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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210981909.4 (22)申请日 2022.08.16 (71)申请人 苏州德运康瑞生物科技有限公司 地址 215000 江苏省苏州市吴江经济技 术 开发区联杨路南侧、 龙桥路西侧(联杨 路139号) (72)发明人 张明霞 王坤琴 李寅青 陈琴 陈彬超 范璐 范兆飞 顾志鹏 (74)专利代理 机构 北京商专润文专利代理事务 所(普通合伙) 11317 专利代理师 张鑫 (51)Int.Cl. C12M 1/33(2006.01) C12M 1/00(2006.01) B01L 3/00(2006.01)C12Q 1/6806(2018.01) (54)发明名称 一种单细胞测序芯片及应用其的测序样本 制备方法 (57)摘要 本发明公开了一种单细胞测序芯片及应用 其的测序 样本制备方法。 该芯片 包括一块顶板和 一块底板, 顶板放置在底板上并且能够相对滑 动; 顶板的底 面前部形成有一行并排排列的上凹 槽, 后部形成有一条长条形的上通槽, 上通槽的 两端均延伸出一条向后侧倾斜弯折的边槽; 底板 的顶面前部形成有一条长条形的下通槽, 后部形 成有一行并排排列的下凹槽; 其中, 各上凹槽位 于各直槽之间的正上方, 上通槽位于各下凹槽的 正上方。 本发 明中的单细胞测序芯片设置有能够 分别通入细胞以及微球和裂解液的顶板和底板, 并且使两者相对滑动进行交错, 从而使细胞以及 微球和裂解液进行混合反应, 从而实现便捷高效 的单细胞测序工作, 并且还降低了细胞受到污染 的风险。 权利要求书2页 说明书4页 附图3页 CN 115491294 A 2022.12.20 CN 115491294 A 1.一种单细胞测序芯片, 其特征在于: 包括一块顶板(1)和一块底板(2), 所述顶板(1) 放置在所述底板(2)上并且能够相对滑动; 所述顶板(1)的底面前部形成有一行并排排列的上凹槽(3), 后部形成有一条长条形的 上通槽(4); 所述底板(2)的顶面前部形成有一条长条形的下通槽(5), 后部形成有一行并排排列的 下凹槽(6), 所述下通槽(5)由多个直槽(51)和弯槽(52)相互 交替连通组成; 其中, 各所述上凹槽(3)位于各所述直槽(51)之间的正上方, 所述上通槽(4)位于各所 述下凹槽(6)的正上 方, 并且所述上凹槽(3)的数量和间距均 与所述下凹槽(6)一 致。 2.根据权利要求1所述的一种单细胞测序芯片, 其特征在于: 所述下通槽(5)的两端均 连接有圆形的下 前槽(53)。 3.根据权利要求2所述的一种单细胞测序芯片, 其特征在于: 所述顶板(1)的底面前部 形成有两个圆形的上前槽(7), 两个所述上前槽(7)分别位于两个所述下前槽(53)的正上 方。 4.根据权利要求1所述的一种单细胞测序芯片, 其特征在于: 所述上通槽(4)的两端均 延伸出一条向后侧倾斜弯折的边槽(41), 两条所述边槽(41)的末端均连接有圆形的后槽 (42)。 5.根据权利要求1所述的一种单细胞测序芯片, 其特征在于: 所述直槽(51)的两端的前 侧面分别与相 邻的两个所述弯槽(52)相连通, 并且所述直槽(51)的其中一端的末端延伸出 一个突出部(54), 所述突出部(54)位于与该所述直槽(51)相邻的所述上凹槽(3)的其中一 侧。 6.根据权利要求5所述的一种单细胞测序芯片, 其特征在于: 所述上凹槽(3)的另一侧 延伸出一条细槽(31), 所述细槽(31)的末端延伸到相邻的另一条 所述直槽(51)的正上 方。 7.根据权利要求1所述的一种单细胞测序芯片, 其特征在于: 所述顶板(1)上具有多行 所述上凹槽(3), 所述底板(2)上具有多行所述下凹槽(6), 其中, 各行所述上凹槽(3)分别位 于相邻的两行所述下 凹槽(6)之 间的正上方, 并且 各行所述下凹槽(6)分别位于相 邻的两行 所述上凹槽(3)之间的正下 方。 8.一种应用了权利要求1 ‑7任一项所述的单细胞测序芯片的测序样本制备方法, 其特 征在于: 包括以下步骤 1)将所述顶板(1)放置在 所述底板(2)上, 其 中各所述上凹槽(3)位于各所述下通槽(5) 的正上方并且相互连通, 所述上通槽(4)位于各 所述下凹槽(6)的正上 方并且相互连通; 2)将含有多个单细胞(8)的细胞上样注入所述下通槽(5), 使各所述单细胞(8)被捕获 到各所述上凹槽(3)中; 3)将含有多个微球(9)的微球和裂解液上样注入所述上通槽(4), 使各所述微球(9)被 捕获到各 所述下凹槽(6)中; 4)将所述顶板(1)和所述底板(2)相对滑动, 使各所述上凹槽(3)分别滑动到各所述下 凹槽(6)的正上 方; 5)各所述单细胞(8)分别与各所述微球(9)在裂解液中混合, 使所述单细胞(8)裂解并 且其中的mRNA被所述 微球(9)捕获。 9.根据权利要求8所述的一种应用了单细胞测序芯片的测序样本制备方法, 其特征在权 利 要 求 书 1/2 页 2 CN 115491294 A 2于: 还包括以下步骤 6)将清洗试剂注入所述下通槽(5)中, 重复步骤4)进行清洗 。 10.根据权利要求9所述的一种应用了单细胞测序芯片的测序样本制备方法, 其特征在 于: 还包括以下步骤 7)将RT试剂注入所述下通槽(5)中, 重复步骤4)进行RT反应。权 利 要 求 书 2/2 页 3 CN 115491294 A 3
专利 一种单细胞测序芯片及应用其的测序样本制备方法
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