(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210625536.7 (22)申请日 2022.06.02 (71)申请人 河南省人民医院 地址 450000 河南省郑州市金 水区纬五路7 号 (72)发明人 郭燕　仓顺东　李祥　何静　张晖　 刘莉娜　付靖　徐登飞　 (74)专利代理 机构 郑州翊博专利代理事务所 (普通合伙) 41155 专利代理师 周玉青 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/11(2006.01) G01N 33/574(2006.01) G01N 33/573(2006.01)A61K 45/00(2006.01) A61K 31/7088(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) (54)发明名称 APOBEC3B在前列腺癌诊断、 预后预测及治疗 中的应用 (57)摘要 本发明属于医药生物 技术领域， 公开了一种 用于前列腺癌辅助诊断的分子标志物—— APOBEC3B。 APOBEC3B在前列腺癌的癌组织中高表 达， 在癌旁正常组织中低表 达； 而且， APOBEC3B在 前列腺癌细胞系中的表达水平显著高于正常前 列腺细胞株； 通过敲低APOBEC3B基因的表达水 平， 能明显抑制前列腺癌细胞的增殖、 迁移和侵 袭。 因此， APOBEC3B可以作为前列腺癌辅助诊断 的分子标志物； 通过检测样本中APOBEC3B的表 达 水平， 可以对前列腺癌进行辅助诊断， 为临床医 生对前列腺癌的诊断提供参 考依据。 权利要求书1页 说明书13页 序列表1页 附图5页 CN 114908172 A 2022.08.16 CN 114908172 A 1. APOBEC3B基因或蛋白的检测试剂在制备用于前列腺癌辅助诊断的产品中的应用。 2. APOBEC3B基因或蛋白的检测试剂在制备 预测前列腺癌预后的产品中的应用。 3.根据权利 要求1或2所述的应用， 其特征在于， 所述产品通过实时定量PCR、 基因芯片、 高通量测序平台、 免疫组织化学或酶联免疫吸附检测样 本中APOBEC3B基因或蛋白的表达水 平。 4.根据权利 要求3所述的应用， 其特征在于， 所述产品中含有扩增APOBEC3B基因的特异 性引物、 APOBE C3B基因杂交的探针与APOBE C3B蛋白特异性结合的抗体。 5. 根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 扩增APOBEC3B基因的特异性引物的核苷 酸序列如SEQ  ID NO.1和SEQ  ID NO.2； 所述 抗体为多克隆抗体、 单 克隆抗体或单域 抗体。 6.根据权利要求5所述的应用， 其特征在于， 所述样本包括组织、 细胞、 血清； 所述产品 为芯片、 制剂或试剂盒。 7.抑制APOBE C3B表达和/或功能的物质在 如下任一中的应用： （a1） 制备用于治疗前列腺癌的产品中的应用； （a2） 制备用于抑制肿瘤生长的产品， 或抑制肿瘤生长中的应用； 所述肿瘤为前列腺癌； （a3） 制备用于抑制前列腺癌细胞增殖的产品， 或抑制前列腺癌细胞增殖； （a4） 制备用于抑制前列腺癌细胞侵 袭的产品， 或抑制前列腺癌细胞侵 袭； （a5） 制备用于抑制前列腺癌细胞迁移的产品， 或抑制前列腺癌细胞迁移。 8.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 所述抑制APOBEC3B表达和/或功能的物质 包括特异靶向APOBEC3B基因的shRNA或特异靶向APOBEC3B基因 的siRNA或APOBEC3B蛋白的 抑制剂。 9. 根据权利要求8所述的应用， 其特征在于， 所述特异靶向APOBEC3B基因的shRNA核苷 酸序列如SEQ  ID NO.3或SEQ  ID NO.4所示。 10.一种治疗前列腺癌的药物， 其特征在于， 所述药物中含有抑制APOBEC3B表达和/或 功能的物质； 所述抑制APOBEC3B表达和/或功能的物质包括特异靶向APOBEC3B基因的shRNA 或特异靶向APOBE C3B基因的siRNA或APOBE C3B蛋白的抑制剂。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114908172 A 2APOBEC3B在前列腺癌诊断、 预后预测及治疗中的应用 技术领域 [0001]本发明属于医药生物技术领域， 具体涉及APOBEC3B在前列腺癌诊断、 预后预测及 治疗中的应用。 背景技术 [0002]前列腺癌(prostate  cancer)是男性常见 的恶性肿瘤之一， 已成为世界范围内男 性发病率第二的恶性肿瘤， 仅次于肺癌。 我国前列腺癌的发病率也呈明显升高趋势。 因前列 腺癌发病隐匿， 早期多无症状， 到发现时多已成为 晚期转移性患者， 预后较差。 如果能够早 期对前列腺癌进行明确诊断， 对于前列腺癌患者接受个体化治疗、 延 长生存期、 提高生存质 量和降低社会医疗负担具有重要的意义。 因此， 寻找可用于前列腺癌早期精准诊断与靶标 治疗的关键分子， 是目前 前列腺癌 患者所亟需的。 [0003]研究证实前列腺癌细胞突变率的增加是疾病 发生的驱动因素， 并最终导致增殖、 侵袭、 转移、 耐药性的发生。 对全基因组和外显子组数据的分析表明， 载脂蛋白B  mRNA编辑 酶催化多肽蛋白 ‑3B(APOBEC3B) ‑胞苷脱氨酶突变模式的存在可能在致癌的体细胞突变中 起重要作用。 APOBEC3B属于载脂蛋白B  mRNA编辑酶催化多肽(apolioprotein  B mRNA‑ editingenzyme catalytic  polypeptide， AP OBEC)家族成员， APOBEC3B及其家族成员已经 被证实对核酸上的胞苷有脱氨基作用， 可以通过诱发靶基因上的胞嘧啶脱氨基成为尿嘧啶 (C>U)导致基因组发生突变。 大量研究显示， APOBEC3B在多种肿瘤(包括乳腺癌、 肺癌、 子宫 内膜癌、 肝癌等)中呈持续高水平表达， 并且APOBEC3B表达通过经典癌基因的突变与癌症相 关联已经 得到广泛的证实。 但是APOBE C3B在前列腺癌发生发展中的作用尚未 见相关报道。 发明内容 [0004]针对现有技术中存在的问题和不足， 本发明的目的旨在提供APOB EC3B在前列腺癌 诊断、 预后预测及治疗中的应用。 [0005]为实现发明目的， 本发明采用的技 术方案如下： [0006]本发明第一方面提供了一种可用于前列腺癌辅助诊断及预后预测的生物标志物， 所述分子标志物为APOBEC3B基因(NCBI基因ID： 9582)或APOBEC3B蛋白(即APOBEC3B基因编 码的蛋白质)。 [0007]通过免疫组织化学染色法检测APOBEC3B 蛋白在前列腺癌的癌组织和癌旁正常组 织中表达情况， 发现APOBEC3B蛋白在前列腺癌的癌组织中的表达水平显著高于癌旁正常组 织； 说明APOBE C3B蛋白在前列腺癌组织中均有不同程度的表达上调。 [0008]通过实时荧光定量PCR(RT ‑qPCR)和Western  blot检测APOBEC3B在前列腺癌细胞 系LNCaP、 22Rv1、 Du145和PC ‑3以及正常前列腺细胞株RWPE ‑1中的表达情况， 发现APOBEC3B 在前列腺癌细胞系中的表达水平显著高于正常前列腺细胞系； 说明APOBEC3B在前列腺癌细 胞系中均有不同程度的表达上调。 [0009]对TCGA数据库中前列腺癌患者的生存信息进行分析发现， APOBEC3B低 表达的前列说　明　书 1/13 页 3 CN 114908172 A 3