(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211236495.9 (22)申请日 2022.10.10 (71)申请人 贵州健安德科技有限公司 地址 550014 贵州省贵阳市贵阳国家高新 技术产业开发区沙文 科技园区白金大 道3491号14 号楼 (72)发明人 黄玉贵　张飞飞　符凡朗　王新　 王洪瑶　龙丹　吴宜佩　 (74)专利代理 机构 贵阳知沃桑知识产权代理事 务所(普通 合伙) 52120 专利代理师 任文婷 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/72(2006.01) A01N 25/04(2006.01)A01N 43/36(2006.01) A01N 43/40(2006.01) A01P 7/04(2006.01) (54)发明名称 一种HPLC-MS/MS定量检测2 0%虫螨腈·氟啶 虫酰胺悬浮剂中有效成分的方法 (57)摘要 本发明公开了一种HPLC ‑MS/MS定量检测 20％虫螨腈 ·氟啶虫酰胺悬浮剂中有效成分的 方法， 该方法操作简便、 快速、 准确， 分离效果好， 准确度和精密度高， 为虫螨腈和氟 啶虫酰胺复合 制剂提供了专属性强、 有效可靠的质量控制方 法。 权利要求书2页 说明书10页 附图4页 CN 115541760 A 2022.12.30 CN 115541760 A 1.一种HPLC ‑MS/MS定量检测20％虫螨腈 ·氟啶虫酰胺悬浮剂中有效成分的方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： (1)试样溶液的配制： 称取0.1g的20％虫螨腈 ·氟啶虫酰胺悬浮剂试样于100mL容量瓶 中， 用乙腈溶解并定容至刻度， 摇匀， 得试样母 液； 吸取适量试样母液， 用70％乙腈水溶液稀 释即得试样溶液， 待HPLC ‑MS/MS测定； (2)标准工作溶液的配制： 分别称取氟啶虫酰胺标样0.0107g、 虫螨腈标样0.0098g置于 2个不同的100mL容量瓶中， 用乙腈溶解并定容至刻度， 摇匀， 得到氟啶虫酰胺、 虫螨腈浓度 分别为106.68mg/L、 97.80mg/L的标样储备液； 分别取氟啶虫酰胺标准储备液1mL、 虫螨腈标 准储备液1mL于10mL容量瓶中， 用70％乙腈水溶液定容至刻度， 混合均匀， 得到氟啶虫酰胺 与虫螨腈的浓度分别为10.67mg/L、 9.78mg/L的混合标样溶液； 吸取1mL混合标准溶液于 100mL容量瓶中， 用70％乙腈水溶液定容至刻度， 混合均匀得到氟啶虫酰胺与虫螨 腈的浓度 分别为106.70 μg/L、 97.80 μg/L的混合标准工作溶液； 吸取适量混合标准工作溶液， 用70％ 乙腈水溶液稀释配置得到系列标准工作溶 液， 待HPLC ‑MS/MS测定； (3)测定和计算： 设置HPLC ‑MS/MS仪器操作条件， 待仪器基线稳定后， 分别加入试样溶 液、 标准工作溶 液进行测定， 按外标法计算氟啶虫酰胺、 虫螨腈的含量。 2.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 步骤(2)中， 所述系列标准工作溶液 中， 氟啶虫酰胺和虫螨腈浓度分别为5.34 μg/L、 4.89 μg/L； 10.67 μg/L、 9.78 μg/L； 26.68 μg/ L、 24.45 μg/L； 5 3.35 μg/L、 48.90 μg/L； 10 6.70 μg/L、 97.80 μg/L。 3.根据权利要求1所述的检测方法， 其特 征在于， 所述HPLC ‑MS/MS中， HPLC操作条件为： ①色谱柱： Poroshel l 121EC‑C18(2.1×50mm， 1.8 μm)， SN:US DAY69556； ②进样体积： 2 ～8 μL； ③流速： 0.2 ～0.8mL/mi n； ④柱温： 25～3 5℃； ⑤流动相： Ψ(乙腈： 0.1％甲酸水 溶液)＝70:3 0。 4.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述进样体积为4～6μL， 所述流速为 0.4～0.6mL/mi n。 5.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述进样体积为5μL， 所述流速为 0.5mL/mi n。 6.根据权利要求1所述的检测方法， 其特 征在于， 所述柱温为28～34℃。 7.根据权利要求1所述的检测方法， 其特 征在于， 所述柱温为3 0℃。 8.根据权利要求1所述的检测方法， 其特 征在于， 所述HPLC ‑MS/MS中， MSD操作条件为： ①离子源： AJS ESI源； ②检测模式： 正离 子模式； ③离子源参数： 干燥气： N2； 干燥气温度： 250℃； 干燥气流速： 14L/min； 鞘气： N2； 鞘气温 度： 250℃； 鞘气流速： 1 1L/min； 雾化器压力： 3 5psi； 喷嘴电压： 15 00V； 毛细管电压： 3 000V； ④监测模式： MRM 。 9.根据权利要求8所述的检测方法， 其特 征在于， 所述 监测模式的MRM 离子采集参数为： 监测时间0～1.0min， 化合物名称为氟啶虫酰胺， 母离子229.9， 子离子定量离子202.9， 驻留时间100， Fragmentor为130V， 碰撞能量为20 eV， 池加速电压为2V； 母离子229.9， 子离子权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115541760 A 2147.9， 驻留时间10 0， Fragmentor为13 0V， 碰撞能量 为35eV， 池加速电压为2 V； 监测时间1.0～2.0min， 化合物名称为虫螨腈， 母离子409.0， 子离子378.7， 驻留时间 100， Fragmentor为130V， 碰撞能量为15eV， 池加速电压为2V； 母离子409.0， 子离子定量离子 58.9， 驻留时间10 0， Fragmentor为13 0V， 碰撞能量 为15eV， 池加速电压为2 V。 10.根据权利要求1所述的检测方法， 其特征在于， 所述方法对氟啶虫酰胺的LOD为 0.016 μg/L， LOQ 为0.052 μg/L； 对虫螨腈的LOD为3.49 2 μg/L， LOQ 为11.641 μg/L。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115541760 A 3