(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211135012.6 (22)申请日 2022.09.19 (71)申请人 华润双鹤药业股份有限公司 地址 100102 北京市朝阳区望京利泽 东二 路1号 (72)发明人 常艳　赵晓亚　陈朝侠　脱美雪　 陈瑞娟　 (74)专利代理 机构 北京高沃 律师事务所 1 1569 专利代理师 李博 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/04(2006.01) G01N 30/30(2006.01) G01N 30/32(2006.01) G01N 30/34(2006.01)G01N 30/86(2006.01) B01J 20/281(2006.01) (54)发明名称 一种苯甲酸阿格列汀及其有关物质的检测 方法 (57)摘要 本发明提供了一种苯甲酸阿格列汀及其有 关物质的检测方法， 设置系统适用性样品， 选择 所述苯甲酸阿格列汀作为对照品， 取所述的含有 苯甲酸阿格列汀和苯甲酸阿格列汀有关物质的 混合物作为供试品， 控制一定的高效液相色谱条 件， 协同采用系统适用性试验， 实现有效分离苯 甲酸阿格列汀中含有的工艺杂质和降解杂质， 得 到苯甲酸阿格列汀以及其有关物质的检测结果， 灵敏度高， 专属性强， 准确性高。 本发明提供的检 测方法应用于苯甲酸阿格列汀有关物质的检测， 可以检测是否含有杂质以及杂质的种类和含量， 扩大了其应用范围， 对提高苯甲酸阿格列汀的质 量标准具有重要意 义。 权利要求书2页 说明书16页 附图3页 CN 115524416 A 2022.12.27 CN 115524416 A 1.一种苯甲酸阿格列汀及其有关物质的检测方法， 所述的苯甲酸阿格列汀有关物质包 括 化 合 物 A L L I ‑0 1 、 化 合 物 A L L I ‑0 2 、 化 合 物 A L L I ‑0 6 、 化 合 物 A L L I ‑0 7 、 化合物ALLI ‑08和 化合物ALLI ‑10中的一种或 多种； 所述苯甲酸阿格列汀及其有关物质的检测方法包括以下步骤： (1)选择含有苯 甲酸阿格列汀、 化合物ALLI ‑01、 化合物ALLI ‑02、 化合物ALLI ‑06、 化合 物ALLI‑07、 化合物ALLI ‑08和化合物ALLI ‑10的混合物作为系统适用性样品， 将所述系统适 用性样品和稀释剂混合， 得到系统适用性溶液， 所述系统适用性溶液中苯 甲酸阿格列汀的 浓度为0.30～0.38mg/mL； 所述系统适用性溶液中化合物ALLI ‑01化合物、 化合物ALLI ‑02、 化合物ALLI ‑06、 化合物ALLI ‑07、 化合物ALLI ‑08和化合物ALLI ‑10浓度独立地为0.00030～ 0.00038mg/mL； (2)选择苯甲酸阿格列汀作为对照品， 将所述对照品和稀释剂混合， 得到对照品溶液， 所述对照品溶 液中对照品的浓度为0.0 0030～0.00038mg/mL； (3)以含有苯甲酸阿格列汀和苯甲酸阿格列汀有关物质的混合物作为供试品， 将所述 供试品和稀释剂混合， 得到供试品溶液， 所述供试品溶液中供试品的总浓度为0.30～ 0.38mg/mL； 所述步骤(1)、 (2)和(3)中的稀释剂独立地为体积比为(78～90)： 15的醋酸铵缓冲液和 甲醇组成的混合液； 所述 步骤(1)、 (2)和(3)不分先后顺序； (4)分别量取所述步骤(1)得到的系统适用性溶液、 所述步骤(2)得到的对照品溶液和 所述步骤(3)得到的供试品溶液进行高效液相色谱检测， 得到苯 甲酸阿格列汀及其有关物 质的检测结果； 所述高效液相色谱检测的参数包括： 所述高效液相色谱检测的色谱柱为： ， 4.6m m×250mm， 5 μm； 所述高效液相色谱检测的流动相体系为流动相A和流动相B， 所述流动相A为醋酸铵缓 冲液， 所述 流动相B为甲醇； 所述流动相体系的流速为0.8～1.2mL/mi n；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115524416 A 2所述高效液相色谱检测的洗脱方式为梯度洗脱； 所述梯度洗脱的程序为： 0.0～25.0min： 所述流动相A的体积百分含量由85％匀速减少到 63％； 25.0～45.0mi n： 所述流动相A的体积百分含量由6 3％匀速减少到 30％； 45.0～55.0min： 所述流动相A的体积百分含量 为30％； 55.0～55.1min： 所述流动相A的体积百分含量由3 0％匀速增 加到85％； 55.1～65.0min： 所述流动相A的体积百分含量 为85％。 2.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述步骤(1)、 (2)、 (3)和(4)中醋酸铵 缓冲液的pH值独立 地为3.3～3.7。 3.根据权利要求1或2所述的检测方法， 其特征在于， 所述步骤(1)、 (2)、 (3)和(4)中醋 酸铵缓冲液的pH值独立 地为3.5。 4.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述步骤(4)中流动相体系的流速为 1.0mL/mi n。 5.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述步骤(4)中色谱柱 的填充剂为十 八烷基键合硅胶。 6.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述步骤(4)中色谱柱的柱温为28～ 32℃。 7.根据权利 要求1或6所述的检测方法， 其特征在于， 所述步骤(4)中色谱柱的柱温为30 ℃。 8.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述步骤(4)中高效液相色谱检测的 参数还包括： 进样量 为18～22 μL。 9.根据权利要求1或8所述的检测方法， 其特征在于， 所述步骤(4)中高效液相色谱检测 的参数还 包括： 进样量 为20 μL。 10.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述步骤(4)中高效液相色谱检测的 参数还包括： 检测波长为278nm。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115524416 A 3