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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211030444.0 (22)申请日 2022.08.26 (71)申请人 苏州德运康瑞生物科技有限公司 地址 215000 江苏省苏州市吴江经济技 术 开发区联杨路南侧、 龙桥路西侧(联杨 路139号) (72)发明人 张明霞 李寅青 王坤琴 陈彬超 范璐 范兆飞 顾志鹏 (74)专利代理 机构 北京商专润文专利代理事务 所(普通合伙) 11317 专利代理师 张鑫 (51)Int.Cl. C12M 1/34(2006.01) C12M 1/00(2006.01) C12Q 1/6806(2018.01)C12Q 1/6869(2018.01) (54)发明名称 一种测序芯片及应用其的单细胞测序样本 制备方法 (57)摘要 本发明公开了一种测序芯片及应用其的单 细胞测序 样本制备方法。 该芯片 包括一块顶板和 一块底板, 顶板放置在底板上并且能够相对滑 动; 顶板的底面形成有并排排列的多个上凹槽; 底板的顶面形成有多条并排排列的长条形的下 通槽, 以及并排排多个下凹槽; 其中, 各上凹槽位 于各下通槽之间的正上方, 并且 上凹槽的数量和 间距均与下凹槽一致。 本发明中的测序芯片设置 有能够分别通入细胞的顶板和底板, 并且使两者 相对滑动进行交错, 从而使细胞进行混合反应, 从而实现便捷高效的单细胞测序工作, 并且还降 低了细胞受到 污染的风险。 权利要求书1页 说明书3页 附图3页 CN 115322886 A 2022.11.11 CN 115322886 A 1.一种测序芯片, 其特征在于: 包括一块顶板 (1) 和一块底板 (2) , 所述顶板 (1) 放置在 所述底板 (2) 上并且能够相对滑动; 所述顶板 (1) 的底面形成有并排排列的多个上凹槽 (3) , 所述上凹槽 (3) 呈方形并且其 内部设置有两条相对称的捕获结构 (4) ; 所述底板 (2) 的顶面形成有多条并排排列的长条形的下通槽 (5) , 以及并排排列的多个 下凹槽 (6) ; 其中, 各所述上凹槽 (3) 位于各所述下通槽 (5) 之间 的正上方, 并且所述上凹槽 (3) 的数 量和间距均 与所述下凹槽 (6) 一 致。 2.根据权利要求1所述的一种测序芯片, 其特征在于: 各相邻的两个所述上凹槽 (3) 的 形状相反。 3.根据权利要求2所述的一种测序芯片, 其特征在于: 各相邻的两个所述下通槽 (5) 并 不位于同一条直线上。 4.根据权利要求1所述的一种测序芯片, 其特征在于: 所述捕获结构 (4) 的其中一侧呈 直角形, 另一侧呈弧形。 5.根据权利要求1所述的一种测序芯片, 其特征在于: 所述顶板 (1) 上具有多行所述上 凹槽 (3) , 所述底板 (2) 上具有多行所述下凹槽 (6) , 其中, 各行所述上凹槽 (3) 分别位于各相 邻的两行所述下 凹槽 (6) 之 间的正上方, 并且 各行所述下凹槽 (6) 分别位于各相 邻的两行所 述上凹槽 (3) 之间的正下 方。 6.一种应用了权利要求1 ‑5任一项所述的测序芯片的单细胞测序样本制备方法, 其特 征在于: 包括以下步骤 1) 将多个微球 (9) 预 先分别铺设到各 所述下凹槽 (6) 中; 2) 将所述顶板 (1) 放置在 所述底板 (2) 上, 其 中各所述上凹槽 (3) 位于各所述下通槽 (5) 的正上方并且相互连通; 3) 将含有多个单细胞 (8) 的细胞上样注入所述下通槽 (5) , 使各所述单细胞 (8) 被捕获 到各所述上凹槽 (3) 中; 4) 将所述顶板 (1) 和所述底板 (2) 相对滑动, 使各所述上凹槽 (3) 分别滑动到各所述下 凹槽 (6) 的正上 方; 5) 各所述单细胞 (8) 分别与各所述微球 (9) 混合, 使所述单细胞 (8) 裂解并且其中的 mRNA被所述 微球 (9) 捕获。 7.根据权利要求6所述的一种应用了测序芯片的单细胞测序样本制备方法, 其特征在 于: 还包括以下步骤 6) 将清洗试剂注入所述下通槽 (5) 中, 重复步骤4) 进行清洗 。 8.根据权利要求7所述的一种应用了测序芯片的单细胞测序样本制备方法, 其特征在 于: 还包括以下步骤 7) 将RT试剂注入所述下通槽 (5) 中, 重复步骤4) 进行RT反应。权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 115322886 A 2一种测序芯片及应用其的单细胞测序样本制备方 法 技术领域 [0001]本发明涉及 生物设备领域, 特别涉及一种测 序芯片及应用其的单细胞测 序样本制 备方法。 背景技术 [0002]在对细胞核酸进行测 序的生物实验中, 需要将细胞与微球以及裂解液混合使其裂 解, 从而使用微球捕获细胞中的mRNA等成分, 以实现测序样本的制备。 在现有的实验方法 中, 一般是设计单独的空间逐个对单细胞进 行实验操作, 然而限于细胞本身的较小的尺寸、 较大的数量以及容易受到污染的特性, 不仅操作非常不方便, 并且需要耗费大量的时间, 此 外, 还会增加细胞受到 污染的风险。 发明内容 [0003]为了解决上述的问题, 本发明提供了一种测 序芯片及应用其的单细胞测 序样本制 备方法。 [0004]本发明提供的一种测 序芯片包括一块顶板和一块底板, 所述顶板放置在所述底板 上并且能够相对滑动; 所述顶板的底面形成有并排排列的多个上凹槽, 所述上凹槽呈方形 并且其内部 设置有两条相对称的捕获结构; 所述底板的顶面形成有多 条并排排列的长条形 的下通槽, 以及并排排列的多个下 凹槽; 其中, 各所述上 凹槽位于各所述下通槽之间的正上 方, 并且所述上凹槽的数量和间距均 与所述下凹槽一 致。 [0005]在一些实施方式中, 各相邻的两个所述上凹槽的形状相反。 由此, 各上凹槽交错设 置。 [0006]在一些实施方式中, 各相邻的两个所述下通槽并不位于同一条直线上。 由此, 相邻 的各下通槽分别与各 上凹槽相连通时的位置不 一致。 [0007]在一些实施方式中, 所述捕获结构的其中一侧呈直角形, 另一侧呈弧形。 由此, 描 述了捕获结构的具体结构。 [0008]在一些实施方式中, 所述顶板上具有多行所述上凹槽, 所述底板上具有多行所述 下凹槽, 其中, 各行所述上 凹槽分别位于各相邻的两行所述下 凹槽之间的正上方, 并且各行 所述下凹槽分别位于各相邻的两行所述上凹槽之间的正下方。 由此, 顶板和底板配合能够 同时进行多组样本制备工作。 [0009]本发明提供的一种应用了上述测序芯片的单细胞测 序样本制备方法, 包括以下步 骤: 1) 将多个微球预 先分别铺设到各 所述下凹槽中; 2) 将所述顶板放置在所述底板上, 其中各所述上凹槽位于各所述下通槽的正上方 并且相互连通; 3) 将含有多个单细胞的细胞上样注入所述下通槽, 使各所述单细胞被捕获到各所 述上凹槽中;说 明 书 1/3 页 3 CN 115322886 A 3
专利 一种测序芯片及应用其的单细胞测序样本制备方法
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