ICS 13.060 C 51 山 DB37 东 省 地 方 标 准 DB37/T 4145—2020 水质 丙烯酰胺的测定 液相色谱-串联质谱法 Water quality—Determination of acrylamide—Liquid chromatography-Tandem mass spectrometry 2020 - 09 - 25 发布 山东省市场监督管理局 2020 - 10 - 25 实施 发 布 DB37/T 4145—2020 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 方法原理 .......................................................................... 1 4 试剂和材料 ........................................................................ 1 5 仪器与设备 ........................................................................ 2 6 样品 .............................................................................. 2 7 分析步骤 .......................................................................... 2 8 结果计算与表示 .................................................................... 4 9 精密度与准确度 .................................................................... 5 10 质量保证和质量控制 ............................................................... 5 I DB37/T 4145—2020 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由山东省住房和城乡建设厅提出并组织实施。 本标准由山东省城镇给水排水标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：山东省城市供排水水质监测中心、国家城市供水水质监测网青岛监测站、国家城 市供水水质监测网杭州监测站、山东省分析测试中心、山东省济南生态环境监测中心、国家城市供水水 质监测网武汉监测站。 本标准主要起草人：辛晓东、贾瑞宝、孙韶华、赵清华、许燕、宋艳、王晓芳、黄允河、赵汝松、 张厚勇、陈露、葛璇、王晓利、李小敏、梁玉。 II DB37/T 4145—2020 水质 丙烯酰胺的测定 液相色谱-串联质谱法 警告：实验中使用的溶剂和试剂均具有一定的毒性，对健康具有潜在的危害，应尽量避免与这些化 学品的直接接触。样品制备过程应在通风橱中进行，操作时应按规定要求佩戴防护器具,避免接触皮肤 和衣物。 1 范围 本标准规定了测定生活饮用水及其水源水中丙烯酰胺的液相色谱-串联质谱法。 本标准适用于生活饮用水及其水源水中丙烯酰胺的测定。 进样量10 μL时，本标准的方法检出限为0.036 μg/L，测定下限为0.15 μg/L。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 5750.2—2006 生活饮用水标准检验方法 水样的采集与保存 GB/T 5750.3—2006 生活饮用水标准检验方法 水质分析质量控制 GB/T 32465 化学分析方法验证确认和内部质量控制要求 GB/T 33087 仪器分析用高纯水规格及试验方法 HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范 HJ/T 164 地下水环境监测技术规范 3 方法原理 样品经0.22 μm滤膜过滤后直接进样，经液相色谱仪分离后进入串联质谱仪，采用多反应监测（MRM） 模式，根据保留时间和特征离子峰进行定性分析，内标法定量分析。 4 试剂和材料 4.1 一次性针头过滤器：0.22 μm，聚四氟乙烯（PTFE）材质。 4.2 一次性注射器：2.5 mL。 4.3 高纯水：水质应满足 GB/T 33087 的规定。 4.4 甲醇：色谱纯。 4.5 载气：高纯氮，纯度≥99.999 %。 1 DB37/T 4145—2020 4.6 丙烯酰胺标准溶液：ρ=1 000 mg/L，溶剂为甲醇，有证标准物质。 4.7 丙烯酰胺同位素（D3-丙烯酰胺）标准溶液：ρ=1 000 mg/L，溶剂为甲醇，有证标准物质。 4.8 丙烯酰胺标准贮备液：ρ=10.0 mg/L。取 1.00 mL 丙烯酰胺标准溶液（4.6），用甲醇（4.4）稀释 并定容至 100 mL，配制 10.0 mg/L 丙烯酰胺标准贮备液。于 4 ℃以下冷藏密封避光保存。 4.9 D3-丙烯酰胺标准贮备液：ρ=10.0 mg/L。取 1.00 mL D3-丙烯酰胺标准溶液（4.7），用甲醇（4.4） 稀释并定容至 100 mL，配制 10.0 mg/L D3-丙烯酰胺标准贮备液。于 4 ℃以下冷藏密封避光保存。 4.10 丙烯酰胺标准使用液：ρ=10.0 μg/L。取 100 μL 丙烯酰胺标准贮备液（4.8），用高纯水（4.3） 稀释并定容至 100 mL，配制 10.0 μg/L 丙烯酰胺标准使用液。 4.11 D3-丙烯酰胺标准使用液：ρ=10.0 μg/L。取 100 μL D3-丙烯酰胺标准贮备液（4.9），用高纯水 （4.3）稀释并定容至 100 mL，配制 10.0 μg/L D3-丙烯酰胺标准使用液。 5 仪器与设备 5.1 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源。 5.2 色谱柱：C18 色谱柱或其他性能等效的色谱柱。 5.3 样品瓶：2 mL。 5.4 容量瓶：100 mL 和 10 mL。 5.5 采样瓶：棕色玻璃瓶，具玻璃塞。 5.6 微量注射器：1 000 μL。 6 样品 6.1 样品的采集与保存 按照HJ/T 91和HJ/T 164的相关规定采集样品。用采样瓶（5.5）采集样品。 按照GB/T 5750.2—2006的相关规定保存样品。样品采集后在4 ℃以下冷藏保存，24 h内完成水样过 滤处理并上机测试。若水样中存在残留氯，加入抗坏血酸去除余氯。 6.2 试样制备 样品经一次性针头过滤器（4.1）过滤，取样品于10 mL容量瓶中，加入400 μL D3-丙烯酰胺标准使 用液（4.11），用样品定容至刻度。置于进样瓶中，待测。如水样浓度较高或基体复杂，可将样品适当 稀释后，再经过一次性针头过滤器过滤。 6.3 空白试样制备 用高纯水（4.3）代替样品，按照与试样制备（6.2）相同的步骤制备空白试样。 7 分析步骤 2 DB37/T 4145—2020 7.1 色谱分析条件 7.1.1 流动相：A 相——甲醇（4.4），B 相——水（4.3），A:B=10:90（V:V），等度洗脱。 7.1.2 流速：0.3 mL/min。 7.1.3 柱温：30 ℃。 7.1.4 进样体积：10 μL。 7.2 质谱分析条件 7.2.1 离子源：电喷雾离子源，正离子模式。 7.2.2 离子源温度：350 ℃。 7.2.3 扫描方式：MRM，多反应监测条件见表 1。 表1 质谱分析参考条件 物质名称 母离子 丙烯酰胺 72.1 D3-丙烯酰胺 Fragment CE V V 55.1 43 9 27.1 43 17 58 44 9 43.8 44 15 子离子 75 7.3 校准曲线的绘制 7.3.1 本方法使用内标法定量。 7.3.2 校准系列的配制：取 5 个 10 mL 容量瓶，用微量注射器（5.6）依次准确加入 200 μL、500 μL、 1 000 μL、 1 500 μL 和 2 000 μL 丙烯酰胺标准使用液 （4.10） 及 400 μL D3-丙烯酰胺标准使用液 （4.11）， 用高纯水（4.3）定容至刻度，配制浓度为 0.20 μg/L、0.50 μg/L、1.00 μg/L、1.50 μg/L 和 2.00 μ g/L 的校准曲线系列。现用现配。 7.3.3 按照质量浓度从低到高依次进样，以标准系列溶液中目标组分的浓度与内标物浓度的比值为横 坐标，以其对应的峰面积与内标物峰面积的比值为纵坐标，建立校准曲线。 7.4 试样测定 7.4.1 采用自动进样器进样，进样量为 10 μL。 7.4.2 按照与校准曲线的绘制（7.3）相同的步骤进行试样（6.2）的测定。 7.4.3 丙烯酰胺和 D3-丙烯酰胺 MRM 色谱图见图 1、图 2 所示。 3 DB37/T 4145—2020 图1 丙烯酰胺 MRM 色谱图 图2 D3-丙烯酰胺 MRM 色谱图 7.5 空白试验 按照与试样测定（7.4）相同的步骤进行空白试样（6.3）的测定。 8 结果计算与表示 8.1 定性结果 根据丙烯酰胺和D3-丙烯酰胺MRM色谱图中的保留时间和特征离子对进行定性分析。 8.2 定量结果 根据计算公式（1）计算样品中组分的含量，结果以微克每升（μg/L）表示。丙烯酰胺的定量离子 对为72.1＞55.1，D3-丙烯酰胺的定量离子对为75＞58。测定结果位数的保留与测定下限一致，最多保 留三位有效数字。 = Ax  is  f ..................................... (1) Ais  RF 式中：  ——水样中目标化合物的质量浓度，单位为微克每升（μg/L）； is ——水样中同位素内标化合物的质量浓度，单位为微克每升（μg/L）； Ax ——水样中目标化合物对应的离子峰面积； Ais ——水样中同位素内标化合物对应