(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211064371.7 (22)申请日 2022.09.01 (71)申请人 中国科学院上海微系统与信息技 术 研究所 地址 200050 上海市长 宁区长宁路865号 (72)发明人 冯世伦　蔡杲哲　赵建龙　 (74)专利代理 机构 上海泰博知识产权代理有限 公司 31451 专利代理师 魏峯 (51)Int.Cl. B01L 3/00(2006.01) C12M 1/34(2006.01) C12M 1/00(2006.01) C12Q 1/06(2006.01) C12Q 1/10(2006.01)C12Q 1/34(2006.01) (54)发明名称 一种用于病原菌快速检测的滑动微流控芯 片 (57)摘要 本发明涉及一种用于病原菌快速检测的滑 动微流控芯片。 该芯片从上而下为上层带通道的 PDMS(6)、 下层带通道的PDMS(7)、 基底(8)， 上层 带通道的PDMS(6)包 括各自以阵列形式且列交错 排布的若干第一圆腔室(1)和第一直通道(10)， 下层带通道的PDMS(7)包 括各自以阵列形式且列 交错排布的若干第二圆腔室(2)和第二直通道 (9)， 通过滑动上层带通道的PDMS(6)使得第一圆 腔室(1)与第二直通道(9)连接或分开、 第二圆腔 室(2)与第一直通道(10)连接或分开、 第一圆腔 室(1)和第二圆腔室(2)闭合或分开。 该芯片用于 快速、 免标记检测病原菌 。 权利要求书2页 说明书4页 附图3页 CN 115430469 A 2022.12.06 CN 115430469 A 1.一种用于病原菌快速检测的滑动微流控芯片， 其特征在于， 所述滑动微流控芯片从 上而下分别 为上层带通道的PDMS(6)、 下层带通道的PDMS(7)、 基底(8)， 所述下层带通道的 PDMS(7)和所述基底(8)连接， 所述上层带通道的PDMS(6)和下层带通道的PDMS(7)可以拼合 滑动， 所述上层带通道的PDMS(6)包括若干第一圆腔室(1)和若干第一直通道(10)， 所述单 个第一圆腔室(1)和单个第一直通道(10)各自以阵列形式布置在上层带通道的PDMS(6)， 所 述第一圆腔室(1)的列与所述第一直通道(10)的列交错排布， 所述下层带通道的PDMS(7)包 括若干第二圆腔室(2)和若干第二直通道(9)， 所述单个第二圆腔室(2)和单个第二直通道 (9)各自以阵列形式布置在下层带通道的PDMS(7)， 所述第二圆腔室(2)的列与所述第二直 通道(9)的列交错排布， 所述第一圆腔室(1)之间通过第二直通道(9)连接， 所述第二圆腔室 (2)之间通过第一直通道(10)连接， 通过滑动上层带通道的PDMS(6)使得所述第一圆腔室 (1)与所述第二直通道(9)连接或分开、 所述第二圆腔室(2)与所述第一直通道(10)连接或 分开、 所述第一圆腔室(1)和所述第二圆腔室(2)闭合或分开。 2.根据权利要求1所述的滑动微流控芯片， 其特征在于， 所述上层带通道的PDMS(6)和 所述下层带通道的P DMS(7)可以拼 合滑动是通过硅油实现。 3.根据权利要求1所述的滑动微流控芯片， 其特征在于， 所述下层带通道的PDMS(7)和 所述基底(8)连接是通过等离 子体键合实现； 基底(8)为玻璃基底。 4.根据权利要求1所述的滑动微流控芯片， 其特征在于， 所述第一圆腔室(1)的每个列 中第一个圆腔室和最后一个圆腔室分别设有进样口、 出样口； 所述第二圆腔室(2)的每个列 中第一个圆腔室和最后一个圆腔室 分别设有 进样口、 出样口。 5.一种如权利要求1所述滑动微 流控芯片的制备 方法， 包括： 在单晶玻璃片中央滴加硅油， 进行旋转匀胶， 将上层带通道的PDMS(6)面朝下放置于旋 涂有硅油的单晶玻璃片上， 静置， 取下上层带通道的PDMS(6)并与带有基底(8)的下层带通 道的PDMS(7)接触， 得到滑动微 流控芯片。 6.根据权利要求5所述的制备方法， 其特征在于， 所述硅油黏度 为5000‑10000cst； 旋涂 转速为20 00‑4000rpm； 静置时间为2 ‑10min。 7.一种如权利要求1所述的滑动微 流控芯片检测病原菌的方法， 包括： 将第一圆腔室(1)和第二圆腔室(2)分开并与第二直通道(9)进行连接， 将第二圆腔室 (2)与第一直通道(10)连接， 将病原菌、 Luria ‑Bertani肉汤和酶诱导剂混合， 通过第二直通 道(9)装入上层带通道的PDMS(6)的第一圆腔室(1)中， 将包含裂解缓冲液和酶底物的溶液 通过第一直通道(10)装入下层带通道的PDMS(7)的第二圆腔室(2)中， 滑动上层带通道的 PDMS(6)使得圆腔室(1)与第二直通道(9)分开、 第二圆腔室(2)与第一直通道(10)分开， 同 时第一圆腔室(1)和第二圆腔室(2)分开， 随后， 病原菌在含有肉汤的第一圆腔室(1)培养生 长， 并在酶诱导剂的作用下在细胞质中表达特异性酶， 然后滑动上层带通道的PD MS(6)使得 第一圆腔室(1)和第二圆腔室(2)对齐形成合并腔室(5)， 第二圆腔室(2)中的裂解 缓冲液将 裂解病原菌， 释放特异性酶， 使其催化酶底物反应产生荧光， 再测量合并腔室(5)的荧光信 号， 实现病原菌的定量分析。 8.根据权利要求7所述的方法， 其特征在于， 所述病原菌为大肠杆菌； 所述特异性酶为 β‑葡萄糖醛酸酶。 9.根据权利要求8所述的方法， 其特征在于， 所述Luria ‑Bertani肉汤工作浓度为1％ ‑权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115430469 A 215％， ； 酶诱导剂为甲基β ‑D‑葡萄糖醛酸钠溶液， 工作浓度为0.1mg/mL ‑0.4mg/mL； 裂解缓冲 液工作浓度为40 ‑60％； 酶底物为6 ‑氯‑4‑甲基伞形酮 ‑β‑D‑葡糖苷酸溶液， 工作浓度为 0.2mg/mL ‑0.8mg/mL。 10.根据权利要求7所述的方法， 其特征在于， 所述培养生长时间为1 ‑3小时； 荧光检测 时间为1‑3小时。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115430469 A 3