代理 机构 宁波市鄞州盛飞专利代理事 务所(特殊普通 合伙) 33243 专利代理师 洪珊珊 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12N 15/113(2010.01) (54)发明名称 一种鉴别急性白血病亚型的circRNA标志物 及其应用 (57)摘要 本发明属于生物 技术领域， 涉及一种鉴别急 性白血病亚型的circRNA标志物及其应用。 本发 明通过检测急性白血病(AL)外周血中hsa_cir c_ 0012152和hsa_circ_0020093基因表达情况， 发 现hsa_circ_0012152在 AML患者外周血中表 达量 显著高于ALL患者及正常对照， hsa_circ_ 0020093在ALL患者外周血中表 达量显著高于AML 患者及正常对照， hsa_circ_0012152可作为AML 的辅助诊断标志物， hsa_circ_0020093可作为 ALL辅助诊断标志物， hsa_circ_0012152和hsa_ circ_0020093可作为A ML和ALL鉴别诊断标志物， 为hsa_circ_0012152和hsa_circ_0020093用于 AL的辅助诊断和鉴别诊断提供新方法。 权利要求书1页 说明书7页 序列表2页 附图2页 CN 115044674 A 2022.09.13 CN 115044674 A 1.一种鉴别急性白血病亚型的circRNA标志物， 其特征在于， 标志物包括SEQ  ID NO： 1 所示的hsa_circ_0 012152和SEQ  ID NO： 2所示的hsa_circ_0 020093。 2.一种如权利 要求1所述鉴别急性白血病亚型的circRNA标志物的引物 组合， 其特征在 于， 引物组合包括： 针对hsa_circ_0012152的特异性引物和针对hsa_circ_0020093的特异 性引物。 3.根据权利 要求2所述的一种鉴别急性白血病亚型的circRNA标志物的引物组合， 其特 征在于， 针对hsa_circ_0012152的特异性引物包括SEQ  ID NO： 3所示的正向引物， SEQ  ID  NO： 4所示的反向引物。 4.根据权利 要求2所述的一种鉴别急性白血病亚型的circRNA标志物的引物组合， 其特 征在于， 针对hsa_circ_0020093 的特异性引物包括SEQ  ID NO： 5所示的正向引物， SEQ  ID  NO： 6所示的反向引物。 5.一种如权利要求1所述鉴别急性白血病亚型的circRNA标志物在制备急性白血病辅 助诊断及急性白血病亚型鉴别诊断产品中的应用。 6.一种如权利要求2 ‑4所述鉴别急性白血病亚型的circRNA标志物的引物组合在制备 急性白血病辅助诊断产品中的应用。 7.一种如权利要求2 ‑4所述鉴别急性白血病亚型的circRNA标志物的引物组合在制备 急性白血病亚型鉴别诊断产品中的应用。 8.一种白血病诊断试剂盒， 其特征在于， 所述试剂盒包括权利要求2 ‑4所述的引物组 合。 9.根据权利要求8所述的一种白血病诊断试剂盒， 其特征在于， 还含有内参基因GAPDH 的特异性检测引物， 该内参基因GAPDH的特异性检测引物包括SEQ  ID NO： 7所示的正向引 物， SEQ ID NO： 8所示的反向引物。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115044674 A 2一种鉴别急性白血病亚型的circRNA标志物及其应用 技术领域 [0001]本发明属于生物技术领域， 涉及一种鉴别 急性白血病亚型的circRNA标志物及其 应用。 背景技术 [0002]急性白血病(acute  leukemia， AL)是一类造血干细胞恶性克隆性疾病， 异质程度 较高， 通常可分为急性髓细胞白血病(acute  myelocytic  leukemia,AML)和急性淋巴细胞 白血病(acute  lymphoblastic  leukemia,ALL)。 这两者之间的治疗策略差别很大， AML通常 采用以DA(柔红霉素和阿糖胞苷)为基础治疗方法， 而A LL通常采用VDP(长春新碱、 柔红霉素 和糖皮质激素)为基础治疗方案， 因此对AML和A LL进行准确鉴别尤为重要。 而想要区分这两 者必须先将AL从其他疾病中准确区分出来， 进而才是区分为AML或ALL亚型， 更进一步则 是 要将AML或AL L的分子亚型进行区分， 从而对治疗或预后起指导作用。 [0003]AL的分类最早是在19 76年由FAB提出的， 虽然其可区分绝大多数AL， 但 无法准确分 类一些特殊形态的AL， 对临床预后的指导意义有限， 不能反应疾病本质。 随着免疫学、 细胞 遗传学和分子生物学的发展， 在2001年， WHO首次提出MICM分型标准， 其很大程度上弥补了 FAB分型的不足， 较FAB分类法更能反映疾病本质。 但MICM分型仍存在对技术人员的技能要 求较高， 相关配套仪器昂贵等缺点。 其次， 部 分急性白血病患者髓系或淋系免疫标记表达混 乱， 有些患者白血病细胞同时表达髓系和淋系抗原， 造成诊断困难， 增加了临床化疗方案的 选择难度， 从而影响治疗效果。 再者， 抽取骨髓标本时常常由于患者心理因素、 抽取人员技 术原因、 抽取量、 年龄与穿刺部位和病理因素等原因造成骨髓标本稀释或穿刺留样不成功， 导致检验结果的不可靠， 所以， 寻找一种简单易行的可靠手段来区分AML和ALL显得十分迫 切。 [0004]随着二代测序技术的发展应用， circRNA成为现如今生命科学领域最令人兴奋的 发现。 circRNA是一类特殊的非编码RNA分子， 呈封闭环状结构， 无游离末端， 对核酸外切酶 具有较高的耐受性， 表达相对稳定 。 因此， circRNA是临床上理想的标记 物。 [0005]基于circ RNA的特点及功能， 其可成为肿瘤的分子标记， 许多文献对此都进行过详 细报道， 其同样也适用于急性白血病， 越来越多的circRNA被证明和AL预后有关， 但用 circRNA鉴别AL 亚型的研究不多见。 发明内容 [0006]本发明的目的是针对现有技术存在的上述问题， 提出了一种利用外周血中hsa_ circ_0012152和hsa_circ_0 001857鉴别急性白血病亚型AML和AL L的circRNA标志 物。 [0007]本发明的目的可通过下列技术方案来实现： 一种鉴别 急性白血病亚型的circRNA 标志物， 标志物包括SEQ  ID NO： 1所示的hsa_circ_0012152和SEQ  ID NO： 2所示的hsa_ circ_0020093。 [0008]相比于检测骨髓标本中h sa_circ_0012152和h sa_circ_00018 57可以区别A L亚型，说　明　书 1/7 页 3 CN 115044674 A 3