ICS 65.120.10 X 22 DB15 内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 1705—2019 “锡林郭勒羊肉”同位素丰度值检测方法 Determination of the isotopic abundance value in Xilinguole mutton 2019-10-25 发布 内蒙古自治区市场监督管理局 2020-01-25 实施 发 布 DB15/T 1705—2019 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 原理 .............................................................................. 1 4 仪器、设备与试剂 .................................................................. 1 5 分析方法 .......................................................................... 2 6 精密度 ............................................................................ 2 I DB15/T 1705—2019 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由内蒙古自治区食品检验检测中心提出。 本标准由内蒙古自治区肉制品标准化技术委员会（SAM/TC 03）归口。 本标准起草单位：内蒙古自治区食品检验检测中心、锡林郭勒盟食品药品检验检测和风险评估中心、 内蒙古科鸿科技服务有限责任公司、锡林郭勒职业学院。 本标准主要起草人：郭莉、张宏博、郭梁、张彦斌、郭元晟、李艳春、高岩、雅梅。 II DB15/T 1705—2019 “锡林郭勒羊肉”同位素丰度值检测方法 1 范围 本标准规定了“锡林郭勒羊肉”中碳、氮同位素丰度比检测原理、仪器、设备与试剂和方法。 本标准适用于“锡林郭勒羊肉”中碳、氮同位素丰度比的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 羊肉经过粉碎，索氏提取脱脂干燥后，根据不同羊肉中δ 13C、δ 15N值具有显著性差异的特性，采 用稳定同位素质谱仪（配有元素分析仪）测定脱脂羊肉中稳定性碳、氮同位素。通过检测羊肉中碳、氮 同位素并计算其丰度值，确定羊肉的产地范围。 4 仪器、设备与试剂 4.1 4.2 4.3 4.4 4.5 4.6 4.7 4.8 4.9 4.10 4.11 4.12 4.13 稳定同位素质谱仪（配有元素分析仪）。 干燥箱：可控温 103 ℃±2 ℃。 分析天平：感量 0.0001 g。 绞肉机：多孔板的孔径不超过 4 mm 的绞肉机。 索氏抽提器：接收瓶体积为 250 mL。 100 目筛。 称量瓶：直径不小于 40 mm。 石油醚（30 ℃～60 ℃沸程）。 滤纸筒：经脱脂。 脱脂棉。 锡箔杯。 铝杯。 粉碎机。 1 DB15/T 1705—2019 5 分析方法 5.1 试样前处理 从肉样样品中取出部分瘦肉，用绞肉机（4.4）绞碎。用铝杯（4.12）称取3 g～5 g试样，置于 干燥箱（4.2）中完全干燥后，用手捏碎成块状，移入滤纸筒（4.9）中（上面用绵覆盖）。用石油醚（4.8） 和索氏抽提器（4.5）将滤纸筒中样品脱脂6 h～8 h，收集剩余残渣（主要成分为粗蛋白）于铝杯（4.12） 中，在干燥箱（4.2）中烘干。将烘干后样品冷却，用粉碎机（4.13）粉碎成粉状，过100目筛（4.6） 后，收集备用。 5.2 同位素测定 5.2.1 稳定同位素质谱仪工作参数 5.2.1.1 元素分析仪：进样器氦气吹扫流量为 200 mL/min，燃烧炉温度为 1000 ℃，还原炉温度为 650 ℃，载气 He 流量为 90 mL/min～100 mL/min。 5.2.1.2 Conflo Ⅲ 条件设定：He 稀释压力为 0.6 bar，CO2 参考气压力为 0.6 bar，N2 参考气压力为 1.0 bar。 13 15 5.2.1.3 质谱仪条件：用 USGS24（δ CPDB=-16.00 ‰）标定 CO2 钢瓶，用 IAEAN（δ Nair=0.4 ‰）标定 CO2 钢瓶，用标定的钢瓶器作为标准。 5.2.2 样品测定 称取适量6.1备用样品放入锡箔杯（4.10）中（称样量由仪器峰值大小决定），通过元素分析仪进 行测定稳定性碳、氮同位素。每个样品重复测定3次，碳、氮同位素的测定精度均为0.2 ‰。 5.2.3 结果计算 13 15 13 15 稳定性碳、氮同位素比率分别用δ C ‰、δ N ‰表示，其中δ C的相对标准为V-PDB，δ N的相 对标准为空气。见式（1）。 δ15 ‰=（R样品/R标准-1）×1000…………………………………………（1） 式中： R —— 重同位素原子丰度与轻同位素原子丰度之比，即13C/12C、15N/14N。 6 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20 %。 _________________________________ 2