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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210786580.6 (22)申请日 2022.07.04 (83)生物保 藏信息 CGMCC NO.15751 2018.0 5.11 CGMCC NO.1045 3 2015.01.27 CGMCC NO.20676 2020.09.18 (71)申请人 微康益生菌 (苏州) 股份有限公司 地址 215200 江苏省苏州市吴江经济技 术 开发区龙桥路10 33号 (72)发明人 方曙光 卢容燕 郭晓娟 汪欣 朱建国 (74)专利代理 机构 北京品源专利代理有限公司 11332 专利代理师 刘二艳(51)Int.Cl. A23C 9/123(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12R 1/225(2006.01) C12R 1/25(2006.01) C12R 1/46(2006.01) (54)发明名称 一种植物乳杆菌Lp90在制备高产乙酸乙酯 产品中的应用及包 含其的酸 奶发酵剂 (57)摘要 本发明提供一种植物乳杆菌Lp90在制备高 产乙酸乙酯产品中的应用及包含其的酸奶发酵 剂。 植物乳杆菌Lp90具有产乙酸乙酯高, 增香快 的优点。 本发 明还提供了一种高产乙酸乙酯的酸 奶发酵剂, 所述高产乙酸乙酯的酸奶发酵剂包括 植物乳杆菌Lp90菌粉、 嗜热链球菌S T36菌粉和保 加利亚乳杆菌LB42菌粉。 该发酵剂能够在较短的 时间内就生成高含量的乙酸乙酯, 且乙酸乙酯 含 量可维持较长时间不变, 赋予酸奶怡人的果香 味。 权利要求书2页 说明书11页 附图2页 CN 115191485 A 2022.10.18 CN 115191485 A 1.一种植物乳杆菌Lp90在制备高产乙酸乙酯产品中的应用; 所述植物乳杆菌Lp90为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)Lp90菌株, 保藏于中 国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心, 保藏时间为2015年1月27日, 保藏编号为 CGMCC NO.10453, 地址为: 北京市朝阳区北辰西路1号院3号。 2.一种高产乙酸乙酯的酸奶发酵剂, 其特征在于, 所述高产乙酸乙酯的酸奶发酵剂包 括植物乳杆菌Lp90 菌粉、 嗜热链球菌ST3 6菌粉和德氏乳杆菌保加利亚 亚种LB42菌粉。 3.根据权利要求2所述的高产乙酸乙酯的酸奶发酵剂, 其特征在于, 所述植物乳杆菌 Lp90菌粉、 嗜热链球菌ST36菌粉和德氏乳杆菌保加利亚亚种LB42菌粉的活菌数比为1: (100‑10000):(100‑10000)。 4.一种根据权利要求2或3所述的高产乙酸乙酯的酸奶发酵剂的制备方法, 其特征在 于, 所述制备 方法包括以下步骤: (1)将活化后植物乳杆菌Lp90菌株、 嗜热链球菌ST36菌株和德氏乳杆菌保加利亚亚种 LB42菌种分别接种于 培养基中, 进行发酵, 得到发酵 液; (2)将步骤(1)得到的发酵液分别离心后, 将收集得到的菌体并分别与冻干保护剂混 合, 进行乳化, 得到乳杆菌Lp90菌乳化液、 嗜热链球菌ST36乳化液和德氏乳杆菌 保加利亚亚 种LB42乳化液; (3)将步骤(2)得到的乳杆菌Lp90菌乳化液、 嗜热链球菌ST36乳化液和德氏乳杆菌保加 利亚亚种LB42乳化液依次进 行冻干、 粉碎和过筛后, 得到植物乳杆菌Lp90菌粉、 嗜热链球菌 ST36菌粉和德氏乳杆菌保加利亚 亚种LB42菌粉; (4)将步骤(3)得到的植物乳杆菌Lp90菌粉、 嗜热链球菌ST36菌粉和德氏乳杆菌保加利 亚亚种LB42菌粉混合, 得到高产乙酸乙酯的酸 奶发酵剂。 5.根据权利要求4所述的高产乙酸乙酯的酸奶发酵剂的制备方法, 其特征在于, 步骤 (1)中, 所述活化的具体步骤为: (a)将菌株接种至液体MRS培养基中, 在35 ‑40℃下培养45 ‑50h, 得到第一代菌种; 其中, 所述菌株的接种量 为1‑5%; (b)将步骤(a)得到的第一代菌种与脱脂奶混合, 在35 ‑40℃下培养14 ‑18h, 得到第二代 菌种; 其中, 所述第一代菌种与脱脂奶的体积比为1:(8 ‑10); (c)将步骤(b)得到的第二代菌种与脱脂奶混合, 在35 ‑40℃下培养14 ‑18h, 得到第三代 菌种; 其中, 所述第二代菌种与脱脂奶的体积比为1:(8 ‑10); 优选地, 步骤(1)中, 所述培 养基为改良MRS培 养基; 优选地, 所述改良MRS培养基按重量份数计包括: 胰蛋白胨8 ‑12份、 酵母膏4 ‑6份、 葡萄 糖18‑22份、 柠檬酸二铵1 ‑3份、 乙酸钠2 0‑30份、 硫酸镁0.1 ‑1份、 硫酸锰0.05 ‑0.2份、 吐温80 0.5‑2份、 磷酸 二氢钾5‑7份、 硫酸 亚铁0.01‑0.05份和水10 00份; 优选地, 步骤(1)中, 所述活化后植物乳杆菌Lp90菌株、 嗜热链球菌ST36菌株和德氏乳 杆菌保加利亚 亚种LB42菌种的接种量各自独立 地为1‑5%; 优选地, 步骤(1)中, 所述发酵的温度为3 5‑40℃, 发酵的时间为8 ‑12h; 优选地, 步骤(2)中, 所述离心的转速为 4000‑6000rpm; 优选地, 步骤(2)中, 所述冻干保护剂包括海藻糖、 蔗糖、 甘油或脱脂奶粉中的任意一种 或至少两种的组合, 优选为海藻糖、 蔗糖、 甘油和脱脂奶粉的组合;权 利 要 求 书 1/2 页 2 CN 115191485 A 2优选地, 所述海藻糖、 蔗糖、 甘油和脱脂奶粉的质量比为(10 ‑20):(1‑5):(1‑3):(1‑5); 优选地, 步骤(2)中, 所述菌体和冻干保护剂的质量比为1:(0.5 ‑2); 优选地, 步骤(3)中, 所述冻干的温度为 ‑40~‑20℃; 优选地, 步骤(3)中, 所述过筛的目数为10 ‑100目; 优选地, 步骤(3)中, 所述植物乳杆菌Lp90菌粉、 嗜热链球菌ST36菌粉和德氏乳杆菌保 加利亚亚种LB42菌粉中的活菌数均在2 ×1010cfu/g以上。 6.一种高产乙酸乙酯的酸奶, 其特征在于, 所述高产乙酸乙酯的酸奶的制备原料包括 脱脂奶、 白砂糖、 权利要求2所述高产乙酸乙酯的酸 奶发酵剂。 7.根据权利要求6所述的高产乙酸乙酯的酸奶, 其特征在于, 所述高产乙酸乙酯的酸奶 发酵剂的接种量 为所述脱脂 乳总质量的0.0 04‑0.02%; 优选地, 所述白砂糖的添加量 为所述脱脂 乳总质量的4 ‑6%。 8.根据权利要求6或7所述的高产乙酸乙酯的酸奶, 其特征在于, 所述高产乙酸乙酯的 酸奶的制备原料还 包括益生元; 优选地, 所述 益生元的添加量 为0.005‑0.01%; 优选的, 所述益生元选自低聚果糖、 低聚半乳糖、 菊粉或聚葡萄糖 中的任意一种或至少 两种的组合。 9.一种根据权利要求6 ‑8中任一项所述高产乙酸乙酯的酸奶的制备方法, 其特征在于, 所述制备 方法包括以下步骤: 以脱脂奶为原料, 通过加入白砂糖调整固形物含量, 经均质、 杀菌后冷却, 接种酸奶发 酵剂和任选的益 生元, 进行发酵, 得到所述高产乙酸乙酯的酸 奶。 10.根据权利要求9所述高产乙酸乙酯的酸奶的制备方法, 其特征在于, 所述均质的压 力为14‑21MPa, 均质的温度为6 0‑85℃; 优选地, 所述杀菌为70 ‑80℃下巴氏杀菌20 ‑40min或100‑110℃下巴氏杀菌 5‑15min。权 利 要 求 书 2/2 页 3 CN 115191485 A 3
专利 一种植物乳杆菌Lp90在制备高产乙酸乙酯产品中的应用及包含其的酸奶发酵剂
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