(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211333122.3 (22)申请日 2022.10.28 (71)申请人 苏州市药品检验检测研究中心 地址 215000 江苏省苏州市吴中区吴中大 道1336号 (72)发明人 钟水生　陈荣　王亚琼　汪映宇　 张超　 (74)专利代理 机构 长沙新裕知识产权代理有限 公司 43210 专利代理师 赵超 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/72(2006.01) G01N 30/74(2006.01) G01N 30/86(2006.01)G01N 30/06(2006.01) G01N 30/04(2006.01) (54)发明名称 UPLC-UV-MS/MS测定清热解毒口服液中甜味 剂和防腐剂的方法 (57)摘要 本发明公开了UPLC ‑UV‑MS/MS测定清热解毒 口服液中甜味剂和防腐 剂的方法。 本发明提供了 一种UPLC ‑UV‑MS/MS同时测定清热解毒口服液中 17种甜味剂和防腐剂的方法； 其中， 山梨酸采用 紫外检测， 其他16种成分均采用质谱检测。 经验 证， 该方法的线性关系良好， 各组分的回收率为 85.2％～101.6％， 日内精密度为1.2％～ 3.1％， 方法检出限和定量限满足实验需求。 该方法既覆 盖了中药口服液中常见的防腐剂和甜味剂， 又解 决了山梨酸在部分串联质 谱仪上质 谱响应差的 问题， 可作为中药口服液中防腐剂和甜味剂检测 方案的一个补充。 权利要求书1页 说明书9页 附图4页 CN 115541772 A 2022.12.30 CN 115541772 A 1.一种UPLC ‑UV‑MS/MS同时测定清热解毒口服液中17种甜味剂和防腐剂的方法， 所述 17种甜味剂和防腐剂为安赛蜜、 糖精钠、 甜蜜 素、 阿斯巴甜、 山梨酸、 苯甲酸、 阿力甜、 对 羟基 苯甲酸甲酯、 甜菊糖苷、 纽甜、 对羟基苯甲酸乙酯、 对羟基苯甲酸丙酯、 对羟基苯甲酸异丙 酯、 对羟基苯甲酸 丁酯、 对羟基苯甲酸异丁酯、 脱氢乙酸和三氯蔗糖； 该方法包括如下参数： 色谱条件： Wat ers Acquity UPLC@HSS T3型色谱柱， 规格为2.1 ×100mm、 1.8 μm； 流动相 为有机相和水相， 梯度洗脱： 0～1.5min， 95％水相； 1.5～1.6min， 95％水相 →80％水相； 1.6 ～5.0min， 80％水相； 5.0～5.1min， 80％水相 →60％水相； 5.1～10.0min， 60％水相； 10.0～ 10.5min， 60％水相 →45％水相； 10.5～18.0min， 45％水相 →50％水相； 18.0～18.5min， 50％水相 →10％水相； 18.5～20.0min， 10％水相； 其中， 所述有机相由甲醇和乙腈按体积比 1:1混合而成， 所述水相为含0.01％甲酸的5mM乙酸铵水 溶液； 检测条件： 山梨酸采用紫外检测； 其他成分均采用质谱检测方式， 电喷雾离子源， 负离 子检测， 多反应监测 模式， 雾化气流量为3L/min， 干燥器气流量为10L/min， 接口温度为300 ℃， 传输毛细管温度为25 0℃， 加热块温度为 400℃。 2.根据权利要求1所述的方法， 其特 征在于： 色谱条件的流速为0.3mL/mi n。 3.根据权利要求1所述的方法， 其特 征在于： 色谱条件的柱温为38℃。 4.根据权利要求1所述的方法， 其特 征在于： 山梨酸的紫外检测波长为254 nm。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115541772 A 2UPLC‑UV‑MS/MS测定清热解毒口服液中 甜味剂和防腐剂的 方法 技术领域 [0001]本发明属于药物分析领域， 具体涉及UPLC ‑UV‑MS/MS测定清热解毒口服液中甜味 剂和防腐剂的方法。 背景技术 [0002]清热解毒口服液原收载于卫生部药品标准中药成方制剂第七册(标准编号： WS3 ‑ B‑1436‑93)， 后载入1995年版、 2000年版、 2005年版、 2010年版、 2015年版及2020年版 《中国 药典》 一部。 其处方来源为临床验方， 由生石膏、 金银花、 玄参、 地黄、 连翘、 栀子、 甜地丁、 黄 芩、 龙胆、 板蓝根、 知母、 麦冬共计十二 味药组成。 生产工艺为十二味药材用水煎煮， 浓缩再 醇沉后， 加入或不加入甜味剂、 防腐剂， 用水稀释制成。 [0003]防腐剂和甜味剂是中药口服液中常见的添加剂。 其中， 防腐剂的作用是通过抑菌 杀菌来达到延 长保质期的作用， 常用的防腐剂有山梨酸钾、 苯甲酸钠及羟苯酯类等。 而甜味 剂的作用则是通过矫正口服液本身的口味， 来改善患者， 特别是儿童患者服药的顺应性， 常 用的甜味剂有甜菊糖、 甜蜜素、 阿斯巴甜、 安赛蜜、 糖精钠等。 近些年有研究表明， 苯甲酸钠 (苯甲酸)的过量使用， 可能造成人体组织器官或机能的损害， 长期饮用含有苯甲酸钠的碳 酸饮料易使儿童患上多动症； 部分甜味剂的大量摄入， 可能引起高血糖、 葡萄糖耐受不良、 肥胖等代谢系统性疾病,或出现易怒、 抑郁、 记忆衰退、 阿尔兹海默症等神经系统异常， 甚至 被报道具有遗传毒性和致癌性。 考虑到防腐剂或甜味剂可能对人体造成的健康风险,需对 其摄入量进行控制,或有倾向性 地选择安全系数 更高的添加剂。 [0004]《中国药典》 2020年版四部对中药口服液中添加防腐剂和甜味剂的要求表述较为 宽泛，“根据需要可加入适宜的附加剂 ”、“如加入其他附加剂， 其品种与用量应符合国家标 准的有关规定， 不影响成品的稳定性， 并应避免对检验产生干扰 ”； 仅对常用防腐 剂苯甲酸、 山梨酸和羟苯酯 类做了限度规定， 但无明确检测方法； 对其他防腐剂或甜味剂， 则既无明确 国家标准， 也无相关限度要求， 从而导致部分不法商贩， 为改善口感、 规避产品储存中的微 生物超标风险或其 他因素， 超范围或超限量使用添加剂。 [0005]为有效探究清热解毒口服液中防腐剂、 甜味剂添加情况， 课题组通过摸索， 建立了 测定清热解毒口服液中甜味剂和防腐剂的UPLC ‑UV‑MS/MS方法， 特提出本发明创造 。 发明内容 [0006]本发明的目的在于克服现有技术的不足， 提供一种UPLC ‑UV‑MS/MS测定清热解毒 口服液中甜味剂和防腐剂的方法。 [0007]本发明上述目的通过如下技 术方案实现： [0008]一种UPLC ‑UV‑MS/MS同时测定清热解毒口服液中17种甜味剂和防腐剂的方法， 所 述17种甜味剂和防腐 剂为安赛蜜、 糖精钠、 甜蜜 素、 阿斯巴甜、 山梨酸、 苯甲酸、 阿力甜、 对 羟 基苯甲酸甲酯、 甜菊糖苷、 纽甜、 对 羟基苯甲酸乙酯、 对羟基苯甲酸丙酯、 对羟基苯甲酸异丙说　明　书 1/9 页 3 CN 115541772 A 3